| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-22页 |
| ·流感流行概况和危害 | 第11-13页 |
| ·流感在人类流行情况及危害 | 第11-12页 |
| ·流感在禽类流行情况及危害 | 第12-13页 |
| ·禽流感病毒的简介 | 第13-17页 |
| ·禽流感病毒简介 | 第13-14页 |
| ·禽流感非结构蛋白研究进展 | 第14-17页 |
| ·禽流感主要实验室诊断方法及其研究进展 | 第17-18页 |
| ·分子诊断方法 | 第17-18页 |
| ·血清学诊断方法 | 第18页 |
| ·蛋白质芯片及其研究进展 | 第18-20页 |
| ·蛋白质探针的制备 | 第19页 |
| ·反应条件的优化 | 第19页 |
| ·信号检测方式 | 第19-20页 |
| ·蛋白质芯片的应用 | 第20页 |
| ·目的和意义 | 第20-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-35页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·病毒与血清 | 第22页 |
| ·载体和菌株 | 第22页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第22页 |
| ·主要溶液及其配方 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-35页 |
| ·病毒培养、RNA 提取和提取RNA 的RT-PCR | 第23-24页 |
| ·重组表达质粒构建及鉴定 | 第24-25页 |
| ·诱导表达 | 第25-26页 |
| ·SDS-PAGE 电泳以及Western blotting 免疫印迹 | 第26-27页 |
| ·重组蛋白纯化及特异免疫反应性鉴定 | 第27-28页 |
| ·蛋白芯片的制备流程 | 第28-33页 |
| ·AIV 全病毒制备 | 第33页 |
| ·诊断蛋白芯片制备及抗原浓度的优化 | 第33-34页 |
| ·诊断蛋白芯片特异性和准确性试验 | 第34页 |
| ·比较芯片和琼扩对实验感染鸡血清的检测结果 | 第34页 |
| ·诊断蛋白芯片稳定性试验 | 第34页 |
| ·诊断蛋白芯片的保存时间 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-41页 |
| ·NS1 RT-PCR | 第35页 |
| ·pET30a（+）-NS1 的构建 | 第35-36页 |
| ·未纯化蛋白和纯化蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第36-37页 |
| ·未纯化的和纯化的表达蛋白Western blot 分析 | 第37页 |
| ·点样浓度的选择 | 第37-38页 |
| ·蛋白芯片特异性和准确性试验 | 第38-39页 |
| ·比较芯片和琼扩对实验感染鸡血清的检测结果 | 第39-40页 |
| ·蛋白芯片稳定性试验 | 第40页 |
| ·蛋白芯片保存时间 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-45页 |
| ·蛋白原核表达系统的选择 | 第41-42页 |
| ·利用NS1 蛋白能够鉴别感染和免疫 | 第42页 |
| ·结合胶体金银染方法将蛋白芯片可视化 | 第42-43页 |
| ·蛋白芯片工作参数的确定 | 第43页 |
| ·应用可视化蛋白芯片鉴别感染和免疫的可行性分析 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第53页 |
