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猪SRPK1及SRPK3基因的克隆、表达及多态性研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 引言第11-26页
   ·骨骼肌的发生和发育第11-13页
     ·骨骼肌的发生过程第11页
     ·骨骼肌发育过程第11-12页
     ·骨骼肌发生和发育过程中的调控因子第12-13页
   ·SR激酶第13-18页
     ·RNA剪接和细胞周期调控的联系因子第13-14页
     ·磷酸化SR蛋白的其他激酶第14-15页
     ·SRPK研究进展第15-16页
     ·选择性剪接作用原理及作用因子的研究进展第16-18页
   ·骨骼肌损伤第18-24页
     ·骨骼肌损伤的实验动物模型第19-20页
     ·EIMD变化阶段第20-21页
     ·肌卫星细胞激活与成肌分化的调控第21-22页
     ·骨骼肌损伤后的炎症反应及修复第22-24页
   ·本研究的目的和意义第24-26页
2 材料与方法第26-42页
   ·实验材料第26-28页
     ·实验动物第26页
     ·菌株和克隆载体第26页
     ·主要仪器设备第26-27页
     ·主要药品和酶第27页
     ·缓冲液及主要溶液的配制第27-28页
     ·工具酶及试剂盒第28页
   ·实验方法第28-42页
     ·耳组织样DNA的提取第28-29页
     ·组织样总RNA的提取与检测第29-30页
     ·引物设计与合成第30-32页
     ·大白猪SRPK1、SRPK3基因克隆第32-36页
     ·PCR-SSCP检测第36-38页
     ·基因多态性的统计方法第38-39页
     ·Real Time PCR反应第39页
     ·石蜡切片及HE染色第39-40页
     ·主要分子生物学软件及统计分析软件第40-42页
3 结果与分析第42-67页
   ·大白猪SRPK1、SRPK3基因的克隆第42-44页
     ·猪SRPK1基因CDS区及部分5'UTR序列克隆测序第42页
     ·反向克隆SRPK1部分5'UTR第42-43页
     ·猪SRPK3基因CDS区克隆第43-44页
   ·猪SRPK1、SRPK3序列结构分析第44-51页
     ·猪SRPK1、SRPK3一级结构分析第44-45页
     ·猪SRPK1、SRPK3二级结构分析第45-47页
     ·猪SRPK1、SRPK3的功能结构域分析第47-48页
     ·猪SRPK1、SRPK3基因分子进化分析第48-50页
     ·SRPK1转录结合位点预测第50-51页
   ·PCR-SSCP分析结果第51-53页
   ·组织表达谱构建第53-58页
     ·扩增曲线和溶解曲线的绘制第53-55页
     ·定量分析第55-58页
   ·骨骼肌损伤及肌分化过程中SRPK1、SRPK3的表达第58-60页
     ·病理症状第58页
     ·病理性结果第58-60页
   ·构建骨骼肌修复发育过程中SRPK1、SRPK3与骨骼发育相关因子相关性分析第60-67页
     ·MyoD、FoxOI、MEF2A、MEF2B、MEF2D在骨骼肌损伤修复过程中的表达情况第60-65页
     ·成肌因子相关性分析第65-67页
4 讨论第67-72页
   ·SRPK1、SRPK3基因的克隆与生物信息学分析第67页
   ·SRPK1、SRPK3基因的多态性分析第67-69页
   ·猪的SRPK1、SRPK3基因的组织表达特性分析第69页
   ·猪的SRPK1、SRPK3基因在骨骼肌损伤修复的表达第69-70页
   ·骨骼肌发育相关因子相关性分析第70-72页
5 结论第72-73页
致谢第73-74页
参考文献第74-80页
附录第80-85页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第85页

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