摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
1 前言 | 第10-30页 |
·小麦温光敏雄性不育研究进展 | 第11-14页 |
·小麦温光敏雄性不育的育性敏感时期 | 第12页 |
·小麦温光敏雄性不育的细胞学研究 | 第12-13页 |
·小麦温光敏雄性不育败育机理分子生物学研究 | 第13-14页 |
·植物细胞骨架的研究进展 | 第14-20页 |
·细胞骨架与减数分裂 | 第15-16页 |
·植物微管、微丝结合蛋白 | 第16-20页 |
·植物微管结合蛋白 | 第17-19页 |
·植物微丝结合蛋白 | 第19-20页 |
·细胞骨架结构与植物雄性不育 | 第20-21页 |
·小分子RNA(small RNAs,sRNA) | 第21-29页 |
·miRNA对非生物逆境胁迫的响应 | 第24-27页 |
·氧化应激反应 | 第25-26页 |
·miRNA响应干旱胁迫 | 第26页 |
·miRNA响应冷胁迫 | 第26-27页 |
·siRNA参与胁迫响应 | 第27-28页 |
·miRNA的转录调控 | 第28-29页 |
·本研究的目的意义 | 第29-30页 |
2 实验材料和方法 | 第30-38页 |
·供试材料 | 第30页 |
·种植条件 | 第30-31页 |
·取样与雄蕊发育时期观察 | 第31-32页 |
·用于基因芯片杂交的RNA样品制备 | 第31页 |
·Small RNA、降解组测序的RNA样品制备 | 第31页 |
·花药固定与石蜡切片 | 第31-32页 |
·微管、微丝免疫荧光标记 | 第32-33页 |
·所需试剂溶液配制 | 第32-33页 |
·微管、微丝荧光标记步骤 | 第33页 |
·IAA免疫荧光标记 | 第33-34页 |
·miRNA原位杂交 | 第34页 |
·透射电镜样品制备 | 第34页 |
·基因芯片杂交及数据分析 | 第34-35页 |
·Small RNA和降解组测序 | 第35页 |
·生物信息学分析 | 第35-36页 |
·小麦UniGene数据集 | 第35页 |
·已知miRNA的注释 | 第35页 |
·新miRNA以及stem-loop结构预测 | 第35页 |
·TAS基因以及ta-siRNA预测 | 第35页 |
·miRNA以及ta-siRNA靶基因预测 | 第35-36页 |
·降解组数据分析 | 第36页 |
·qPCR(quantitative real-time PCR)验证 | 第36页 |
·靶基因剪切位点验证 | 第36-38页 |
3 结果 | 第38-84页 |
·温敏雄性不育系BS366雄蕊败育细胞学研究 | 第38-41页 |
·低温胁迫下BS366雄蕊组织基因表达谱 | 第41-55页 |
·筛选温敏雄性不育系BS366普通低温胁迫响应基因 | 第46-49页 |
·温敏雄性不育系BS366雄蕊组织基因表达谱时间序列分析 | 第49-51页 |
·细胞骨架相关基因受低温胁迫影响 | 第51-55页 |
·Small RNA和降解组Solexa测序 | 第55-70页 |
·温敏雄性不育小麦BS366 miRNA鉴定 | 第57-65页 |
·miRBase中已知miRNA鉴定 | 第57-58页 |
·新miRNAs预测 | 第58-65页 |
·温敏雄性不育系BS366 TAS基因识别 | 第65-66页 |
·降解组数据分析 | 第66-70页 |
·miRNA靶基因降解组结果 | 第66-68页 |
·ta-siRNA靶基因降解组结果 | 第68页 |
·新miRNA的靶基因降解组结果 | 第68-70页 |
·miRNAs、tasiRNA-ARF表达量qPCR验证 | 第70-71页 |
·参与生长素信号传导途径调控的miRNA、tasiRNA-ARF表达量分析 | 第70-71页 |
·miR166家族的miRNAs表达量验证 | 第71页 |
·其它miRNAs表达量验证 | 第71页 |
·靶基因表达量验证以及降解位点证实 | 第71-79页 |
·miR166家族成员靶基因的表达量分析 | 第73页 |
·ath-miR156a、osa-miR169e和osa-miR319a靶基因的表达量分析 | 第73页 |
·靶基因ARF的表达量分析 | 第73-78页 |
·靶基因ARF降解位点5’RLM-RACE证实 | 第78-79页 |
·miRNA原位杂交分析 | 第79-81页 |
·内源IAA定量检测 | 第81-84页 |
4 讨论 | 第84-92页 |
·温敏雄性不育系BS366绒毡层发育不受低温胁迫影响 | 第84-85页 |
·低温胁迫导致二分体形成时细胞质分裂异常 | 第85-87页 |
·低温胁迫下温敏雄性不育系BS366穗部组织miRNA表达 | 第87-88页 |
·miRNA、tasiRNA-ARF对转录因子ARF调控作用 | 第88-90页 |
·生长素信号传导途径与细胞骨架 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-109页 |
致谢 | 第109-110页 |
附录 | 第110-115页 |
附录1 | 第110-113页 |
附录2 | 第113-115页 |
附录3 | 第115页 |