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蓝鳃太阳鱼性控和性决定机制以及性别相关分子标记的研究

摘要第1-13页
Abstract第13-19页
缩略语表第19-20页
第一章 文献综述第20-45页
 1 性别决定第20-23页
   ·遗传性别决定(GSD)第20-22页
   ·环境性别决定(ESD)第22-23页
 2 鱼类性别决定和性别分化第23-38页
   ·性别分化第24-27页
     ·雌雄异体型第24-25页
     ·雌雄同体型第25-26页
     ·兼性第26-27页
   ·性别决定第27-28页
   ·鱼类遗传性别决定分析(GSD)第28-32页
     ·染色体分析第28-29页
     ·种间杂交第29-30页
     ·性逆转第30-31页
     ·染色体组操作第31-32页
   ·鱼类环境性别决定(TSD)第32-38页
     ·温度影响第32-36页
     ·外源激素第36-37页
     ·pH影响第37页
     ·密度影响第37页
     ·环境污染第37-38页
 3 鱼类性别相关基因及性别特异标记的研究进展第38-42页
   ·性别特异基因第38-40页
   ·性别相关分子标记第40-42页
 4 蓝鳃太阳鱼性别调控研究概况第42-44页
 5 本研究的内容及意义第44-45页
第二章 蓝鳃太阳鱼性别分化及其与个体大小和年龄的关系第45-62页
 1 前言第45页
 2 实验材料与方法第45-48页
   ·鱼苗生产第45-46页
   ·鱼苗饲养第46页
   ·取样第46-47页
   ·组织学分析第47-48页
     ·试剂第47页
     ·仪器第47页
     ·组织材料处理第47页
     ·组织材料的HE染色第47-48页
 3 结果第48-53页
   ·实验鱼的生长第48-49页
   ·性腺的分化和发育第49-52页
   ·性腺分化与鱼体大小和年龄的关系第52-53页
 4 讨论第53-62页
第三章 17β-雌二醇诱导蓝鳃太阳鱼雌性化研究第62-77页
 1 前言第62-63页
 2 实验材料与方法第63-65页
   ·鱼苗的产生第63页
   ·雌性化处理第63-64页
   ·雌性化后实验第64-65页
   ·组织学分析第65页
   ·数据分析第65页
 3 结果第65-73页
   ·存活率第65-66页
   ·生长和生长率第66-68页
   ·性比和性腺指数第68-70页
   ·组织结构第70-73页
 4 讨论第73-77页
第四章 芳香化酶抑制剂诱导蓝鳃太阳鱼雄性化研究第77-88页
 1 前言第77-78页
 2 材料和方法第78-79页
   ·幼苗的生产第78页
   ·AI处理第78-79页
   ·性腺发育的检测第79页
   ·数据处理第79页
 3 结果第79-86页
   ·实验1第79-82页
   ·实验2第82-86页
 4 讨论第86-88页
第五章 温度以及温度-基因型相互作用对蓝鳃太阳鱼性别分化的影响第88-108页
 1 前言第88-91页
 2 材料和方法第91-97页
   ·鱼苗来源第91页
   ·温度处理第91-92页
   ·组织学切片和性别鉴定第92-93页
   ·子代的亲本来源鉴定第93-96页
     ·DNA提取第93-94页
     ·微卫星引物的筛选及优化第94-95页
     ·PCR反应第95-96页
     ·基因型分析第96页
   ·数据分析第96-97页
 3 结果分析第97-103页
   ·DNA质量和浓度检测第97页
   ·亲本和子代基因型分析第97-98页
   ·性别比例第98-103页
   ·性腺结构和发育第103页
 4 讨论第103-108页
   ·温度对性腺分化和发育的影响第103-106页
   ·家系鉴定第106-108页
第六章 全雄蓝鳃太阳鱼的获得及其性别决定机制的初步探讨第108-115页
 1 前言第108-109页
 2 材料和方法第109-110页
   ·性逆转鱼的繁殖第109-110页
   ·子代性别的鉴定第110页
   ·数据分析第110页
 3 结果第110-113页
 4 讨论第113-115页
第七章 蓝鳃太阳鱼雌激素受体和芳香化酶基因在雌雄不同组织中的差异表达第115-132页
 1 前言第115-116页
 2 实验材料与方法第116-126页
   ·实验材料第116页
   ·实验药品与仪器第116页
   ·主要实验药品的配置第116-117页
   ·引物设计与合成第117-118页
     ·雌激素受体ERa1、ERa2和ERβ基因的RT-PCR扩增引物第117-118页
     ·β-actin和Cyp19a1a基因的引物第118页
   ·总RNA的提取和纯化第118-119页
   ·RNA的纯化第119页
   ·cDNA的合成第119-120页
   ·β-actin和芳香化酶Cyp19a1a基因部分片段的获得第120页
   ·PCR产物的克隆及鉴定第120-122页
     ·PCR产物的克隆第120-121页
     ·质粒DNA的提取第121-122页
     ·PCR鉴定第122页
     ·阳性克隆的序列分析第122页
   ·Cyp19a1a基因3'-RACE扩增第122-125页
   ·半定量RT-PCR扩增第125-126页
 3 结果第126-130页
   ·RNA提取质量第126-127页
   ·β-actin和Cyp19a1a基因片段的扩增第127-128页
   ·Cyp19a1a基因3’端序列的克隆第128-129页
   ·各基因在雌雄不同组织中的表达第129-130页
 4 讨论第130-132页
第八章 蓝鳃太阳鱼性别特异AFLP标记的筛选第132-148页
 1 前言第132-134页
 2 材料与方法第134-139页
   ·实验材料第134页
   ·实验鱼基因组DNA提取第134页
   ·雌雄基因池的建立第134-135页
   ·AFLP实验程序第135-139页
     ·酶切第136页
     ·连接反应第136-137页
     ·预扩增第137页
     ·选择性扩增第137-138页
     ·变性的聚丙烯酞胺凝胶电泳及银染第138-139页
     ·目的条带的筛选第139页
     ·数据分析第139页
 3 结果第139-145页
   ·酶切和预扩增结果第139-140页
   ·雌雄特异AFLP标记的筛选第140-143页
   ·群体间遗传差异第143-145页
 4 讨论第145-148页
本论文主要研究结果及展望第148-150页
参考文献第150-173页
致谢第173-175页
附录第175-180页
 攻读博士学位期间论文发表情况第175-178页
 参加的国际国内学术会议第178-180页

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