摘要 | 第1-13页 |
Abstract | 第13-19页 |
缩略语表 | 第19-20页 |
第一章 文献综述 | 第20-45页 |
1 性别决定 | 第20-23页 |
·遗传性别决定(GSD) | 第20-22页 |
·环境性别决定(ESD) | 第22-23页 |
2 鱼类性别决定和性别分化 | 第23-38页 |
·性别分化 | 第24-27页 |
·雌雄异体型 | 第24-25页 |
·雌雄同体型 | 第25-26页 |
·兼性 | 第26-27页 |
·性别决定 | 第27-28页 |
·鱼类遗传性别决定分析(GSD) | 第28-32页 |
·染色体分析 | 第28-29页 |
·种间杂交 | 第29-30页 |
·性逆转 | 第30-31页 |
·染色体组操作 | 第31-32页 |
·鱼类环境性别决定(TSD) | 第32-38页 |
·温度影响 | 第32-36页 |
·外源激素 | 第36-37页 |
·pH影响 | 第37页 |
·密度影响 | 第37页 |
·环境污染 | 第37-38页 |
3 鱼类性别相关基因及性别特异标记的研究进展 | 第38-42页 |
·性别特异基因 | 第38-40页 |
·性别相关分子标记 | 第40-42页 |
4 蓝鳃太阳鱼性别调控研究概况 | 第42-44页 |
5 本研究的内容及意义 | 第44-45页 |
第二章 蓝鳃太阳鱼性别分化及其与个体大小和年龄的关系 | 第45-62页 |
1 前言 | 第45页 |
2 实验材料与方法 | 第45-48页 |
·鱼苗生产 | 第45-46页 |
·鱼苗饲养 | 第46页 |
·取样 | 第46-47页 |
·组织学分析 | 第47-48页 |
·试剂 | 第47页 |
·仪器 | 第47页 |
·组织材料处理 | 第47页 |
·组织材料的HE染色 | 第47-48页 |
3 结果 | 第48-53页 |
·实验鱼的生长 | 第48-49页 |
·性腺的分化和发育 | 第49-52页 |
·性腺分化与鱼体大小和年龄的关系 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-62页 |
第三章 17β-雌二醇诱导蓝鳃太阳鱼雌性化研究 | 第62-77页 |
1 前言 | 第62-63页 |
2 实验材料与方法 | 第63-65页 |
·鱼苗的产生 | 第63页 |
·雌性化处理 | 第63-64页 |
·雌性化后实验 | 第64-65页 |
·组织学分析 | 第65页 |
·数据分析 | 第65页 |
3 结果 | 第65-73页 |
·存活率 | 第65-66页 |
·生长和生长率 | 第66-68页 |
·性比和性腺指数 | 第68-70页 |
·组织结构 | 第70-73页 |
4 讨论 | 第73-77页 |
第四章 芳香化酶抑制剂诱导蓝鳃太阳鱼雄性化研究 | 第77-88页 |
1 前言 | 第77-78页 |
2 材料和方法 | 第78-79页 |
·幼苗的生产 | 第78页 |
·AI处理 | 第78-79页 |
·性腺发育的检测 | 第79页 |
·数据处理 | 第79页 |
3 结果 | 第79-86页 |
·实验1 | 第79-82页 |
·实验2 | 第82-86页 |
4 讨论 | 第86-88页 |
第五章 温度以及温度-基因型相互作用对蓝鳃太阳鱼性别分化的影响 | 第88-108页 |
1 前言 | 第88-91页 |
2 材料和方法 | 第91-97页 |
·鱼苗来源 | 第91页 |
·温度处理 | 第91-92页 |
·组织学切片和性别鉴定 | 第92-93页 |
·子代的亲本来源鉴定 | 第93-96页 |
·DNA提取 | 第93-94页 |
·微卫星引物的筛选及优化 | 第94-95页 |
·PCR反应 | 第95-96页 |
·基因型分析 | 第96页 |
·数据分析 | 第96-97页 |
3 结果分析 | 第97-103页 |
·DNA质量和浓度检测 | 第97页 |
·亲本和子代基因型分析 | 第97-98页 |
·性别比例 | 第98-103页 |
·性腺结构和发育 | 第103页 |
4 讨论 | 第103-108页 |
·温度对性腺分化和发育的影响 | 第103-106页 |
·家系鉴定 | 第106-108页 |
第六章 全雄蓝鳃太阳鱼的获得及其性别决定机制的初步探讨 | 第108-115页 |
1 前言 | 第108-109页 |
2 材料和方法 | 第109-110页 |
·性逆转鱼的繁殖 | 第109-110页 |
·子代性别的鉴定 | 第110页 |
·数据分析 | 第110页 |
3 结果 | 第110-113页 |
4 讨论 | 第113-115页 |
第七章 蓝鳃太阳鱼雌激素受体和芳香化酶基因在雌雄不同组织中的差异表达 | 第115-132页 |
1 前言 | 第115-116页 |
2 实验材料与方法 | 第116-126页 |
·实验材料 | 第116页 |
·实验药品与仪器 | 第116页 |
·主要实验药品的配置 | 第116-117页 |
·引物设计与合成 | 第117-118页 |
·雌激素受体ERa1、ERa2和ERβ基因的RT-PCR扩增引物 | 第117-118页 |
·β-actin和Cyp19a1a基因的引物 | 第118页 |
·总RNA的提取和纯化 | 第118-119页 |
·RNA的纯化 | 第119页 |
·cDNA的合成 | 第119-120页 |
·β-actin和芳香化酶Cyp19a1a基因部分片段的获得 | 第120页 |
·PCR产物的克隆及鉴定 | 第120-122页 |
·PCR产物的克隆 | 第120-121页 |
·质粒DNA的提取 | 第121-122页 |
·PCR鉴定 | 第122页 |
·阳性克隆的序列分析 | 第122页 |
·Cyp19a1a基因3'-RACE扩增 | 第122-125页 |
·半定量RT-PCR扩增 | 第125-126页 |
3 结果 | 第126-130页 |
·RNA提取质量 | 第126-127页 |
·β-actin和Cyp19a1a基因片段的扩增 | 第127-128页 |
·Cyp19a1a基因3’端序列的克隆 | 第128-129页 |
·各基因在雌雄不同组织中的表达 | 第129-130页 |
4 讨论 | 第130-132页 |
第八章 蓝鳃太阳鱼性别特异AFLP标记的筛选 | 第132-148页 |
1 前言 | 第132-134页 |
2 材料与方法 | 第134-139页 |
·实验材料 | 第134页 |
·实验鱼基因组DNA提取 | 第134页 |
·雌雄基因池的建立 | 第134-135页 |
·AFLP实验程序 | 第135-139页 |
·酶切 | 第136页 |
·连接反应 | 第136-137页 |
·预扩增 | 第137页 |
·选择性扩增 | 第137-138页 |
·变性的聚丙烯酞胺凝胶电泳及银染 | 第138-139页 |
·目的条带的筛选 | 第139页 |
·数据分析 | 第139页 |
3 结果 | 第139-145页 |
·酶切和预扩增结果 | 第139-140页 |
·雌雄特异AFLP标记的筛选 | 第140-143页 |
·群体间遗传差异 | 第143-145页 |
4 讨论 | 第145-148页 |
本论文主要研究结果及展望 | 第148-150页 |
参考文献 | 第150-173页 |
致谢 | 第173-175页 |
附录 | 第175-180页 |
攻读博士学位期间论文发表情况 | 第175-178页 |
参加的国际国内学术会议 | 第178-180页 |