动物可食组织中安眠酮残留的ELISA检测方法研究
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略语 | 第10-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1. 安眠酮简介 | 第11-18页 |
| ·安眠酮药物概况 | 第11-12页 |
| ·安眠酮残留现状 | 第12-13页 |
| ·安眠酮检测方法现状 | 第13-16页 |
| ·薄层分析法(TLC) | 第13页 |
| ·放射免疫法(RIA) | 第13-14页 |
| ·色谱法 | 第14-15页 |
| ·高效毛细管电泳分析法(HPCE) | 第15-16页 |
| ·其他 | 第16页 |
| ·各种检测方法的比较 | 第16-17页 |
| ·免疫分析在残留检测中的应用 | 第17-18页 |
| 2 药物半抗原酶联免疫分析方法 | 第18-20页 |
| ·半抗原与完全抗原 | 第18页 |
| ·完全抗原的合成 | 第18-20页 |
| ·偶联方式的选择 | 第19页 |
| ·完全抗原鉴定 | 第19-20页 |
| 3 实验的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第2章 安眠酮完全抗原的研制 | 第21-36页 |
| 1 材料与方法 | 第21-28页 |
| ·材料 | 第21-24页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·主要溶液配方 | 第22-24页 |
| ·方法 | 第24-28页 |
| ·羧基延伸物的合成 | 第24-25页 |
| ·活性酷法合成安眠酮完全抗原 | 第25-26页 |
| ·半抗原偶联物的鉴定 | 第26-28页 |
| 2. 结果与分析 | 第28-35页 |
| ·羧基延伸物的鉴定 | 第28-30页 |
| ·酮基处羧基延伸物的结果及分析 | 第28-29页 |
| ·化学方法合成的羧基衍生物结果及分析 | 第29-30页 |
| ·合成的安眠酮包被原的检测 | 第30-34页 |
| ·合成的安眠酮完抗原的紫外光谱分析 | 第30-31页 |
| ·SDS-PAGE凝胶检测结果及分析 | 第31-32页 |
| ·红外IR鉴定 | 第32-33页 |
| ·间接ELISA检测 | 第33-34页 |
| ·合成安眠酮免疫原的检测 | 第34-35页 |
| ·紫外光谱分析 | 第34页 |
| ·SDS-PAGE凝胶检测结果及分析 | 第34-35页 |
| 3. 小结 | 第35-36页 |
| 第3章 安眠酮多克隆抗体的制备 | 第36-43页 |
| 1 材料与方法 | 第36-39页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·实验动物 | 第36页 |
| ·缓冲液体系 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·动物免疫 | 第37页 |
| ·抗体纯化 | 第37-38页 |
| ·抗原抗体最佳工作浓度的确定 | 第38-39页 |
| ·抗体特异性试验 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-42页 |
| ·抗原和抗体的最佳工作浓度 | 第39-40页 |
| ·效价测定 | 第40-41页 |
| ·抗体特异性结果 | 第41-42页 |
| 3 小结 | 第42-43页 |
| 第4章 间接竞争ELISA方法的建立与优化 | 第43-57页 |
| 1 材料与方法 | 第43-48页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·缓冲液体系 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-48页 |
| ·ELISA基本操作步骤 | 第44-45页 |
| ·酶标板均一性的检测 | 第45页 |
| ·ELISA标准方法的建立 | 第45-47页 |
| ·标准曲线的建立 | 第47页 |
| ·交叉反应率的测定 | 第47页 |
| ·样品加标 | 第47-48页 |
| 2. 结果与分析 | 第48-55页 |
| ·酶标板均一性的检测 | 第48-49页 |
| ·标准ELISA方法的建立 | 第49-52页 |
| ·间接ELISA条件的优化 | 第49-51页 |
| ·间接竞争ELISA标准方法的建立 | 第51-52页 |
| ·标准曲线的建立 | 第52-53页 |
| ·交叉反应结果 | 第53页 |
| ·样品添标结果 | 第53-55页 |
| ·回收率结果 | 第53-54页 |
| ·变异系数 | 第54-55页 |
| 3 小结 | 第55-57页 |
| 第5章 讨论 | 第57-62页 |
| 1. 安眠酮完全抗原的合成 | 第57-59页 |
| ·羧基衍生物的合成 | 第57-58页 |
| ·安眠酮抗原偶联方法的选择 | 第58页 |
| ·载体蛋白的选择 | 第58-59页 |
| ·关于MTQ人工抗原的鉴定方法 | 第59页 |
| ·免疫抗原对抗血清的影响 | 第59页 |
| 2. 间接竞争ELISA方法的建立与优化 | 第59-62页 |
| ·方法的检测限和精密度 | 第59-60页 |
| ·ELISA方法的交叉反应性 | 第60页 |
| ·安眠酮在动物可食组织中的提取 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
