| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1. 材料、试剂和仪器 | 第11-14页 |
| ·细胞培养 | 第11页 |
| ·主要试剂 | 第11-12页 |
| ·主要试剂配制 | 第12-13页 |
| ·仪器 | 第13-14页 |
| 2. 实验方法与步骤 | 第14-20页 |
| ·MTT法测定酒精对PC12细胞增殖的抑制作用 | 第14-15页 |
| ·Hoechst 33258染色观察PC12细胞凋亡形态学变化 | 第15页 |
| ·DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第15-16页 |
| ·逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测SMS和N-SMase的mRNA表达 | 第16-18页 |
| ·细胞总RNA提取 | 第16页 |
| ·细胞总RNA定量及电泳鉴定 | 第16-17页 |
| ·逆转录合成cDNA第一链 | 第17页 |
| ·RT-PCR法检测SMS1、SMS2和N-SMase的mRNA表达水平 | 第17-18页 |
| ·薄层层析法测定SMS的活性 | 第18页 |
| ·N-SMase活性测定 | 第18-20页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第18-19页 |
| ·细胞总蛋白定量 | 第19-20页 |
| ·N-SMase活性测定 | 第20页 |
| ·统计学分析 | 第20页 |
| 3. 实验结果 | 第20-32页 |
| ·MTT法测定酒精对PC12细胞的抑制作用 | 第20-21页 |
| ·Hoechst 33258染色观察PC12细胞凋亡形态学变化 | 第21-23页 |
| ·DNA电泳检测PC12细胞凋亡的梯状条带 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR检测PC12细胞SMS1、SMS2和N-SMase的mRNA表达 | 第24-31页 |
| ·酒精对PC12细胞SMS1 mRNA表达的影响 | 第24-26页 |
| ·酒精对PC12细胞SMS2 mRNA表达的影响 | 第26-28页 |
| ·酒精对PC12细胞N-SMase mRNA表达的影响 | 第28-31页 |
| ·酒精对PC12细胞SMS活性的影响 | 第31页 |
| ·酒精对PC12细胞N-SMase活性的影响 | 第31-32页 |
| 结论 | 第32-33页 |
| 讨论 | 第33-37页 |
| 参考文献 | 第37-42页 |
| 文献综述 | 第42-52页 |
| 附录 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
