| 目录 | 第1-11页 |
| 致谢 | 第11-12页 |
| 术语和缩略语表 | 第12-14页 |
| 摘要 | 第14-16页 |
| ABSTRACT | 第16-18页 |
| 第一章 前言 | 第18-43页 |
| 1.抗体在农药免疫分析中的应用 | 第19-32页 |
| ·多克隆抗体在农药免疫分析中的应用 | 第19-21页 |
| ·单克隆抗体在农药免疫分析中的应用 | 第21-29页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选方法 | 第21-24页 |
| ·农药ELISA法中单克隆抗体的应用现状 | 第24-29页 |
| ·基因工程抗体在农药免疫分析中的应用 | 第29-32页 |
| ·抗体分子的结构与功能 | 第29-30页 |
| ·基因工程抗体在农药免疫分析中的应用 | 第30-32页 |
| 2 异源分析在农药免疫化学中的应用 | 第32-37页 |
| ·异源免疫分析的概念 | 第32-33页 |
| ·异源分析能提高免疫分析方法的检测灵敏度 | 第33-35页 |
| ·异源分析对方法选择性的影响 | 第35-37页 |
| 3 计算机辅助分子模拟在农药免疫分析中的应用 | 第37-40页 |
| ·计算机模拟在半抗原设计中的应用 | 第37-38页 |
| ·小分子与蛋白质之间的相互作用 | 第38-40页 |
| 4 立题依据 | 第40-43页 |
| 第二章 同源ELISA方法筛选对硫磷高特异性单克隆抗体 | 第43-70页 |
| 1 试剂与材料 | 第43-48页 |
| ·试剂与药品 | 第43-45页 |
| ·缓冲液 | 第45-46页 |
| ·仪器与材料 | 第46-47页 |
| ·实验动物 | 第47-48页 |
| 2 实验方法 | 第48-56页 |
| ·对硫磷半抗原与人工抗原制备 | 第48-49页 |
| ·抗对硫磷特异性单克隆抗体的制备 | 第49-53页 |
| ·动物免疫 | 第49-50页 |
| ·细胞融合 | 第50-51页 |
| ·单克隆抗体的大量制备与纯化 | 第51-53页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第53页 |
| ·方法工作浓度的选择 | 第53页 |
| ·方法灵敏度的测定 | 第53页 |
| ·农药与半抗原之间的异质性 | 第53-55页 |
| ·抗体的特异性 | 第55页 |
| ·直接ELISA方法的建立 | 第55-56页 |
| ·直接ELISA方法的建立与优化 | 第55页 |
| ·方法准确性试验 | 第55-56页 |
| ·样品基质影响试验 | 第56页 |
| ·样品添加回收率试验 | 第56页 |
| 3.实验结果与分析 | 第56-68页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第56-57页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第57-62页 |
| ·异源竞争原的设计 | 第57-59页 |
| ·异源分析对ELISA方法灵敏度的影响 | 第59-60页 |
| ·电性参数计算结果 | 第60-61页 |
| ·交叉反应率试验 | 第61-62页 |
| ·直接ELISA方法的建立 | 第62-68页 |
| ·直接异源ELISA方法的优化 | 第62-65页 |
| ·样品基质的影响 | 第65页 |
| ·方法精密度和准确度测定 | 第65-67页 |
| ·样品添加回收率测定 | 第67-68页 |
| 4 小结与讨论 | 第68-70页 |
| 第三章 异源ELISA方法筛选高特异性和宽谱单克隆抗体 | 第70-102页 |
| 1 材料与仪器 | 第70页 |
| 2 实验方法 | 第70-74页 |
| ·异源间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞的筛选体系建立 | 第70-72页 |
| ·动物免疫与细胞融合 | 第70页 |
| ·第一次克隆化之前测定抗原识别谱 | 第70页 |
| ·杂交瘤细胞的单克隆化 | 第70-72页 |
| ·系列单克隆抗体的鉴定 | 第72-73页 |
| ·异源ELISA方法的建立 | 第72-73页 |
| ·抗体的特异性 | 第73页 |
| ·宽谱单克隆抗体的筛选验证 | 第73-74页 |
| ·血清效价测定 | 第73页 |
| ·多残留免疫分析方法的建立 | 第73页 |
| ·单一农药及混合农药的样品添加回收率 | 第73-74页 |
| 3 实验结果与分析 | 第74-99页 |
| ·异源ELISA方法筛选杂交瘤细胞 | 第74-77页 |
| ·第一次克隆化之前细胞上清的包被抗原识别谱 | 第74-76页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第76-77页 |
| ·筛选所获单克隆抗体的性质鉴定 | 第77-92页 |
| ·单克隆抗体的抗原识别谱 | 第77-89页 |
| ·五组抗体的间接ELISA方法建立 | 第89-90页 |
| ·上清抗体的交叉反应率 | 第90-91页 |
| ·第四组抗体的宽谱选择性 | 第91-92页 |
| ·宽谱单克隆抗体的筛选验证 | 第92-99页 |
| ·免疫效价测定 | 第93页 |
| ·宽谱特异性单克隆抗体的制备 | 第93-94页 |
| ·多残留免疫分析方法的建立 | 第94-97页 |
| ·交叉反应率试验 | 第97-98页 |
| ·添加回收率试验 | 第98-99页 |
| 4 小结与讨论 | 第99-102页 |
| 第四章 实现抗体高特异性和宽谱识别的分子互作研究 | 第102-123页 |
| 1 材料与方法 | 第102-108页 |
| ·实验材料 | 第102-104页 |
| ·试剂与药品 | 第102-103页 |
| ·缓冲液 | 第103-104页 |
| ·仪器与设备 | 第104页 |
| ·软件及模块 | 第104页 |
| ·实验方法 | 第104-108页 |
| ·引物设计与合成 | 第104-105页 |
| ·总RNA的提取 | 第105-106页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第106页 |
| ·抗体可变区基因扩增与纯化 | 第106页 |
| ·可变区基因克隆 | 第106-107页 |
| ·阳性菌落的筛选、质粒提取与鉴定 | 第107页 |
| ·抗体可变区三级结构的同源建模及分子对接 | 第107-108页 |
| 2 结果与分析 | 第108-121页 |
| ·5H7抗体的同源建模 | 第108-110页 |
| ·5H7轻、重链可变区重组质粒测序结果 | 第108页 |
| ·同源蛋白序列搜索和比对 | 第108-109页 |
| ·5H7三维结构模型 | 第109-110页 |
| ·5F7抗体的可变区三级结构同源建模 | 第110-113页 |
| ·同源蛋白序列搜索和比对 | 第110-112页 |
| ·5F7三维结构模型 | 第112-113页 |
| ·5D11抗体的可变区三级结构同源建模 | 第113-115页 |
| ·同源蛋白序列搜索和比对 | 第113-114页 |
| ·5D11三维结构模建 | 第114-115页 |
| ·三株抗体可变区序列比对 | 第115-117页 |
| ·抗体与农药分子相互作用 | 第117-121页 |
| ·5H7抗体与农药分子对接 | 第117-118页 |
| ·5F7抗体与农药分子对接 | 第118-120页 |
| ·5D11抗体与农药分子对接 | 第120-121页 |
| 3 小结与讨论 | 第121-123页 |
| 第五章 总结与讨论 | 第123-128页 |
| 1 主要结论 | 第123-124页 |
| 2 创新点 | 第124页 |
| 3 不足与展望 | 第124-128页 |
| ·本研究的不足 | 第124-125页 |
| ·研究展望 | 第125-128页 |
| 参考文献 | 第128-141页 |
| 在校期间发表论文 | 第141页 |
