摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩略表 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-16页 |
1.1 猪传染性胃肠炎病毒 | 第11-12页 |
1.1.1 猪传染性胃肠炎生物学概况 | 第11-12页 |
1.1.2 猪传染性胃肠炎的预防和治疗 | 第12页 |
1.2 干扰素抗病毒的研究进展 | 第12-15页 |
1.2.1 干扰素简介 | 第12-14页 |
1.2.2 干扰素抗病毒研究 | 第14-15页 |
1.3 研究目的和意义 | 第15-16页 |
第二章 猪IFN-γ的原核表达及抗病毒活性的鉴定 | 第16-25页 |
2.1 实验材料 | 第16页 |
2.1.1 细胞,毒株 | 第16页 |
2.1.2 实验试剂 | 第16页 |
2.1.3 实验设备和耗材 | 第16页 |
2.2 实验方法 | 第16-20页 |
2.2.1 原核表达质粒pET-21b-IFN-γ-Fc的构建 | 第16-17页 |
2.2.2 原核表达质粒pET-21b-IFN-γ-Fc的诱导表达 | 第17-19页 |
2.2.3 细胞毒性实验 | 第19-20页 |
2.3 实验结果 | 第20-24页 |
2.3.1 原核表达质粒pET-21b-IFN-γ-Fc的构建 | 第20-21页 |
2.3.2 重组表达质粒pET-21b-IFN-γ-Fc的诱导表达与鉴定 | 第21-23页 |
2.3.3 重组蛋白IFN-γ细胞毒性实验 | 第23页 |
2.3.4 重组表达质粒pET-21b-IFN-γ-Fc抗病毒蛋白活性检测 | 第23-24页 |
2.4 讨论 | 第24-25页 |
第三章 IFN-γ抗猪传染性胃肠炎病毒复制及相关机制研究 | 第25-42页 |
3.1 实验材料 | 第25页 |
3.1.1 细胞,毒株和动物 | 第25页 |
3.1.2 实验试剂 | 第25页 |
3.1.3 实验设备和耗材 | 第25页 |
3.2 实验方法 | 第25-29页 |
3.2.1 引物设计 | 第25-26页 |
3.2.2 细胞总RNA的提取及反转录 | 第26-27页 |
3.2.3 荧光定量PCR(qPCR) | 第27-28页 |
3.2.4 PBMC分离 | 第28页 |
3.2.5 间接免疫荧光 | 第28页 |
3.2.6 质粒转染 | 第28页 |
3.2.7 TCID50检测 | 第28-29页 |
3.2.8 数据统计 | 第29页 |
3.3 实验结果 | 第29-40页 |
3.3.1 IFN-γ抑制TGEV在ST细胞和IPEC- J2细胞中的复制 | 第29-31页 |
3.3.2 IRF1对TGEV复制的影响 | 第31-33页 |
3.3.3 IFN-γ诱导poIRF1的表达 | 第33-34页 |
3.3.4 TGEV感染在体内诱导IFN-γ和poIRF1的表达 | 第34-35页 |
3.3.5 猪IRF1(poIRF1)在IFN-γ介导信号通路中的影响 | 第35-36页 |
3.3.6 IFN-γ抑制TGEV通过激活IRF-1 信号通路 | 第36页 |
3.3.7 IFN-γ对TGEV感染的抑制不完全依赖I型IFN | 第36-37页 |
3.3.8 IFN-γ诱导I型干扰素的表达 | 第37-38页 |
3.3.9 IFN-γ与IFN-α协同抑制TGEV的复制 | 第38-40页 |
3.4 讨论 | 第40-42页 |
第四章 全文结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
作者简历 | 第50页 |