| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第一章 绪论 | 第15-34页 |
| 1.1 转化医学研究 | 第15页 |
| 1.2 NAD~+与NAD~+依赖性酶SIRT | 第15-21页 |
| 1.2.1 NAD~+的代谢 | 第16-18页 |
| 1.2.2 NAD~+与钙稳态 | 第18-19页 |
| 1.2.3 三类NAD~+依赖性酶 | 第19-20页 |
| 1.2.4 NAD~+及NAD~+依赖性酶的损伤保护作用 | 第20-21页 |
| 1.3 抗癌药物的毒副作用 | 第21-26页 |
| 1.3.1 癌症 | 第21-22页 |
| 1.3.2 癌症治疗 | 第22-23页 |
| 1.3.3 化疗 | 第23页 |
| 1.3.4 化疗药物 | 第23-24页 |
| 1.3.5 阿霉素 | 第24-26页 |
| 1.4 心肌缺血再灌注损伤的机制 | 第26-30页 |
| 1.5 神经炎症与SIRT | 第30-34页 |
| 1.5.1 神经炎症 | 第30-31页 |
| 1.5.2 Sirtuins | 第31-32页 |
| 1.5.3 SIRT2 与炎症 | 第32-34页 |
| 第二章 NAD~+给药对抗癌药物盐酸阿霉素诱导的急性肝脏损伤的作用及机制研究 | 第34-62页 |
| 2.1 引言 | 第34-35页 |
| 2.2 材料 | 第35页 |
| 2.2.1 仪器材料 | 第35页 |
| 2.2.2 试剂材料 | 第35页 |
| 2.2.3 溶液配制 | 第35页 |
| 2.2.4 动物实验方案伦理学审批 | 第35页 |
| 2.2.5 实验动物 | 第35页 |
| 2.2.6 动物饲养 | 第35页 |
| 2.3 实验方法 | 第35-44页 |
| 2.3.1 动物实验 | 第35-36页 |
| 2.3.2 实验动物的牺牲及动物组织样本的获取 | 第36页 |
| 2.3.3 血清中谷草转氨酶(SGOT)活性的测定 | 第36-37页 |
| 2.3.4 肝脏冰冻切片 | 第37页 |
| 2.3.5 肝脏石蜡切片 | 第37页 |
| 2.3.6 新鲜肝脏组织中还原型谷胱甘肽(GSH)含量的测定 | 第37-39页 |
| 2.3.7 新鲜肝脏组织中谷胱甘肽还原酶(GR)活力的测定 | 第39-40页 |
| 2.3.8 新鲜肝脏组织中NAD~+含量的测定 | 第40页 |
| 2.3.9 新鲜肝脏组织中Caspase-3 活性测定 | 第40-41页 |
| 2.3.10 TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)染色 | 第41-42页 |
| 2.3.11 Caspase-3 免疫荧光染色 | 第42-43页 |
| 2.3.12 γ-H2AX免疫染色 | 第43页 |
| 2.3.13 实时荧光定量PCR(Realtime PCR)检测 | 第43-44页 |
| 2.3.14 数据统计方法 | 第44页 |
| 2.4 结果 | 第44-58页 |
| 2.4.1 NAD~+给药显著增加了盐酸阿霉素给药后小鼠的体重 | 第44-45页 |
| 2.4.2 NAD~+给药显著增加了盐酸阿霉素给药后小鼠的肝脏重量 | 第45-46页 |
| 2.4.3 NAD~+给药显著降低了盐酸阿霉素给药后小鼠血清中的谷草转氨酶含量 | 第46-47页 |
| 2.4.4 NAD~+给药显著地减少了盐酸阿霉素诱导的肝细胞凋亡 | 第47-50页 |
| 2.4.5 NAD~+给药显著减少了盐酸阿霉素诱导的肝脏细胞双链DNA损伤 | 第50-51页 |
| 2.4.6 NAD~+给药显著增加了盐酸阿霉素给药后肝脏组织中的NAD~+水平 | 第51页 |
| 2.4.7 NAD~+给药显著提高了盐酸阿霉素给药后肝脏组织中的抗氧化能力 | 第51-54页 |
| 2.4.8 NAC给药可以通过增强肝脏组织抗氧化能力来保护盐酸阿霉素诱导的急性肝脏损伤 | 第54-56页 |
| 2.4.9 NAM给药不能减少盐酸阿霉素诱导的急性肝脏损伤 | 第56-58页 |
| 2.5 小结与讨论 | 第58-62页 |
| 第三章 NAD~+给药对大鼠心脏缺血/再灌注损伤的作用及机制研究 | 第62-82页 |
| 3.1 引言 | 第62页 |
| 3.2 材料 | 第62-63页 |
| 3.2.1 仪器材料 | 第62页 |
| 3.2.2 试剂材料 | 第62-63页 |
| 3.2.3 溶液配制 | 第63页 |
| 3.2.4 动物实验方案伦理学审批 | 第63页 |
| 3.2.5 实验动物 | 第63页 |
| 3.2.6 动物饲养 | 第63页 |
| 3.3 实验方法 | 第63-70页 |
| 3.3.1 动物分组及手术 | 第63-64页 |
| 3.3.2 实验动物的牺牲及动物组织样本的获取 | 第64页 |
| 3.3.3 心肌梗死体积的测定 | 第64-65页 |
| 3.3.4 血清中肌酸激酶、乳酸脱氢酶检测、心肌肌钙蛋白I的检测 | 第65页 |
| 3.3.5 心脏组织冰冻切片 | 第65-66页 |
| 3.3.6 新鲜心脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力的测定 | 第66页 |
| 3.3.7 新鲜心脏组织中NAD~+含量的测定 | 第66页 |
| 3.3.8 TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)染色 | 第66-67页 |
| 3.3.9 Caspase-3 免疫荧光染色 | 第67-68页 |
| 3.3.10 Bax免疫组织化学染色 | 第68页 |
| 3.3.11 蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第68-70页 |
| 3.3.12 数据统计方法 | 第70页 |
| 3.4 结果 | 第70-80页 |
| 3.4.1 NAD~+给药显著地减少了心脏梗死体积 | 第70-72页 |
| 3.4.2 NAD~+给药显著地降低了血清中的c TnI水平 | 第72-73页 |
| 3.4.3 NAD~+给药并未明显影响血清中肌酸激酶和乳酸脱氢酶的含量 | 第73-74页 |
| 3.4.4 NAD~+给药显著减少了心肌细胞的凋亡 | 第74-78页 |
| 3.4.5 NAD~+给药显著增强了心肌细胞的抗氧化能力 | 第78-80页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第80-82页 |
| 第四章 NAD~+依赖性去乙酰化酶SIRT2 对小鼠神经炎症的作用及机制研究 | 第82-103页 |
| 4.1 引言 | 第82页 |
| 4.2 材料 | 第82-83页 |
| 4.2.1 仪器材料 | 第82页 |
| 4.2.2 试剂材料 | 第82-83页 |
| 4.2.3 溶液配制 | 第83页 |
| 4.2.4 动物实验方案伦理学审批 | 第83页 |
| 4.2.5 实验动物 | 第83页 |
| 4.2.6 动物饲养 | 第83页 |
| 4.3 实验方法 | 第83-86页 |
| 4.3.1 动物手术方法 | 第83-84页 |
| 4.3.2 实验动物的牺牲及动物组织样本的获取 | 第84页 |
| 4.3.3 大脑冰冻切片 | 第84页 |
| 4.3.4 Caspase-3 免疫荧光染色 | 第84页 |
| 4.3.5 TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)染色 | 第84-85页 |
| 4.3.6 免疫组织化学染色 | 第85页 |
| 4.3.7 炎症因子实时荧光定量PCR(Realtime PCR)检测 | 第85页 |
| 4.3.8 新鲜大脑组织细胞核蛋白与细胞浆抽提 | 第85-86页 |
| 4.3.9 蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第86页 |
| 4.3.10 数据统计方法 | 第86页 |
| 4.4 结果 | 第86-100页 |
| 4.4.1 SIRT2 的特异性抑制剂AGK2 显著地抑制了LPS诱导的小鼠大脑小胶质细胞激活 | 第86-91页 |
| 4.4.2 SIRT2 的特异性抑制剂AGK2 显著地降低了LPS诱导的小鼠大脑炎症因子的表达 | 第91-92页 |
| 4.4.3 SIRT2 的特异性抑制剂AGK2 显著地抑制了LPS诱导的小鼠大脑中的NF-κB炎症通路 | 第92-94页 |
| 4.4.4 SIRT2 的特异性抑制剂AGK2 显著减少了LPS诱导的小鼠大脑细胞凋亡 | 第94-100页 |
| 4.5 小结与讨论 | 第100-103页 |
| 第五章 全文总结 | 第103-109页 |
| 5.1 研究内容与主要结论 | 第103-106页 |
| 5.1.1 NAD~+给药对抗癌药物盐酸阿霉素诱导的肝脏毒性的作用及机制研究 | 第103-104页 |
| 5.1.2 NAD~+给药对大鼠心脏缺血/再灌注损伤的作用及机制研究 | 第104-105页 |
| 5.1.3 NAD~+依赖性去乙酰化酶SIRT2 对小鼠神经炎症的作用及机制研究 | 第105-106页 |
| 5.2 研究展望 | 第106-109页 |
| 参考文献 | 第109-128页 |
| 附录一 实验仪器及生产公司 | 第128-130页 |
| 附录二 主要实验试剂及生产公司 | 第130-132页 |
| 附录三 相关溶液配制 | 第132-133页 |
| 附录四 中英文缩写字母表 | 第133-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及发明专利申请情况 | 第137-140页 |
