| 缩略词 | 第4-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1.1 禽腺病毒的分类 | 第12-13页 |
| 1.2 禽腺病毒病原学 | 第13-14页 |
| 1.3 禽腺病毒的复制 | 第14页 |
| 1.4 禽腺病毒的基因组及蛋白结构 | 第14-17页 |
| 1.4.1 六邻体蛋白 | 第15页 |
| 1.4.2 纤突蛋白 | 第15-16页 |
| 1.4.3 五邻体蛋白 | 第16页 |
| 1.4.4 非结构蛋白 | 第16-17页 |
| 1.5 禽腺病毒病的研究现状 | 第17-19页 |
| 1.5.1 心包积水-包涵体肝炎综合征 | 第17-18页 |
| 1.5.2 包涵体肝炎 | 第18-19页 |
| 1.6 禽腺病毒的诊断方法 | 第19-21页 |
| 1.6.1 酶联免疫吸附试验 | 第19页 |
| 1.6.2 琼脂凝胶扩散试验 | 第19页 |
| 1.6.3 中和试验 | 第19-20页 |
| 1.6.4 常规PCR检测技术 | 第20页 |
| 1.6.5 LAMP检测技术 | 第20页 |
| 1.6.6 荧光定量PCR检测技术 | 第20-21页 |
| 1.6.7 CAPS技术 | 第21页 |
| 1.6.8 核酸探针检测技术 | 第21页 |
| 1.7 禽腺病毒疫苗的研究进展 | 第21-24页 |
| 1.7.1 灭活疫苗 | 第21-23页 |
| 1.7.2 弱毒活疫苗 | 第23页 |
| 1.7.3 基因工程亚单位疫苗 | 第23-24页 |
| 1.8 本课题研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 禽腺病毒血清4型Hexon-Penton串联蛋白的原核表达 | 第25-37页 |
| 2.1 材料与方法 | 第25-26页 |
| 2.1.1 河北株血清4 型禽腺病毒 | 第25页 |
| 2.1.2 质粒、菌株、细胞及试验动物 | 第25页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-31页 |
| 2.2.1 病毒基因组DNA的提取 | 第26页 |
| 2.2.2 Hexon与 Penton基因的扩增与串联 | 第26-28页 |
| 2.2.3 重组表达质粒pET32a-HP的构建 | 第28-29页 |
| 2.2.4 HP蛋白的原核表达和Western blot验证 | 第29-30页 |
| 2.2.5 HP原核蛋白的可溶性分析及纯化 | 第30页 |
| 2.2.6 多抗血清的制备及抗体效价 | 第30-31页 |
| 2.3 结果 | 第31-35页 |
| 2.3.1 Hexon、Penton基因的扩增与串联HP基因的PCR扩增 | 第31-32页 |
| 2.3.2 重组表达质粒pET32a-HP的构建 | 第32页 |
| 2.3.3 HP蛋白的原核表达及Western blot验证 | 第32-33页 |
| 2.3.4 HP原核蛋白表达形式鉴定和蛋白纯化 | 第33-34页 |
| 2.3.5 鼠源HP多抗Western blot验证和抗体效价 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-36页 |
| 2.5 小结 | 第36-37页 |
| 第三章 禽腺病毒血清4型Hexon-Penton串联蛋白的真核表达 | 第37-45页 |
| 3.1 材料与方法 | 第37-38页 |
| 3.1.1 河北株血清4 型禽腺病毒 | 第37页 |
| 3.1.2 质粒、菌株及细胞 | 第37页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第37-38页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第38页 |
| 3.2 试验方法 | 第38-40页 |
| 3.2.1 Hexon与 Penton基因的扩增与串联 | 第38页 |
| 3.2.2 重组表达质粒pcDNA3.1-HP的构建 | 第38-39页 |
| 3.2.3 重组质粒pcDNA3.1-HP的瞬时转染 | 第39页 |
| 3.2.4 间接免疫荧光检测pcDNA3.1-HP的表达 | 第39-40页 |
| 3.2.5 Western blot鉴定pcDNA3.1-HP的表达情况 | 第40页 |
| 3.3 结果 | 第40-43页 |
| 3.3.1 Hexon、Penton基因的扩增与串联HP基因的PCR扩增 | 第40-41页 |
| 3.3.2 重组质粒pcDNA3.1-HP的构建 | 第41页 |
| 3.3.3 IFA检测pcDNA3.1-HP在293T细胞中的表达 | 第41-42页 |
| 3.3.4 WB检测pcDNA3.1-HP在293T细胞中的表达 | 第42-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-44页 |
| 3.5 小结 | 第44-45页 |
| 第四章 禽腺病毒血清4型核酸疫苗免疫效果初步研究 | 第45-50页 |
| 4.1 材料与方法 | 第45-46页 |
| 4.1.1 质粒及试验动物 | 第45页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第45页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第45-46页 |
| 4.2 试验方法 | 第46-47页 |
| 4.2.1 核酸疫苗的制备 | 第46页 |
| 4.2.2 试验设计 | 第46页 |
| 4.2.3 抗体及抗体水平的检测 | 第46-47页 |
| 4.3 结果 | 第47-48页 |
| 4.3.1 血清抗体特异性的检测 | 第47页 |
| 4.3.2 血清抗体水平的检测 | 第47-48页 |
| 4.4 讨论 | 第48-49页 |
| 4.5 小结 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-61页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
