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RNF12介导的BRF1泛素化调控RNA聚合酶Ⅲ活性的作用及机制研究

摘要第5-6页
ABSTRACT第6页
第一章 绪论第10-37页
    1.1 RNA聚合酶Ⅲ介导的转录过程第10-15页
        1.1.1 RNA聚合酶Ⅲ靶基因启动子类型第10-12页
        1.1.2 RNA聚合酶Ⅲ转录所需的转录因子第12-13页
        1.1.3 RNA聚合酶Ⅲ的组成第13-15页
    1.2 RNA聚合酶Ⅲ活性的调控第15-27页
        1.2.1 Maf1蛋白对RNA聚合酶Ⅲ活性的调控第15-21页
        1.2.2 TFⅢB/C亚基表达水平对RNA聚合酶Ⅲ活性的调控第21-22页
        1.2.3 类泛素化修饰对RNA聚合酶Ⅲ活性的调控第22-24页
        1.2.4 磷酸化修饰对RNA聚合酶Ⅲ活性的调控第24-27页
        1.2.5 泛素化修饰对RNA聚合酶Ⅲ活性的调控第27页
    1.3 肿瘤细胞中RNA聚合酶Ⅲ异常活化第27-32页
        1.3.1 解除抑癌蛋白的抑制作用导致肿瘤细胞中RNA聚合酶Ⅲ异常活化第28-31页
        1.3.2 癌蛋白增强肿瘤细胞中RNA聚合酶Ⅲ的活性第31页
        1.3.3 特异性转录因子的过表达提高肿瘤细胞中RNA聚合酶Ⅲ的活性第31-32页
    1.4 RNF12蛋白的研究现状第32-35页
        1.4.1 RNF12蛋白简介第32页
        1.4.2 RNF12蛋白的功能第32-35页
    1.5 本论文的选题思路和研究意义第35-37页
第二章 实验材料与方法第37-55页
    2.1 实验材料第37-39页
        2.1.1 实验所用试剂第37-38页
        2.1.2 实验所用抗体第38页
        2.1.3 实验所用仪器第38-39页
    2.2 实验方法第39-55页
        2.2.1 分子克隆第39-43页
        2.2.2 细胞培养第43-44页
        2.2.3 慢病毒的包装与感染第44-45页
        2.2.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第45页
        2.2.5 Western blotting第45-46页
        2.2.6 免疫共沉淀实验第46-47页
        2.2.7 BRF1相互作用蛋白的鉴定第47-48页
        2.2.8 GST Pull-down实验第48-49页
        2.2.9 免疫荧光实验第49-50页
        2.2.10 体内泛素化实验第50页
        2.2.11 体外泛素化实验第50-51页
        2.2.12 蛋白质半衰期检测第51页
        2.2.13 荧光定量RT-PCR第51-53页
        2.2.14 染色体免疫共沉淀(CIP)第53-54页
        2.2.15 数据统计分析第54-55页
第三章 实验结果与讨论第55-76页
    3.1 BRF1在细胞内发生泛素化修饰第55-56页
    3.2 RNF12是一个新的BRF1相互作用蛋白第56-58页
    3.3 RNF12和BRF1相互作用区域的鉴定第58-60页
    3.4 RNF12作为BRF1的E3泛素连接酶促进BRF1的泛素化修饰第60-65页
    3.5 RNF12催化BRF1形成Lys27和Lys33依赖的多聚泛素链第65-68页
    3.6 RNF12通过BRF1抑制RNA聚合酶Ⅲ的活性及细胞增殖第68-73页
    3.7 总结与讨论第73-76页
参考文献第76-88页
附录第88-94页
致谢第94-95页
在读期间发表的学术论文第95页

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