摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
第一章 绪论 | 第10-37页 |
1.1 RNA聚合酶Ⅲ介导的转录过程 | 第10-15页 |
1.1.1 RNA聚合酶Ⅲ靶基因启动子类型 | 第10-12页 |
1.1.2 RNA聚合酶Ⅲ转录所需的转录因子 | 第12-13页 |
1.1.3 RNA聚合酶Ⅲ的组成 | 第13-15页 |
1.2 RNA聚合酶Ⅲ活性的调控 | 第15-27页 |
1.2.1 Maf1蛋白对RNA聚合酶Ⅲ活性的调控 | 第15-21页 |
1.2.2 TFⅢB/C亚基表达水平对RNA聚合酶Ⅲ活性的调控 | 第21-22页 |
1.2.3 类泛素化修饰对RNA聚合酶Ⅲ活性的调控 | 第22-24页 |
1.2.4 磷酸化修饰对RNA聚合酶Ⅲ活性的调控 | 第24-27页 |
1.2.5 泛素化修饰对RNA聚合酶Ⅲ活性的调控 | 第27页 |
1.3 肿瘤细胞中RNA聚合酶Ⅲ异常活化 | 第27-32页 |
1.3.1 解除抑癌蛋白的抑制作用导致肿瘤细胞中RNA聚合酶Ⅲ异常活化 | 第28-31页 |
1.3.2 癌蛋白增强肿瘤细胞中RNA聚合酶Ⅲ的活性 | 第31页 |
1.3.3 特异性转录因子的过表达提高肿瘤细胞中RNA聚合酶Ⅲ的活性 | 第31-32页 |
1.4 RNF12蛋白的研究现状 | 第32-35页 |
1.4.1 RNF12蛋白简介 | 第32页 |
1.4.2 RNF12蛋白的功能 | 第32-35页 |
1.5 本论文的选题思路和研究意义 | 第35-37页 |
第二章 实验材料与方法 | 第37-55页 |
2.1 实验材料 | 第37-39页 |
2.1.1 实验所用试剂 | 第37-38页 |
2.1.2 实验所用抗体 | 第38页 |
2.1.3 实验所用仪器 | 第38-39页 |
2.2 实验方法 | 第39-55页 |
2.2.1 分子克隆 | 第39-43页 |
2.2.2 细胞培养 | 第43-44页 |
2.2.3 慢病毒的包装与感染 | 第44-45页 |
2.2.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第45页 |
2.2.5 Western blotting | 第45-46页 |
2.2.6 免疫共沉淀实验 | 第46-47页 |
2.2.7 BRF1相互作用蛋白的鉴定 | 第47-48页 |
2.2.8 GST Pull-down实验 | 第48-49页 |
2.2.9 免疫荧光实验 | 第49-50页 |
2.2.10 体内泛素化实验 | 第50页 |
2.2.11 体外泛素化实验 | 第50-51页 |
2.2.12 蛋白质半衰期检测 | 第51页 |
2.2.13 荧光定量RT-PCR | 第51-53页 |
2.2.14 染色体免疫共沉淀(CIP) | 第53-54页 |
2.2.15 数据统计分析 | 第54-55页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第55-76页 |
3.1 BRF1在细胞内发生泛素化修饰 | 第55-56页 |
3.2 RNF12是一个新的BRF1相互作用蛋白 | 第56-58页 |
3.3 RNF12和BRF1相互作用区域的鉴定 | 第58-60页 |
3.4 RNF12作为BRF1的E3泛素连接酶促进BRF1的泛素化修饰 | 第60-65页 |
3.5 RNF12催化BRF1形成Lys27和Lys33依赖的多聚泛素链 | 第65-68页 |
3.6 RNF12通过BRF1抑制RNA聚合酶Ⅲ的活性及细胞增殖 | 第68-73页 |
3.7 总结与讨论 | 第73-76页 |
参考文献 | 第76-88页 |
附录 | 第88-94页 |
致谢 | 第94-95页 |
在读期间发表的学术论文 | 第95页 |