摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-9页 |
第1章 引言 | 第12-23页 |
1.1 优雅蝈螽生物学特征概述 | 第12-13页 |
1.1.1 优雅蝈螽生物学性质 | 第12页 |
1.1.2 优雅蝈螽精子基本结构 | 第12-13页 |
1.1.3 优雅蝈螽精子形成 | 第13页 |
1.2 细胞骨架及KIF3A、KIF18A的概述 | 第13-17页 |
1.2.1 微管 | 第13-14页 |
1.2.2 微丝 | 第14-15页 |
1.2.3 KIF3A和 KIF18A | 第15-17页 |
1.3 国内外研究进展 | 第17-22页 |
1.3.1 精子形成中相关驱动蛋白作用的国内外研究进展 | 第17-19页 |
1.3.2 KIF3A国内外研究进展 | 第19-21页 |
1.3.3 KIF18A国内外研究进展 | 第21-22页 |
1.4 研究目的及意义 | 第22-23页 |
第2章 材料与方法 | 第23-38页 |
2.1 实验材料 | 第23-25页 |
2.1.1 实验昆虫 | 第23页 |
2.1.2 实验试剂与仪器 | 第23-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-38页 |
2.2.1 在精巢组织中筛选高表达的驱动蛋白基因及qPCR验证 | 第25-26页 |
2.2.2 KIF3A和 KIF18A基因与蛋白序列分析 | 第26页 |
2.2.3 精巢总RNA提取 | 第26-27页 |
2.2.4 第一条cDNA链合成 | 第27-28页 |
2.2.5 dsRNA对应的目的片段及引物的设计 | 第28页 |
2.2.6 目的片段的扩增 | 第28-30页 |
2.2.7 克隆载体的构建 | 第30-31页 |
2.2.8 双酶切反应 | 第31页 |
2.2.9 干扰载体的构建 | 第31-32页 |
2.2.10 dsRNA的合成 | 第32-34页 |
2.2.11 RNAi处理 | 第34页 |
2.2.12 干扰效果的qPCR验证 | 第34-36页 |
2.2.13 干扰效果的免疫荧光观察 | 第36-37页 |
2.2.14 干扰效果的PAS观察 | 第37-38页 |
第3章 结果 | 第38-68页 |
3.1 优雅蝈螽转录组个体不同部位驱动蛋白基因表达结果 | 第38-40页 |
3.2 kif3a、kif18a基因在不同组织中qPCR结果 | 第40-41页 |
3.3 KIF3A及 KIF18A基因及蛋白序列分析结果 | 第41-54页 |
3.3.1 kif3a、kif18a基因cDNA序列分析 | 第41-46页 |
3.3.2 KIF3A、KIF18A蛋白结构域分析 | 第46-53页 |
3.3.3 二级结构预测 | 第53页 |
3.3.4 三级结构预测 | 第53-54页 |
3.4 分子进化树分析结果 | 第54-57页 |
3.5 重组克隆载体与干扰载体空载双酶切反应结果 | 第57-59页 |
3.6 干扰载体构建 | 第59-60页 |
3.7 干扰后qPCR结果 | 第60-62页 |
3.8 干扰后精巢组织涂片及切片观察结果 | 第62-68页 |
第4章 讨论及结论 | 第68-72页 |
4.1 讨论 | 第68-71页 |
4.2 小结 | 第71页 |
4.3 研究展望 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
附录 Ⅰ | 第80-82页 |
附录 Ⅱ | 第82-84页 |
致谢 | 第84-86页 |
攻读学位期间取得的科研成果 | 第86页 |