| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第10-25页 |
| 1.1 芋螺毒素 | 第10-16页 |
| 1.1.1 芋螺毒素简介 | 第10-11页 |
| 1.1.2 芋螺毒素的命名 | 第11页 |
| 1.1.3 芋螺毒素的结构与分类 | 第11-14页 |
| 1.1.4 芋螺毒素药理活性 | 第14-16页 |
| 1.2 基因组文库发展历程 | 第16-20页 |
| 1.2.1 基因组文库概述 | 第16页 |
| 1.2.2 λ噬菌体(λ-phage)文库 | 第16页 |
| 1.2.3 Cosmid文库 | 第16页 |
| 1.2.4 YAC文库 | 第16-17页 |
| 1.2.5 BAC文库 | 第17-18页 |
| 1.2.6 Fosmid文库 | 第18-20页 |
| 1.3 α-芋螺毒素 | 第20-23页 |
| 1.3.1 α-芋螺毒素结构 | 第20页 |
| 1.3.2 α-芋螺毒素作用机制 | 第20-23页 |
| 1.3.3 α-芋螺毒素克隆 | 第23页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-39页 |
| 2.1 材料 | 第25-27页 |
| 2.1.1 实验螺 | 第25-26页 |
| 2.1.2 试剂 | 第26页 |
| 2.1.3 仪器 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-39页 |
| 2.2.1 C.vexillum基因组DNA的提取 | 第27-29页 |
| 2.2.2 C.vexillum基因组DNA片段大小的检测 | 第29-30页 |
| 2.2.3 C.vexillum特定目的片段的低熔点琼脂糖回收 | 第30-31页 |
| 2.2.4 连接载体 | 第31-32页 |
| 2.2.5 质粒的包装 | 第32页 |
| 2.2.6 噬菌体转导 | 第32-33页 |
| 2.2.7 获取、保存克隆 | 第33页 |
| 2.2.8 插入片段大小的检测 | 第33-34页 |
| 2.2.9 克隆稳定性检测 | 第34页 |
| 2.2.10 α-芋螺毒素引物设计 | 第34-35页 |
| 2.2.11 α-芋螺毒素基因克隆 | 第35-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-53页 |
| 3.1 Fosmid基因组文库的构建 | 第39-45页 |
| 3.1.1 不同方法提取C.vexillum不同组织器官的基因组DNA片段检测 | 第39-40页 |
| 3.1.2 不同方法提取的C.vexillum不同组织的基因组DNA纯度和产率比较 | 第40-41页 |
| 3.1.3 水平电泳分离优化法提取的基因组DNA效果 | 第41-42页 |
| 3.1.4 脉冲场电泳分离优化法提取的基因组DNA效果 | 第42-43页 |
| 3.1.5 目的片段的获取 | 第43-44页 |
| 3.1.6 连接、包装与转导 | 第44-45页 |
| 3.1.7 文库的保存 | 第45页 |
| 3.2 Fosmid文库的质量鉴定 | 第45-46页 |
| 3.2.1 插入片段大小 | 第45页 |
| 3.2.2 克隆的稳定性检测 | 第45-46页 |
| 3.3 α-芋螺毒素基因的克隆 | 第46-53页 |
| 3.3.1 从C.vexillum基因组DNA中克隆毒素基因 | 第46-47页 |
| 3.3.2 从C.vexillum Fosmid文库中克隆毒素基因 | 第47-48页 |
| 3.3.3 目的片段的连接与转导 | 第48页 |
| 3.3.4 重组质粒的鉴定 | 第48-49页 |
| 3.3.5 重组质粒测序结果 | 第49-53页 |
| 4 讨论 | 第53-58页 |
| 4.1 菖蒲芋螺Fosmid文库构建的意义 | 第53-54页 |
| 4.2 菖蒲芋螺高质量DNA的提取 | 第54页 |
| 4.3 合适片段目的基因的获取 | 第54-55页 |
| 4.4 Fosmid文库构建效率 | 第55-56页 |
| 4.5 α-芋螺毒素基因的克隆 | 第56-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 5.1 菖蒲芋螺基因组文库的构建 | 第58页 |
| 5.2 α-芋螺毒素的克隆 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
