中英文缩略词对照 | 第8-12页 |
中文摘要 | 第12-15页 |
英文摘要 | 第15-18页 |
1 引言 | 第19-27页 |
2 实验材料 | 第27-35页 |
2.1 实验动物 | 第27页 |
2.2 实验细胞 | 第27页 |
2.3 引物合成 | 第27-28页 |
2.4 主要仪器设备和产地 | 第28-29页 |
2.5 主要试验药物和试剂 | 第29-31页 |
2.5.1 苍耳亭单体 | 第29-30页 |
2.5.2 抗体 | 第30页 |
2.5.3 主要试剂 | 第30-31页 |
2.6 主要实验溶液配制方法 | 第31-35页 |
3 实验方法 | 第35-53页 |
3.1 细胞培养 | 第35页 |
3.2 光学显微镜下观察苍耳亭对肝癌细胞形态学的影响 | 第35-36页 |
3.3 MTT实验法检测苍耳亭对肝癌细胞增殖能力的影响 | 第36-37页 |
3.4 流式细胞术检测苍耳亭对肝癌细胞凋亡的影响… | 第37-38页 |
3.5 流式细胞术检测苍耳亭对肝癌细胞周期的影响 | 第38-39页 |
3.6 TUNEL染色法检测苍耳亭对肝癌细胞凋亡的影响 | 第39-40页 |
3.7 蛋白质免疫印迹法(Westernblot)检测组织和细胞中蛋白质表达… | 第40-44页 |
3.7.1 裸鼠HCC模型肿瘤组织蛋白提取 | 第40-41页 |
3.7.2 细胞培养及蛋白提取 | 第41-42页 |
3.7.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第42-43页 |
3.7.4 湿式蛋白质转印 | 第43页 |
3.7.5 孵育 | 第43-44页 |
3.7.6 显色 | 第44页 |
3.8 实时定量PCR实验(Real-TimeQuantitativePCR,RT-qPCR)检测细胞中mRNA表达 | 第44-46页 |
3.8.1 细胞总RNA提取 | 第44-45页 |
3.8.2 RNA逆转录 | 第45页 |
3.8.3 RT-qPCR | 第45-46页 |
3.9 细胞转染 | 第46页 |
3.10 细胞免疫荧光 | 第46-47页 |
3.11 双荧光素酶报告基因实验 | 第47-48页 |
3.12 HE染色 | 第48-49页 |
3.13 裸鼠组织标本免疫组化 | 第49-50页 |
3.14 透射电镜法检测苍耳亭对肝癌细胞内质网的影响 | 第50页 |
3.15 Transwell法检测苍耳亭对肝癌细胞迁移的影响 | 第50-51页 |
3.16 Transwell法检测苍耳亭对肝癌细胞侵袭的影响 | 第51-52页 |
3.17 裸鼠肝癌移植瘤模型的建立 | 第52页 |
3.18 统计学处理 | 第52-53页 |
4 结果 | 第53-91页 |
4.1 苍耳亭改变人肝癌细胞正常形态 | 第53-55页 |
4.2 苍耳亭抑制人肝癌细胞的细胞活力 | 第55-57页 |
4.3 苍耳亭阻滞人肝癌细胞的细胞周期 | 第57-61页 |
4.4 苍耳亭抑制人肝癌细胞迁移和侵袭 | 第61-63页 |
4.4.1 苍耳亭抑制人肝癌细胞迁移 | 第61-62页 |
4.4.2 苍耳亭抑制人肝癌细胞侵袭 | 第62-63页 |
4.5 苍耳亭诱导人肝癌细胞的凋亡 | 第63-73页 |
4.5.1 流式细胞仪术检测苍耳亭对肝癌细胞凋亡的影响 | 第63-68页 |
4.5.2 TUNEL染色检测苍耳亭对肝癌细胞凋亡的影响 | 第68-71页 |
4.5.3 Annexin-V/PI双染实验考察苍耳亭肝癌细胞凋亡形态的影响 | 第71-72页 |
4.5.4 苍耳亭上调肝癌细胞中凋亡相关蛋白cleaved-capase3蛋白水平以及Bax/Bcl-2比值 | 第72-73页 |
4.6 苍耳亭通过诱导ERstress促进人肝癌细胞凋亡 | 第73-82页 |
4.6.1 透射电镜观察苍耳亭对SMMC-7721肝癌细胞内质网结构的影响 | 第73-74页 |
4.6.2 Westernblot检测苍耳亭对肝癌细胞UPR通路中相关蛋白表达的影响 | 第74-78页 |
4.6.3 苍耳亭增加PERK-eIF2α-ATF4通路下游靶蛋白CHOP表达水平 | 第78-80页 |
4.6.4 苍耳亭促进细胞质中ATF4进入细胞核 | 第80-81页 |
4.6.5 苍耳亭增加肝癌细胞中ATF4基因的转录活性 | 第81-82页 |
4.7 苍耳亭抑制裸鼠肝癌移植瘤模型的肿瘤生长 | 第82-83页 |
4.8 苍耳亭上调裸鼠肝癌移植瘤模型中PERK-eIF2α-ATF4通路蛋白及其下游靶蛋白CHOP的表达 | 第83-91页 |
5 讨论 | 第91-102页 |
6 结论 | 第102-103页 |
参考文献 | 第103-112页 |
附录 | 第112-114页 |
致谢 | 第114-115页 |
综述 | 第115-138页 |
参考文献 | 第130-138页 |