| 缩写词 | 第5-10页 |
| 摘要 | 第10-15页 |
| Abstract | 第15-20页 |
| 第一章 引言 | 第21-30页 |
| 1 植物miRNA研究进展 | 第22-26页 |
| 1.1 植物miRNA概况 | 第22页 |
| 1.2 miRNA在植物体胚中的研究进展 | 第22-23页 |
| 1.3 植物miR166研究进展 | 第23-24页 |
| 1.4 植物miRNA启动子研究进展 | 第24-25页 |
| 1.5 miPEPs在植物中的研究进展 | 第25-26页 |
| 2 龙眼体胚发生与miRNA调控研究进展 | 第26-27页 |
| 2.1 龙眼体胚发生研究 | 第26页 |
| 2.2 龙眼体胚发生过程中miRNA的调控研究 | 第26-27页 |
| 3 本研究的意义及主要内容 | 第27-30页 |
| 3.1 本研究的意义 | 第27-28页 |
| 3.2 本研究的主要内容 | 第28-30页 |
| 第二章 龙眼miR166家族的分子进化特性及时空表达分析 | 第30-42页 |
| 1 材料与方法 | 第30-32页 |
| 1.1 材料 | 第30-31页 |
| 1.2 方法 | 第31-32页 |
| 1.2.1 植物miR166序列的获取 | 第31页 |
| 1.2.2 miR166成熟序列和前体序列分析 | 第31页 |
| 1.2.3 龙眼miR166靶基因预测 | 第31页 |
| 1.2.4 龙眼pre-miR166家族在不同组织中表达的实时荧光定量分析 | 第31-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-39页 |
| 2.1 植物miR66家族成熟序列分析 | 第32-34页 |
| 2.2 龙眼pre-miR166家族序列分析及二级结构预测 | 第34-36页 |
| 2.3 果树pre-miR166基因家族系统发育进化树分析 | 第36-38页 |
| 2.4 龙眼miR166靶基因预测分析 | 第38页 |
| 2.5 pre-miR166家族不同成员在'红核子'龙眼不同组织部位中的表达分析 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-42页 |
| 3.1 植物miR166家族的进化特性 | 第39-41页 |
| 3.2 miR166家族可能参与'红核子'龙眼花器官和果实器官的发育 | 第41-42页 |
| 第三章 龙眼miR166初级体克隆及生物信息学分析 | 第42-60页 |
| 1 材料与方法 | 第42-45页 |
| 1.1 材料 | 第42-43页 |
| 1.2 方法 | 第43-45页 |
| 1.2.1 总RNA提取及cDNA反转录 | 第43页 |
| 1.2.2 龙眼7个pri-miR166的克隆 | 第43页 |
| 1.2.3 龙眼pri-miR166的PCR扩增 | 第43-44页 |
| 1.2.4 龙眼pri-miR166的序列测定与生物信息学分析 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-56页 |
| 2.1 龙眼体胚早期7个pri-miR166序列的克隆 | 第45-48页 |
| 2.1.1 龙眼体胚早期pri-miR166 cDNA 5’末端序列的获得 | 第45-47页 |
| 2.1.2 龙眼体胚早期pri-miR166 cDNA 3’末端序列的获得 | 第47-48页 |
| 2.2 龙眼体胚早期3条pri-miR166序列的拼接及编码短肽的分析 | 第48-52页 |
| 2.3 龙眼pri-miR166 S53、pri-miR166 S78和pri-miR166 S338启动子顺式作用元件分析 | 第52-56页 |
| 2.3.1 龙眼pri-miR 166 S53、pri-miR166 S78和pri-miR166 S338启动子光反应元件分析 | 第53页 |
| 2.3.2 龙眼pri-miR166 S53、pri-miR166 S78和pri-miR166 S338启动子激素响应元件分析 | 第53-55页 |
| 2.3.3 龙眼pri-miR166 S53、pri-miR166 S78和pri-miR166 S338特殊响应元件分析 | 第55-56页 |
| 3 讨论 | 第56-60页 |
| 3.1 龙眼体胚早期7个pri-miR166序列的克隆难点 | 第56-57页 |
| 3.2 pri-miR166 S53、pri-miR166 S78和pri-miR166 S338初级体转录起始位点的确定及其编码潜在短肽的分析 | 第57-59页 |
| 3.3 龙眼pri-miR166 S53、pri-miR166 S78和pri-miR166 S338启动子含有激素和胁迫应答等顺式作用元件 | 第59-60页 |
| 第四章 pre-miR166和miR166在龙眼体胚发生早期及不同浓度激素处理下EC的表达模式分析 | 第60-75页 |
| 第一节 pre-miR166和miR166在龙眼体胚发生早期的表达模式分析 | 第60-68页 |
| 1 材料和方法 | 第61-62页 |
| 1.1 材料 | 第61页 |
| 1.2 方法 | 第61-62页 |
| 1.2.1 实时荧光定量PCR分析 | 第61-62页 |
| 1.2.2 数据统计分析 | 第62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-66页 |
| 2.1 pre-miR166和miR166在2,4-D调控的龙眼体胚发生早期的表达模式分析 | 第63-64页 |
| 2.2 pre-miR166和miR166在无2,4-D调控的龙眼体胚发生早期的表达模式分析 | 第64-66页 |
| 3 讨论 | 第66-68页 |
| 第二节 pre-miR166和miR166在龙眼EC不同浓度激素处理下的表达模式分析 | 第68-75页 |
| 1 材料和方法 | 第68-69页 |
| 1.1 材料 | 第68页 |
| 1.2 方法 | 第68-69页 |
| 2 结果与分析 | 第69-73页 |
| 2.1 pre-miR166和miR166在不同浓度2,4-D处理下的龙眼EC中的表达模式分析 | 第69-70页 |
| 2.2 pre-miR166和miR166在不同浓度ABA处理下的龙眼EC中的表达模式分析 | 第70-71页 |
| 2.3 pre-miR166和miR166在不同浓度乙烯处理下的龙眼EC中的表达模式分析 | 第71-73页 |
| 3 讨论 | 第73-75页 |
| 第五章 龙眼体胚发生早期miR166a.2、miR166c、miR166f过表达抑制表达分析 | 第75-88页 |
| 1 材料与方法 | 第75-78页 |
| 1.1 材料 | 第75-76页 |
| 1.2 方法 | 第76-78页 |
| 1.2.1 龙眼miR166靶基因和eTMs的预测与分析 | 第76页 |
| 1.2.2 龙眼体胚早期miR166a.2、miR166c和miR166f的过表达与抑制表达 | 第76页 |
| 1.2.3 qPCR分析 | 第76-78页 |
| 2 结果与分析 | 第78-86页 |
| 2.1 龙眼miR166家族靶基因及潜在eTMs预测与FPKM值分析 | 第78-80页 |
| 2.1.1 龙眼miR166家族成员靶基因及eTMs预测 | 第78-80页 |
| 2.2 龙眼miR166a.2、miR166c、miR166f靶基因及其潜在eTMs FPKM值分析 | 第80-81页 |
| 2.3 龙眼体胚早期miR166a.2、miR166c和miR166f的过表达与抑制表达分析 | 第81-86页 |
| 2.3.1 “pre-mi166-miR166-靶基因-eTM”通路在miR166a.2过表达与抑制表达下的表达模式分析 | 第81-83页 |
| 2.3.2 “pre-mi166-miR166-靶基因-eTM”通路在miR166c过表达与抑制表达下的表达模式分析 | 第83-85页 |
| 2.3.3 “pre-mi166-miR166-靶基因-eTM”通路在miR166f过表达与抑制表达下的表达模式分析 | 第85-86页 |
| 3 讨论 | 第86-88页 |
| 第六章 人工合成的miPEP166 S338在龙眼体胚发生早期的作用研究 | 第88-93页 |
| 1 材料与方法 | 第88-89页 |
| 1.1 材料 | 第88页 |
| 1.2 方法 | 第88-89页 |
| 1.2.1 人工合成miPEP166 S338处理龙眼体胚细胞 | 第88-89页 |
| 2 结果与分析 | 第89-91页 |
| 2.1 miPEP166 S338处理下龙眼体胚发生早期的表达模式分析 | 第89-90页 |
| 2.2 龙眼不同体胚发生时期miPEP166 S338处理24h的表达模式分析 | 第90-91页 |
| 3 讨论 | 第91-93页 |
| 第七章 小结与展望 | 第93-97页 |
| 参考文献 | 第97-105页 |
| 附录 | 第105-111页 |
| 附录A 龙眼miR166家族7条前体序列信息 | 第105-106页 |
| 附录B pri-miR166 S53、pri-miR166 S78和pri-miR166 S338克隆序列及其转录起始位点 | 第106-111页 |
| 硕士期间发表论文、获奖、工作及参加学术论坛情况 | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112页 |
