摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
缩略词表(Abbreviation) | 第13-15页 |
第一章 前言 | 第15-30页 |
1 课题的提出 | 第15-17页 |
2 前人研究进展 | 第17-29页 |
2.1 植物缺硼研究进展 | 第17-24页 |
2.1.1 硼的生理功能 | 第17-20页 |
2.1.2 植物中硼的吸收、转运及利用 | 第20-22页 |
2.1.3 柑橘硼营养研究现状 | 第22-24页 |
2.2 植物缺镁研究进展 | 第24-29页 |
2.2.2 镁的分子生理功能 | 第24-25页 |
2.2.3 植物缺镁的症状 | 第25-27页 |
2.2.4 土壤缺镁的主要原因 | 第27页 |
2.2.5 离子转运蛋白与植物耐缺镁 | 第27-29页 |
3 本研究的目的和内容 | 第29-30页 |
第二章 缺硼胁迫下两种柑橘砧穗组合叶片转录组分析 | 第30-54页 |
1 引言 | 第30页 |
2 材料与方法 | 第30-36页 |
2.1 试验材料 | 第30-31页 |
2.2 生长条件和缺硼处理 | 第31页 |
2.3 转录组测序 | 第31-34页 |
2.4 柑橘叶片中总RNA的提取和质量检测 | 第34-35页 |
2.5 qRT-PCR分析 | 第35页 |
2.6 相关生理指标的测定 | 第35-36页 |
2.6.1 硼含量测定 | 第35-36页 |
2.6.2 叶绿素和类胡萝卜素测定 | 第36页 |
2.6.3 可溶性糖含量测定 | 第36页 |
2.6.4 叶片光合参数及木质素含量测定 | 第36页 |
2.7 统计分析 | 第36页 |
3 结果与分析 | 第36-50页 |
3.1 叶片表型,鲜重及硼含量 | 第36-38页 |
3.2 测序质量评估及差异基因分析 | 第38-43页 |
3.2.1 测序质量评估 | 第38-39页 |
3.2.2 差异表达基因分析 | 第39-43页 |
3.3 两种砧穗组合中光合作用相关基因对缺硼的响应 | 第43-45页 |
3.4 两种砧穗组合中光合色素相关基因对缺硼的响应 | 第45-47页 |
3.5 两种砧穗组合中糖代谢相关基因对缺硼的响应 | 第47-48页 |
3.6 两种砧穗组合中木质素代谢相关基因对缺硼的响应 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
4.1 两种砧穗组合在转录水平上的差异可能是缺硼造成其表型差异的原因之一 | 第50-51页 |
4.2 不同砧木的硼利用效率的差异是造成基因转录差异的主要原因 | 第51-53页 |
5 小结 | 第53-54页 |
第三章 直接缺镁及拮抗性缺镁对两种柑橘砧穗组合的影响 | 第54-69页 |
1 前言 | 第54页 |
2 材料与方法 | 第54-56页 |
2.1 试验材料和处理 | 第54-55页 |
2.2 相关生理指标的测定 | 第55-56页 |
2.2.1 可溶性糖的测定 | 第55页 |
2.2.2 可溶性淀粉的测定 | 第55页 |
2.2.3 丙二醛的测定 | 第55页 |
2.2.4 叶绿素含量测定 | 第55页 |
2.2.5 镁元素的测定 | 第55-56页 |
2.2.6 数据处理 | 第56页 |
3 结果与分析 | 第56-65页 |
3.1 直接缺镁对两种砧穗组合干重、镁含量及相关生理指标的影响 | 第56-58页 |
3.2 低pH对两种砧穗组合干重、镁含量及相关生理指标的影响 | 第58-61页 |
3.3 钾过量对两种砧穗组合干重、镁含量及相关生理指标的影响 | 第61-63页 |
3.4 铝过量对两种砧穗组合干重、镁含量及相关生理指标的影响 | 第63-65页 |
4 讨论 | 第65-68页 |
4.1 枳橙通过从根中运输更多的镁到地上部分来提高接穗的耐缺镁能力 | 第65-66页 |
4.2 枳橙对钾过量导致的缺镁有着更强的耐受能力 | 第66-67页 |
4.3 在低pH及铝毒害胁迫下,枳对镁的吸收强于枳橙 | 第67-68页 |
5 小结 | 第68-69页 |
第四章 柑橘镁离子转运蛋白(MGT)基因家族成员鉴定、表达分析及PtrMGT5基因的功能鉴定 | 第69-97页 |
1 前言 | 第69页 |
2 材料和方法 | 第69-78页 |
2.1 植物材料和生长条件 | 第69-70页 |
2.2 MGT基因家族的全基因组鉴定和生物信息学分析 | 第70页 |
2.3 RNA的提取及c DNA合成 | 第70页 |
2.4 柑橘中PtrMGTs基因表达定量分析 | 第70页 |
2.5 PtrMGT5基因的克隆 | 第70-72页 |
2.6 超表达载体构建 | 第72页 |
2.7 质粒转化GV1301农杆菌 | 第72-73页 |
2.8 农杆菌转化拟南芥 | 第73页 |
2.9 转基因拟南芥的抗性筛选 | 第73页 |
2.10 转基因拟南芥的检测 | 第73-74页 |
2.11 烟草瞬时表达 | 第74页 |
2.12 拟南芥原生质体制备及转化 | 第74-75页 |
2.13 转基因拟南芥的耐缺镁能力分析 | 第75-76页 |
2.14 PtrMGT5基因的启动子分析 | 第76页 |
2.15 GUS组织染色 | 第76-78页 |
3 结果与分析 | 第78-93页 |
3.1 PtrMGTs基因的挖掘 | 第78-79页 |
3.2 PtrMGTs基因结构及染色体分布分析 | 第79-80页 |
3.3 PtrMGTs氨基酸序列比对及亲缘关系分析 | 第80-81页 |
3.4 PtrMGTs基因组织特异表达分析 | 第81-82页 |
3.5 PtrMGTs基因直接缺镁处理下表达分析 | 第82-84页 |
3.6 PtrMGTs基因拮抗性缺镁处理下表达分析 | 第84-88页 |
3.7 PtrMGT5基因的克隆 | 第88页 |
3.8 PtrMGT5基因的亚细胞定位分析 | 第88-90页 |
3.9 PtrMGT5超表达植株抗直接缺镁能力分析 | 第90-91页 |
3.10 PtrMGT5超表达植株抗拮抗性缺镁能力分析 | 第91页 |
3.11 PtrMGT5启动子片段缺失分析 | 第91-92页 |
3.12 PtrMGT5启动子核心调控区域顺势作用元件分析 | 第92-93页 |
4 讨论 | 第93-96页 |
4.1 柑橘MGT基因家族的挖掘 | 第93-94页 |
4.2 PtrMGT参与不同形式缺镁胁迫的应答 | 第94-95页 |
4.3 超表达PtrMGT5可以提高植物对直接缺镁胁迫的抗性 | 第95页 |
4.4 PtrMGT5可以提高植株对离子拮抗性缺镁的耐受力 | 第95页 |
4.5 PtrMGT5的表达可能受到WRKY或者MYB转录因子的调控 | 第95-96页 |
5 小结 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-115页 |
附录 | 第115-116页 |
致谢 | 第116-117页 |