| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第一章 引言 | 第11-25页 |
| 1.1 乳腺癌的诊疗现状 | 第11-12页 |
| 1.2 CDK4与肿瘤 | 第12-15页 |
| 1.2.1 CDK的发现及结构特点 | 第12页 |
| 1.2.2 CDK4的生物学特点 | 第12-13页 |
| 1.2.3 CDK4与细胞周期调控 | 第13页 |
| 1.2.4 CDK4与肿瘤的发生发展 | 第13-14页 |
| 1.2.5 CDK4与乳腺癌 | 第14-15页 |
| 1.3 胞内抗体 | 第15-17页 |
| 1.3.1 胞内抗体技术的特点 | 第15-16页 |
| 1.3.2 胞内抗体的应用 | 第16-17页 |
| 1.4 蛋白质组学 | 第17-23页 |
| 1.4.1 蛋白质组学的产生及概念 | 第17-18页 |
| 1.4.2 蛋白质组学的研究必要性 | 第18页 |
| 1.4.3 蛋白质组学的研究现状 | 第18-19页 |
| 1.4.4 蛋白质分离技术 | 第19-20页 |
| 1.4.4.1 双向电泳 | 第19-20页 |
| 1.4.4.2 双向荧光差异凝胶电泳 | 第20页 |
| 1.4.5 蛋白质鉴定技术 | 第20页 |
| 1.4.6 蛋白质组学数据库 | 第20-21页 |
| 1.4.7 蛋白质组学的应用 | 第21-23页 |
| 1.4.7.1 肿瘤标志物筛选 | 第21-22页 |
| 1.4.7.2 药物作用机制和药物开发 | 第22-23页 |
| 1.4.7.3 疾病发病机制 | 第23页 |
| 1.4.7.4 蛋白质相互作用 | 第23页 |
| 1.5 本论文的立题目的及意义 | 第23-25页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第25-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第25页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第25页 |
| 2.1.3 实验试剂的配制 | 第25-27页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第27-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-38页 |
| 2.2.1 蛋白质样品制备 | 第28-31页 |
| 2.2.1.1 细胞培养与收集 | 第28页 |
| 2.2.1.2 蛋白提取 | 第28页 |
| 2.2.1.3 2-D Clean-Up Kit处理蛋白 | 第28-29页 |
| 2.2.1.4 蛋白质浓度测定 | 第29-30页 |
| 2.2.1.5 样品的SDS-PAGE分析 | 第30-31页 |
| 2.2.2 蛋白质样品的双向电泳分析 | 第31-36页 |
| 2.2.2.1 蛋白质样品的溶解 | 第31页 |
| 2.2.2.2 双向电泳蛋白浓度测定 | 第31-32页 |
| 2.2.2.3 IPG胶条的水化 | 第32页 |
| 2.2.2.4 第一向等电聚焦(IEF) | 第32-33页 |
| 2.2.2.5 IPG胶条的平衡 | 第33页 |
| 2.2.2.6 第二向SDS-PAGE | 第33-34页 |
| 2.2.2.7 银染 | 第34-35页 |
| 2.2.2.8 考马斯亮蓝染色 | 第35页 |
| 2.2.2.9 取点 | 第35-36页 |
| 2.2.3 双向电泳凝胶图像的软件分析 | 第36页 |
| 2.2.4 差异表达蛋白的质谱鉴定 | 第36-37页 |
| 2.2.4.1 胶内酶解 | 第36页 |
| 2.2.4.2 质谱分析 | 第36-37页 |
| 2.2.4.3 数据库检索 | 第37页 |
| 2.2.5 生物信息学分析 | 第37-38页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第38-57页 |
| 3.1 SDS-PAGE银染结果分析 | 第38-39页 |
| 3.2 蛋白质双向电泳结果分析 | 第39-57页 |
| 3.2.1 蛋白差异点分析 | 第39-41页 |
| 3.2.1.1 Bg组与1N组比较 | 第39-40页 |
| 3.2.1.2 Bg组与2N组比较 | 第40页 |
| 3.2.1.3 Bg组与3N组比较 | 第40页 |
| 3.2.1.4 综合比较 | 第40-41页 |
| 3.2.2 质谱结果分析 | 第41-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-63页 |
| 4.1 差异蛋白质组学技术在分析抗肿瘤药物的分子作用机制中的应用 | 第57-58页 |
| 4.2 抗CDK4胞内抗体的抗肿瘤分子机制 | 第58-63页 |
| 第五章 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-76页 |
| 致谢 | 第76页 |