| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略表 | 第17-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-28页 |
| 1.1 TRAIL凋亡通路与procaspase-8 | 第19-22页 |
| 1.2 Procaspase-8表达缺失 | 第22-24页 |
| 1.3 无凋亡诱导活性的procaspase-8突变体 | 第24-25页 |
| 1.4 Procaspase-8的稳定性 | 第25-26页 |
| 1.5 泛素化和磷酸化对procaspase-8活性的影响 | 第26-27页 |
| 1.6 研究目的 | 第27-28页 |
| 第二章：ART三药联用对大部分肿瘤细胞的促凋亡作用及机制的研究 | 第28-53页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-34页 |
| 2.1.1 实验所用细胞系 | 第28页 |
| 2.1.2 实验所用仪器 | 第28-29页 |
| 2.1.3 实验所用试剂 | 第29-31页 |
| 2.1.4 实验所用溶液的配制 | 第31-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-40页 |
| 2.2.1 细胞复苏 | 第34页 |
| 2.2.2 细胞传代培养 | 第34-35页 |
| 2.2.3 人牙髓细胞的原代培养 | 第35页 |
| 2.2.4 MTT细胞存活率检测法 | 第35-36页 |
| 2.2.5 细胞蛋白裂解液的制备 | 第36页 |
| 2.2.6 蛋白定量及SDS凝胶电泳样品制备 | 第36-37页 |
| 2.2.7 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第37-39页 |
| 2.2.8 转膜 | 第39页 |
| 2.2.9 免疫印迹 | 第39-40页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第40-52页 |
| 2.3.1 牙髓细胞原代培养示意图 | 第40-42页 |
| 2.3.2 TRAL单独给药对不同肿瘤细胞的生长抑制 | 第42-43页 |
| 2.3.3 Rocaglami de对c-FLIP的表达抑制作用 | 第43-44页 |
| 2.3.4 AT-406对XIAP的抑制作用 | 第44-46页 |
| 2.3.5 TRAIL,Rocaglamide及AT-406联合用药对不同肿瘤的生长抑制 | 第46-48页 |
| 2.3.6 ART三药联用的时间梯度处理对细胞的影响 | 第48-49页 |
| 2.3.7 TRAIL单独用药与TA,TR,ART联合用药对凋亡蛋白的影响 | 第49-52页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第52-53页 |
| 第三章：不同肿瘤细胞中的Procaspase-8的表达分析 | 第53-68页 |
| 3.1 实验材料 | 第53-57页 |
| 3.1.1 实验所甩细胞系 | 第53页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第53-54页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第54-56页 |
| 3.1.4 实验所用溶液的配制 | 第56-57页 |
| 3.2 实验方法 | 第57-60页 |
| 3.2.1 细胞传代培养 | 第57页 |
| 3.2.2 MTT细胞存活率检测法 | 第57页 |
| 3.2.3 细胞蛋白裂解液的制备 | 第57页 |
| 3.2.4 蛋白定量及SDS凝胶电泳样品制备 | 第57页 |
| 3.2.5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第57页 |
| 3.2.6 转膜 | 第57页 |
| 3.2.7 免疫印迹 | 第57页 |
| 3.2.8 总RNA的提取 | 第57-58页 |
| 3.2.9 逆转录 | 第58页 |
| 3.2.10 引物设计 | 第58-59页 |
| 3.2.11 引物稀释 | 第59页 |
| 3.2.12 PCR反应 | 第59-60页 |
| 3.3 实验结果 | 第60-67页 |
| 3.3.1 各种细胞中的TRAIL凋亡通路主要蛋白的本底表达情况 | 第60-62页 |
| 3.3.2 不同来源的人正常牙髓细胞的procaspase-8本底表达量的确定 | 第62-63页 |
| 3.3.3 不同细胞中的procaspase-8的mRNA表达情况 | 第63-67页 |
| 3.5 讨论与小结 | 第67-68页 |
| 第四章：Procaspase-8的表达调控对肿瘤细胞的促凋亡影响 | 第68-88页 |
| 4.1 实验材料 | 第68-72页 |
| 4.1.1 实验所用细胞系 | 第68页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第68-69页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第69-71页 |
| 4.1.4 实验所用溶液的配制 | 第71-72页 |
| 4.2 实验方法 | 第72页 |
| 4.2.1 细胞传代培养 | 第72页 |
| 4.2.2 MTT细胞存活率检测法 | 第72页 |
| 4.2.3 细胞蛋白裂解液的制备 | 第72页 |
| 4.2.4 蛋白定量及SDS凝胶电泳样品制备 | 第72页 |
| 4.2.5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第72页 |
| 4.2.6 转膜 | 第72页 |
| 4.2.7 免疫印迹 | 第72页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第72-87页 |
| 4.3.1 上调procaspase-8所用药物的选择及安全用药浓度范围的确定 | 第72-77页 |
| 4.3.1.1 Dup-697 | 第72-73页 |
| 4.3.1.2 丙戊酸钠(Valproic acid sodium salt) | 第73页 |
| 4.3.1.3 5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycyti dine) | 第73-74页 |
| 4.3.1.4 COX-2抑制剂Dup-697的安全用药范围 | 第74-75页 |
| 4.3.1.5 乙酰化酶抑制剂VA的安全用药范围 | 第75-77页 |
| 4.3.1.6 甲基化酶抑制剂5-Az的安全用药范围 | 第77页 |
| 4.3.2 Dup-697预处理MCF-7后的procaspase-8表达量及促凋亡作用 | 第77-79页 |
| 4.3.3 VA预处理U87后的procaspase-8表达量及促凋亡作用 | 第79-80页 |
| 4.3.4 VA预处理U251后的procaspase-8表达量及促凋亡作用 | 第80-81页 |
| 4.3.5 VA预处理U373后的procaspase-8表达量及促凋亡作用 | 第81-83页 |
| 4.3.6 VA预处理Pulp后的procaspase-8表达量及促凋亡作用 | 第83页 |
| 4.3.7 5-Az预处理U87后的procaspase-8表达量及促凋亡作用 | 第83-84页 |
| 4.3.8 5-Az预处理U251后的procaspase-8表达量及促凋亡作用 | 第84-85页 |
| 4.3.9 5-AZ与VA,Dup-697联用对肿瘤细胞的促凋亡作用 | 第85-87页 |
| 4.4 小结与分析 | 第87-88页 |
| 第五章 总结与讨论 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-96页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第96页 |
