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控制水稻维管束发育基因TWI1的图位克隆和功能研究

摘要第6-8页
abstract第8-9页
第一章 引言第16-29页
    1.1 C3植物和C4植物第16-19页
        1.1.1 C4植物的光合途径第16-17页
        1.1.2 C3植物的C4途径第17-18页
        1.1.3 C3、C4植物的比较基因组与蛋白质组学第18-19页
    1.2 C4水稻构建的理论基础第19-24页
        1.2.1 C4途径的酶学反应及基因表达调控第19-21页
        1.2.2 利用遗传操作创制C4植物第21-24页
    1.3 植物叶脉结构研究进展第24-27页
        1.3.1 C4植物叶片的结构特征第24-25页
        1.3.2 C4途径的遗传学研究第25-26页
        1.3.3 植物叶片结构研究进展第26-27页
    1.4 本研究的目的和意义第27-29页
        1.4.1 本研究的目的第27-28页
        1.4.2 本研究的意义第28-29页
第二章 材料与方法第29-52页
    2.1 实验材料和试剂第29-30页
        2.1.1 水稻材料第29页
        2.1.2 载体和菌株第29页
        2.1.3 实验试剂第29页
        2.1.4 主要实验仪器第29-30页
    2.2 实验方法第30-52页
        2.2.1 突变体的筛选第30页
        2.2.2 树脂切片方法第30页
        2.2.3 测定水稻叶片光合效率第30页
        2.2.4 叶绿素含量测定第30-31页
        2.2.5 徒手切片及confocol染色观察方法第31页
        2.2.6 载体构建第31-34页
        2.2.7 农杆菌感受态制备第34页
        2.2.8 电转农杆菌方法第34页
        2.2.9 细菌培养基配方第34-35页
        2.2.10 植物培养基配方第35-36页
        2.2.11 质粒的大量提取第36-37页
        2.2.12 TWI1蛋白的亚细胞定位第37-39页
        2.2.13 RNA的提取第39-40页
        2.2.14 cDNA合成第40页
        2.2.15 实时荧光定量PCR第40-41页
        2.2.16 转基因植株GUS表达活性检测第41页
        2.2.17 酵母双杂交第41-46页
        2.2.18 Westernblot第46-49页
        2.2.19 双分子荧光互补实验第49页
        2.2.20 Co-IP实验第49页
        2.2.21 烟草2A自剪切系统实验第49-50页
        2.2.22 拟南芥叶毛拯实验第50页
        2.2.23 免疫组化实验方法第50-52页
第三章 突变体筛选结果和分析第52-55页
    3.1 突变体筛选概述第52页
    3.2 叶脉突变体筛选结果第52页
    3.3 解剖学结构筛选突变体结果第52-54页
        3.3.1 共聚焦显微镜观察叶脉突变体的维管束结构第52-53页
        3.3.2 获得了类似C4植物叶片解剖学结构的水稻突变体材料。第53-54页
    3.4 讨论第54-55页
        3.4.1 水稻突变体缺乏发育完整的维管束内束鞘。第54页
        3.4.2 水稻突变体存在维管束鞘细胞延展和厚壁细胞数量变化第54页
        3.4.3 水稻突变体维管束鞘存在大量叶绿体第54-55页
第四章 twi1突变体研究结果与分析第55-84页
    4.1 突变体twi1表型分析第55-59页
    4.2 TWI1基因的图位克隆第59-60页
    4.3 功能互补验证第60-62页
    4.4 TWI1基因的表达模式分析第62-64页
    4.5 TWI1亚细胞定位第64页
    4.6 TWI1和KNOX家族蛋白相互作用第64-67页
    4.7 BIFC和Co-IP验证TWI1和OSH15相互作用第67-69页
    4.8 TWI1可以抑制OSH15在细胞间的自由穿梭第69-72页
    4.9 小脉的发生和发育机制解析第72-77页
    4.10 免疫组化检测OSH15蛋白分布第77-78页
    4.11 twi1/osh15双突变体的创制及遗传学分析第78-81页
    4.12 讨论第81-84页
        4.12.1 TWI1通过影响细胞分化模式来影响叶片的形态建成第81页
        4.12.2 TWI1通过抑制OSH15蛋白细胞间穿梭导致细胞分化以及木质化过程的异常第81-82页
        4.12.3 TWI1蛋白抑制OSH15蛋白的细胞间穿梭第82-83页
        4.12.4 TWI1基因潜在的应用价值第83-84页
第五章 全文结论第84-86页
    5.1 主要结论第84页
    5.2 本论文创新点第84页
    5.3 研究展望第84-86页
参考文献第86-96页
致谢第96-97页
作者简历第97-98页

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