| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第12-23页 |
| 1.1 ATL与HTLV-1 | 第12-13页 |
| 1.2 相关疾病：ATL和HAM | 第13页 |
| 1.3 HTLV-1引起的其他疾病 | 第13页 |
| 1.4 HTLV-1感染的细胞 | 第13-14页 |
| 1.5 HTLV-1的传播 | 第14页 |
| 1.6 HTLV-1病毒相关蛋白 | 第14-19页 |
| 1.6.1 HTLV-1Tax的结构与功能 | 第14-15页 |
| 1.6.2 HBZ的结构与功能 | 第15-16页 |
| 1.6.3 Rex的结构与功能 | 第16页 |
| 1.6.4 p12/p8的结构与功能 | 第16-17页 |
| 1.6.5 p13的结构与功能 | 第17页 |
| 1.6.6 p30蛋白的结构特征 | 第17-19页 |
| 1.7 Notch信号通路 | 第19-22页 |
| 1.7.1 Notch信号通路结构 | 第19-20页 |
| 1.7.2 Notch信号通与免疫系统疾的发育密切相关 | 第20-21页 |
| 1.7.3 Notch信号通路与神经系统疾病密切相关 | 第21页 |
| 1.7.4 Notch信号通路与EMT过程密切相关 | 第21页 |
| 1.7.5 Notch信号通路与病毒介入宿主细胞密切相关 | 第21-22页 |
| 1.8 本课题研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 第2章 RBPJ在ATL细胞中表达的调控机制 | 第23-41页 |
| 2.1 前言 | 第23-24页 |
| 2.2 实验材料、试剂与仪器 | 第24-26页 |
| 2.2.1 细胞株 | 第24页 |
| 2.2.2 质粒 | 第24页 |
| 2.2.3 主要试剂与耗材 | 第24-25页 |
| 2.2.4 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-37页 |
| 2.3.1 细胞培养与冻存 | 第26-27页 |
| 2.3.2 HBZ及HTLV-1-P30表达载体构建 | 第27-32页 |
| 2.3.3 转染 | 第32-33页 |
| 2.3.4 Real-timePCR检测 | 第33-34页 |
| 2.3.5 蛋白质免疫印迹 | 第34-37页 |
| 2.4 实验结果 | 第37-39页 |
| 2.4.1 RBPJ在HTLV-1阳性细胞株中高表达 | 第37-38页 |
| 2.4.2 HTLV-1-Tax与HBZ对RBPJ表达的影响 | 第38-39页 |
| 2.4.3 HTLV-1-p30对RBPJ表达的影响 | 第39页 |
| 2.5 结果分析与讨论 | 第39-41页 |
| 第3章 RBPJ影响ATL细胞增殖与迁移能力的机制 | 第41-60页 |
| 3.1 前言 | 第41页 |
| 3.2 实验材料、试剂与仪器 | 第41-43页 |
| 3.2.1 细胞株 | 第41-42页 |
| 3.2.2 质粒 | 第42页 |
| 3.2.3 主要试剂与耗材 | 第42-43页 |
| 3.2.4 主要仪器 | 第43页 |
| 3.3 RBPJ沉默载体构建 | 第43-46页 |
| 3.3.1 溶液配制 | 第43页 |
| 3.3.2 设计沉默序列 | 第43-44页 |
| 3.3.3 退火粘连反应体系 | 第44页 |
| 3.3.4 DNA片段的酶切与连接 | 第44-45页 |
| 3.3.5 连接产物转化 | 第45页 |
| 3.3.6 质粒小量提取 | 第45页 |
| 3.3.7 质粒提取后双酶切鉴定 | 第45页 |
| 3.3.8 测序及分析 | 第45页 |
| 3.3.9 质粒提取 | 第45-46页 |
| 3.4 慢病毒包装 | 第46-52页 |
| 3.4.1 溶液配制 | 第46页 |
| 3.4.2 慢病毒包装 | 第46页 |
| 3.4.3 稳定株构建 | 第46页 |
| 3.4.4 Real-timePCR | 第46页 |
| 3.4.5 Trizol法提取细胞总RNA | 第46页 |
| 3.4.6 RNA的纯化 | 第46页 |
| 3.4.7 cDNA合成 | 第46-47页 |
| 3.4.8 Realtime-PCR定量技术 | 第47页 |
| 3.4.9 Westernblot | 第47页 |
| 3.4.10 CCK-8检测细胞活力 | 第47-48页 |
| 3.4.11 PI染色检测细胞 | 第48页 |
| 3.4.12 ELISA测定胞外病毒滴度(p19蛋白含量) | 第48-50页 |
| 3.4.13 Trans-well实验检测细胞迁移能力 | 第50页 |
| 3.4.14 NCG小鼠成瘤模型的构建 | 第50-51页 |
| 3.4.15 石蜡标本的制备 | 第51页 |
| 3.4.16 载玻片的清洗 | 第51页 |
| 3.4.17 肿瘤病理切片的HE染色 | 第51-52页 |
| 3.4.18 肿瘤病理切片免疫组化实验 | 第52页 |
| 3.5 实验结果 | 第52-58页 |
| 3.5.1 RBPJ对HTLV-1病毒复制能力的影响 | 第52-54页 |
| 3.5.2 RBPJ对ATL细胞增殖的影响与机制初探 | 第54-55页 |
| 3.5.3 RBPJ对ATL细胞迁移的影响与机制初探 | 第55-56页 |
| 3.5.4 沉默RBPJ对ATL细胞皮下成瘤效果的影响 | 第56-57页 |
| 3.5.5 实体瘤中RBPJ下游基因与蛋白表达情况 | 第57-58页 |
| 3.6 结果讨论与分析 | 第58-60页 |
| 第4章 结论与展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
