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青藤碱上调microRNA-124对小鼠肾缺血再灌注损伤保护效应的研究

中文摘要第3-6页
Abstract第6-8页
第一章 前言第13-30页
    1.1 缺血再灌注损伤第13-14页
    1.2 肾缺血再灌注第14-18页
        1.2.1 肾缺血再灌注的病理损伤第14-15页
        1.2.2 炎症反应在肾缺血再灌注损伤中的作用第15-17页
        1.2.3 氧化应激在肾缺血再灌注损伤中的作用第17-18页
    1.3 细胞凋亡在肾缺血再灌注损伤中的作用第18-22页
        1.3.1 细胞凋亡的形态学变化第18-19页
        1.3.2 细胞凋亡通路第19-21页
        1.3.3 Caspases在细胞凋亡中的作用第21-22页
    1.4 青藤碱第22-23页
    1.5 青藤碱对缺血再灌注损伤的保护第23-25页
        1.5.1 青藤碱对心脏缺血再灌注的保护第23-24页
        1.5.2 青藤碱对肝脏缺血再灌注的保护第24页
        1.5.3 青藤碱对脑缺血再灌注损伤的保护第24页
        1.5.4 青藤碱对肾缺血再灌注的保护第24-25页
    1.6 MicroRNAs第25-28页
        1.6.1 miRNA的发现第26页
        1.6.2 miRNA的转录第26-27页
        1.6.3 miRNA在细胞核中处理的过程第27页
        1.6.4 miRNA的核输出第27页
        1.6.5 miRNA在细胞质中处理的过程第27-28页
        1.6.6 miRNA的作用第28页
    1.7 MicroRNAs与肾缺血再灌注损伤第28-29页
    1.8 研究目的与意义第29-30页
第二章 青藤碱减轻小鼠肾缺血再灌注的损伤第30-44页
    2.1 实验材料第30-31页
        2.1.1 实验动物第30页
        2.1.2 实验药品第30页
        2.1.3 实验试剂第30页
        2.1.4 主要实验仪器第30-31页
        2.1.5 实验材料第31页
    2.2 实验方法第31-34页
        2.2.1 动物分组第31-32页
        2.2.2 动物模型制备第32页
        2.2.3 给药剂量与方法第32页
        2.2.4 肾功能检测第32页
        2.2.5 组织SOD、MPA和MPO检测第32-33页
        2.2.6 TUNEL法检测肾组织细胞凋亡第33-34页
    2.3 实验结果第34-40页
        2.3.1 血清Cr和BUN的变化第34-36页
        2.3.2 肾脏组织MDA含量的变化第36-37页
        2.3.3 肾脏组织SOD和MPO活性的变化第37-39页
        2.3.4 肾脏细胞凋亡的变化第39-40页
    2.4 讨论第40-44页
        2.4.1 肾缺血再灌注损伤第40-42页
        2.4.2 青藤碱减轻小鼠肾缺血再灌注损伤的作用第42-43页
        2.4.3 青藤碱减轻小鼠肾缺血再灌注细胞凋亡的作用第43-44页
第三章 青藤碱对HK-2 细胞缺氧/复氧(H/R)的保护第44-69页
    3.1 实验材料第44-46页
        3.1.1 实验细胞第44页
        3.1.2 实验药品第44页
        3.1.3 实验试剂第44-45页
        3.1.4 主要实验仪器第45-46页
        3.1.5 实验材料第46页
    3.2 实验方法第46-53页
        3.2.1 细胞培养第46页
        3.2.2 药物处理第46页
        3.2.3 建立缺氧/复氧细胞模型第46-47页
        3.2.4 MTT检测第47页
        3.2.5 流式细胞仪检测细胞凋亡第47-48页
        3.2.6 miRNA表达检测第48-49页
        3.2.7 miRNA转染细胞第49-50页
        3.2.8 双荧光素酶报告基因检测第50-52页
        3.2.9 Western blot分析第52-53页
        3.2.10 统计学分析第53页
    3.3 实验结果第53-67页
        3.3.1 不同青藤碱浓度对H/R的HK-2 细胞活性的影响第53-54页
        3.3.2 不同青藤碱浓度对H/R的HK-2 细胞凋亡的影响第54-56页
        3.3.3 H/R对HK-2 细胞miRNA表达的影响第56-57页
        3.3.4 不同时间点HK-2 细胞H/R模型miR124表达第57-58页
        3.3.5 青藤碱对HK-2 细胞H/R模型miR124表达的影响第58-59页
        3.3.6 miR-124 模拟物、miR-124 抑制剂转染HK-2 细胞的效果第59-61页
        3.3.7 双荧光素报告酶检测miR-124 与靶基因caspase 9 的结合第61-63页
        3.3.8 Westblot检测Caspase 9 的表达第63-65页
        3.3.9 青藤碱对抑制miR-124 表达的H/R HK-2 细胞活性和凋亡率的影响第65-67页
    3.4 讨论第67-69页
        3.4.1 H/R对HK-2 细胞的损害第67页
        3.4.2 miR-124 在HK-2 细胞H/R中的作用第67-68页
        3.4.3 青藤碱减轻H/R对HK-2 细胞损害的作用第68-69页
第四章 结论第69-71页
    4.1 结论第69页
    4.2 本实验研究的创新性第69页
    4.3 本实验研究的不足之处第69-70页
    4.4 研究展望第70-71页
参考文献第71-80页
在校期间的研究成果第80-81页
缩略词表第81-83页
致谢第83页

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