摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
英文名词缩写 | 第13-16页 |
第一章 研究背景 | 第16-52页 |
1.1 引言 | 第16页 |
1.2 干细胞的分类 | 第16-43页 |
1.2.1 全能干细胞 | 第17-19页 |
1.2.2 多能干细胞 | 第19-29页 |
1.2.3 生殖干细胞 | 第29-43页 |
1.3 多能干细胞与再生医学 | 第43-51页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第51-52页 |
第二章 实验材料与方法 | 第52-84页 |
2.1 技术路线 | 第52页 |
2.2 实验材料 | 第52-53页 |
2.2.1 实验动物 | 第52-53页 |
2.2.2 菌种、病毒和细胞株 | 第53页 |
2.3 实验仪器和设备 | 第53页 |
2.4 实验试剂 | 第53-58页 |
2.4.1 主要试剂 | 第53页 |
2.4.2 常规溶液的配制 | 第53-58页 |
2.5 实验方法 | 第58-84页 |
2.5.1 STO 细胞培养常规操作 | 第58-61页 |
2.5.2 雌性生殖干细胞的分离和纯化 | 第61-63页 |
2.5.3 雌性生殖干细胞培养常规操作 | 第63-65页 |
2.5.4 胚胎干细胞的培养 | 第65页 |
2.5.5 BrdU 与 MVH 双标 | 第65-66页 |
2.5.6 免疫荧光分析 | 第66-67页 |
2.5.7 细胞总 RNA 提取、总 RNA 反转录和 PCR 检测 | 第67-69页 |
2.5.8 雌性生殖干细胞转化为 ES-like 细胞 | 第69-70页 |
2.5.9 核型分析 | 第70-71页 |
2.5.10 碱性磷酸酶染色 | 第71-72页 |
2.5.11 DNA 甲基化的检测 | 第72-78页 |
2.5.12 畸胎瘤形成实验 | 第78-80页 |
2.5.13 ES-like 细胞的体外分化 | 第80-81页 |
2.5.14 ES-like 细胞嵌合能力的分析 | 第81-84页 |
第三章 实验结果 | 第84-111页 |
3.1 新生和青春前期鼠雌性生殖干细胞的分离和培养 | 第84-88页 |
3.2 雌性生殖干细胞的特征鉴定 | 第88-91页 |
3.3 雌性生殖干细胞在胚胎干细胞培养系统中的转化 | 第91-95页 |
3.4 雌性生殖干细胞源性 ES-like 细胞的多能性标志物检测 | 第95-100页 |
3.5 雌性生殖干细胞源性 ES-like 细胞的核 | 第100-101页 |
3.6 雌性生殖干细胞源性 ES-like 细胞的甲基化分析 | 第101-103页 |
3.7 雌性生殖干细胞源性 ES-like 细胞的体外分化能力分析 | 第103-107页 |
3.8 雌性生殖干细胞源性 ES-like 细胞的畸胎瘤形成能力分析 | 第107-108页 |
3.9 雌性生殖干细胞源性 ES-like 细胞的嵌合能力分析 | 第108-111页 |
第四章 讨论 | 第111-116页 |
第五章 全文总结 | 第116-118页 |
参考文献 | 第118-148页 |
附录 I 设备与仪器 | 第148-150页 |
附录 II 材料与试剂 | 第150-153页 |
附录 III 引物序列表 | 第153-156页 |
攻读博士学位期间已发表或录用的论文 | 第156-157页 |
攻读博士学位期间参与的国家项目 | 第157-158页 |
致谢 | 第158页 |