| 中文摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第12-24页 |
| 白血病概述 | 第12-13页 |
| 硒具有潜在的临床应用价值 | 第13-14页 |
| 细胞凋亡与细胞自噬 | 第14-19页 |
| 细胞凋亡概述 | 第14-16页 |
| 细胞自噬 | 第16-17页 |
| 细胞凋亡和自噬的转化调节 | 第17-19页 |
| Survivin及其可变剪接产物参与细胞命运调节 | 第19-20页 |
| 细胞骨架与细胞凋亡 | 第20-22页 |
| 研究目的、内容及意义 | 第22-24页 |
| 实验材料与方法 | 第24-44页 |
| 1 实验材料 | 第24-28页 |
| 1.1 细胞株 | 第24页 |
| 1.2 菌株 | 第24页 |
| 1.3 主要试剂 | 第24-25页 |
| 1.4 主要抗体 | 第25页 |
| 1.5 主要仪器 | 第25-26页 |
| 1.6 试剂配方 | 第26-27页 |
| 1.7 SiRNA干扰序列 | 第27-28页 |
| 1.8 普通引物序列 | 第28页 |
| 2 实验方法 | 第28-44页 |
| 2.1 细胞冻存 | 第28页 |
| 2.2 细胞复苏 | 第28页 |
| 2.3 细胞培养 | 第28-29页 |
| 2.4 细胞活力测定 | 第29页 |
| 2.5 考马斯亮蓝法测定蛋白浓度 | 第29页 |
| 2.6 Western blot | 第29-30页 |
| 2.7 Annexin V/PI双染流式细胞术测凋亡 | 第30-31页 |
| 2.8 免疫荧光染色 | 第31-32页 |
| 2.9 细胞核蛋白提取方法 | 第32页 |
| 2.10 线粒体蛋白提取方法 | 第32-33页 |
| 2.11 免疫共沉淀 | 第33页 |
| 2.12 细胞转染(脂质体法) | 第33-34页 |
| 2.13 细胞转染(电穿孔法) | 第34页 |
| 2.14 RNA的提取及RT-PCR | 第34-35页 |
| 2.15 DNA片段回收 | 第35页 |
| 2.16 细菌的转化与质粒提取 | 第35-36页 |
| 2.17 survivin-2B质粒构建 | 第36页 |
| 2.18 染色质免疫共沉淀 | 第36-38页 |
| 2.19 GST pull-down | 第38-39页 |
| 2.20 PI单染流式细胞术测定细胞周期变化 | 第39页 |
| 2.21 体内微管聚合分析 | 第39-40页 |
| 2.22 动物模型实验 | 第40-43页 |
| 2.23 统计学分析 | 第43-44页 |
| 一、survivin-2B使IKK alpha在核内积累并促进细胞自噬 | 第44-65页 |
| 1、亚硒酸钠促进NB4细胞中保护性自噬向凋亡的转化 | 第44-48页 |
| 2、亚硒酸钠通过影响survivin-2B、IKK alpha、P73含量调控NB4细胞自噬 | 第48-51页 |
| 3、survivin-2B在硒处理的NB4细胞中促进保护性自噬和拮抗凋亡 | 第51-55页 |
| 4、survivin-2B与IKK alpha在细胞核内存在相互作用 | 第55-57页 |
| 5、survivin-2B将IKK alpha积累在细胞核内 | 第57-59页 |
| 6、细胞核内的IKK alpha可调控P73的稳定性 | 第59-61页 |
| 7、P73促进NB4细胞中UVRAG的表达 | 第61-62页 |
| 8、亚硒酸钠在NB4细胞裸鼠模型中调控survivin-2B相关通路变化 | 第62-65页 |
| 二、亚硒酸钠改变微管动态变化诱导HL60细胞凋亡 | 第65-78页 |
| 1、亚硒酸钠以浓度依赖的方式抑制HL60细胞的生长 | 第65-67页 |
| 2、亚硒酸钠可以抑制HL60细胞中微管的聚合 | 第67-69页 |
| 3、亚硒酸钠将HL60细胞捕获在细胞周期的G2/M期 | 第69-71页 |
| 4、cyclin B1在HL60细胞中的积累是造成Mcl-1下调的重要原因 | 第71-73页 |
| 5、Mcl-1在HL60细胞中具有促进细胞存活的功能 | 第73-74页 |
| 6、亚硒酸钠抑制裸鼠模型的瘤细胞生长并促进微管解聚和凋亡 | 第74-78页 |
| 讨论 | 第78-84页 |
| 1、亚硒酸钠通过调节细胞自噬影响细胞存活 | 第78-79页 |
| 2、survivin-2B作为重要的上游分子介导硒作用下的自噬抑制 | 第79页 |
| 3、IKK alpha被survivn-2B积累在细胞核内 | 第79-80页 |
| 4、IKK alpha通过调控P73稳定性影响自噬起始蛋白UVRAG表达 | 第80-81页 |
| 5、亚硒酸钠在HL60细胞中可抑制微管动态变化引起细胞凋亡 | 第81-82页 |
| 6、亚硒酸钠在HL60细胞异种移植瘤模型表现出较好的抗癌活性 | 第82-84页 |
| 小结 | 第84-86页 |
| 1、亚硒酸钠诱导NB4细胞自噬向凋亡的转化 | 第84页 |
| 2、Survivin-2B使IKK alpha在细胞核内积累促进NB4细胞自噬 | 第84页 |
| 3、IKK alpha/P73细胞核内进一步调控UVRAG表达 | 第84页 |
| 4、亚硒酸钠促进HL60细胞微管解聚及细胞凋亡 | 第84页 |
| 5、裸鼠模型实验证明亚硒酸钠的抗肿瘤作用 | 第84-86页 |
| 5.1 亚硒酸钠在NB4细胞异种移植瘤裸鼠中具有抗癌效果 | 第84页 |
| 5.2 建立HL60细胞异种移植瘤裸鼠模型并证明硒具有较为明显的抗癌效果 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-98页 |
| 亚硒酸钠抗癌活力的研究进展(综述) | 第98-111页 |
| 摘要 | 第98页 |
| Abstract | 第98-99页 |
| 1、亚硒酸钠对于肿瘤细胞凋亡的调控作用 | 第99-102页 |
| 1.1 细胞凋亡概述 | 第99-100页 |
| 1.2 亚硒酸钠作用下,肿瘤细胞凋亡的分子机制 | 第100-102页 |
| 2、亚硒酸钠可以通过调控内质网应激过程影响肿瘤存活 | 第102页 |
| 3、亚硒酸钠作用下细胞自噬参与肿瘤细胞命运的调控 | 第102-104页 |
| 3.1 细胞自噬概述 | 第102-103页 |
| 3.2 亚硒酸钠对于细胞自噬的调控方式 | 第103页 |
| 3.3 亚硒酸钠作用下细胞自噬与其他死亡形式相关 | 第103-104页 |
| 4、亚硒酸钠的体内抗肿瘤活性及对耐药细胞的治疗 | 第104页 |
| 5、全文总结 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-111页 |
| 缩略词表 | 第111-112页 |
| 发表论文及参加学术会议情况 | 第112-114页 |
| 发表论文 | 第112-113页 |
| 会议摘要 | 第113页 |
| 获奖情况 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114-116页 |
