| 缩略词表 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-27页 |
| 1.1 PVY的危害 | 第13页 |
| 1.2 PVY的基因组结构 | 第13-14页 |
| 1.3 PVY的株系划分 | 第14-16页 |
| 1.4 PVY的坏死决定簇 | 第16-17页 |
| 1.5 PVY的蚜虫传播 | 第17-19页 |
| 1.6 症状形成 | 第19-20页 |
| 1.7 PVY与PVX的协生作用 | 第20-23页 |
| 1.7.1 协生作用的危害 | 第20-21页 |
| 1.7.2 参与协生作用的病毒基因及机制 | 第21-23页 |
| 1.8 利用交叉保护作用防治植物病毒病 | 第23-26页 |
| 1.8.1 交叉保护作用及机制 | 第23-24页 |
| 1.8.2 交叉保护的应用 | 第24-25页 |
| 1.8.3 影响交叉保护作用的因素和解决方法 | 第25-26页 |
| 1.9 本研究的目的意义 | 第26-27页 |
| 2 实验材料与方法 | 第27-45页 |
| 2.1 试验材料 | 第27页 |
| 2.1.1 供试植物 | 第27页 |
| 2.1.2 菌株、载体 | 第27页 |
| 2.1.3 血清 | 第27页 |
| 2.1.4 引物 | 第27页 |
| 2.1.5 酶与各种生化试剂 | 第27页 |
| 2.1.6 主要实验仪器 | 第27页 |
| 2.2 试验方法 | 第27-45页 |
| 2.2.1 质粒DNA的定点PCR突变 | 第27-32页 |
| 2.2.2. PVYN-605全长cDNA侵染性克隆及其突变体接种 | 第32-34页 |
| 2.2.3 ELISA检测病毒积累量 | 第34-35页 |
| 2.2.4 Western blot分析检测蛋白表达 | 第35-36页 |
| 2.2.5 载体pCaHCwt及pCaHCmut的构建 | 第36-40页 |
| 2.2.6 农杆菌感受态的制备 | 第40-41页 |
| 2.2.7 质粒转化农杆菌 | 第41页 |
| 2.2.8 农杆菌共浸润试验及荧光观察 | 第41-42页 |
| 2.2.9 PVX嵌合载体PVXHC的构建 | 第42-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-73页 |
| 3.1 单位点突变体的症状和在植株中的积累量 | 第45-49页 |
| 3.1.1 症状 | 第45-48页 |
| 3.1.2 病毒积累量 | 第48-49页 |
| 3.2 双位点突变体的症状和病毒积累量 | 第49-54页 |
| 3.2.1 症状 | 第49-52页 |
| 3.2.2 病毒积累量 | 第52-54页 |
| 3.3 三位点及四位点突变体的症状和积累量 | 第54-57页 |
| 3.3.1 症状 | 第54-57页 |
| 3.3.2 病毒积累量 | 第57页 |
| 3.4 多位点突变体的交叉保护效果 | 第57-60页 |
| 3.5 多位点突变体与PVX的协生作用 | 第60-61页 |
| 3.6 PVY HC-Pro参与抑制RNA沉默的氨基酸位点 | 第61-65页 |
| 3.6.1 载体pCAHC的构建 | 第61-62页 |
| 3.6.2 HC-Pro突变体的获得 | 第62页 |
| 3.6.3 PVY HC-Pro抑制RNA沉默活性的瞬时表达体系 | 第62-63页 |
| 3.6.4 突变体对dsRNA诱导的RNA沉默的抑制活性 | 第63-64页 |
| 3.6.5 突变体对ssRNA诱导的RNA沉默的抑制活性 | 第64-65页 |
| 3.7 PVY HC-Pro参与协生作用的关键氨基酸位点 | 第65-73页 |
| 3.7.1 载体PVX-HC的构建 | 第65-66页 |
| 3.7.2 嵌合病毒和PVX在本氏烟上的症状 | 第66-67页 |
| 3.7.3 嵌合病毒和PVX在普通烟NC89上的症状 | 第67-68页 |
| 3.7.4 嵌合病毒和PVX在本氏烟及普通烟NC89中的积累量 | 第68-69页 |
| 3.7.5 弱毒突变体的改造及其与PVX的协生作用 | 第69-71页 |
| 3.7.6 弱毒突变体的交叉保护作用 | 第71-73页 |
| 4 讨论 | 第73-77页 |
| 4.1 弱毒突变体的致病力 | 第73-74页 |
| 4.2 多位点弱毒突变体的交叉保护效果 | 第74-75页 |
| 4.3 多位点弱毒突变体与PVX的协生作用 | 第75-77页 |
| 5 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第88页 |
