摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-8页 |
第1章 绪论 | 第12-38页 |
1.1 程序性细胞死亡 | 第12-16页 |
1.1.1 细胞凋亡 | 第13-15页 |
1.1.2 细胞凋亡路径 | 第15-16页 |
1.2 Bcl-2家族蛋白 | 第16-22页 |
1.2.1 Bcl-2家族蛋白的分类 | 第16-18页 |
1.2.2 Bcl-2家族蛋白与膜作用——模型 | 第18-22页 |
1.3 tBid与细胞凋亡 | 第22-29页 |
1.3.1 tBid蛋白结构——溶液环境 | 第22-24页 |
1.3.2 tBid与线粒体外膜透化 | 第24-25页 |
1.3.3 tBid与溶酶体膜透化 | 第25-28页 |
1.3.4 tBid蛋白膜上构象 | 第28-29页 |
1.4 膜蛋白研究中的单分子技术 | 第29-35页 |
1.4.1 荧光共振能量转移(F?rster resonance energy transfer) | 第29-32页 |
1.4.2 单颗粒追踪技术(single particle tracking) | 第32-33页 |
1.4.3 荧光相关光谱(fluorescence correlation spectroscopy) | 第33-35页 |
1.5 论文选题和出发点 | 第35-38页 |
第2章 实验方法 | 第38-50页 |
2.1 sm-SIFA——基于氧化石墨烯的纵向亚纳米分辨率荧光成像技术 | 第38-41页 |
2.2 实验装置 | 第41-44页 |
2.2.1 实验仪器 | 第41-42页 |
2.2.2 数据采集软件 | 第42页 |
2.2.3 单分子实验用载玻片及盖玻片的清洗步骤 | 第42页 |
2.2.4 石英表面的单层氧化石墨烯沉积 | 第42-43页 |
2.2.5 样品槽的制备 | 第43页 |
2.2.6 氧化石墨烯表面修饰聚乙二醇(PEG) | 第43-44页 |
2.2.7 磷脂单层小囊泡的制备 | 第44页 |
2.3 脂质体染料泄露实验 | 第44-47页 |
2.3.1 利用GUVs的脂质体染料泄露实验 | 第44-45页 |
2.3.2 采用LUVs的脂质体染料泄露实验 | 第45-46页 |
2.3.3 染料泄露率的计算 | 第46-47页 |
2.4 荧光漂白恢复实验 | 第47-50页 |
第3章tBid与GUVs的相互作用 | 第50-62页 |
3.1 引言 | 第50-51页 |
3.2 实验结果及讨论 | 第51-60页 |
3.2.1 tBid在含磷脂酸(PA)的磷脂膜上吸附良好 | 第51-54页 |
3.2.2 GUVs的透化程度依赖tBid蛋白浓度 | 第54-57页 |
3.2.3 GUVs透化机制为tBid在磷脂膜上寡聚成孔 | 第57-60页 |
3.3 结论 | 第60-62页 |
第4章 smSIFA方法研究tBid与磷脂膜相互作用 | 第62-88页 |
4.1 引言 | 第62-63页 |
4.2 sm-SIFA方法的优势 | 第63-64页 |
4.3 sm-SIFA用于细胞凋亡调控蛋白tBid与磷脂膜相互作用的研究 | 第64-86页 |
4.3.1 GO-PEG-lipid bilayer体系可行性验证 | 第64-66页 |
4.3.2 cBid的荧光标记位点设计 | 第66-67页 |
4.3.3 实验结果及讨论 | 第67-84页 |
4.3.4 tBid与磷脂膜相互作用模型 | 第84-86页 |
4.4 结论 | 第86-88页 |
第5章 离子强度对tBid与磷脂膜相互作用的影响 | 第88-94页 |
5.1 引言 | 第88页 |
5.2 实验结果及讨论 | 第88-93页 |
5.2.1 NaCl浓度对tBid BH3结构域与磷脂膜相互作用的影响 | 第88-90页 |
5.2.2 NaCl浓度对tBid H6和H7两α螺旋插膜深度无影响 | 第90-92页 |
5.2.3 NaCl浓度对tBid膜上吸附的影响 | 第92-93页 |
5.3 结论 | 第93-94页 |
第6章 总结与展望 | 第94-100页 |
6.1 主要研究成果 | 第94-96页 |
6.2 论文创新点 | 第96页 |
6.3 进一步研究计划 | 第96-100页 |
参考文献 | 第100-114页 |
个人简历及发表文章目录 | 第114-116页 |
致谢 | 第116-117页 |