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CSFV、HP-PRRSV、PEDV和ASFV等病原GeXP多重检测方法的建立和试剂盒的初步组装

中文摘要第3-5页
Abstract第5-7页
符号说明第8-13页
第一章 引言第13-33页
    1.1 猪瘟病毒的研究进展第13-18页
        1.1.1 猪瘟病毒的病原学特征第14-15页
        1.1.2 猪瘟的流行病学特征第15-16页
        1.1.3 猪瘟的临床症状第16-17页
        1.1.4 猪瘟诊断的研究进展第17-18页
    1.2 高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的研究进展第18-22页
        1.2.1 高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的病原学特征第18-20页
        1.2.2 高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征的流行病学特征第20页
        1.2.3 高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征的临床症状第20-21页
        1.2.4 高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征诊断的研究进展第21-22页
    1.3 猪流行性腹泻病毒的研究进展第22-24页
        1.3.1 猪流行性腹泻病毒的病原学特征第22-23页
        1.3.2 猪流行性腹泻的流行病学特征第23页
        1.3.3 猪流行性腹泻的临床症状第23-24页
        1.3.4 猪流行性腹泻诊断的研究进展第24页
    1.4 非洲猪瘟病毒的研究进展第24-28页
        1.4.1 非洲猪瘟病毒的病原学特征第25-26页
        1.4.2 非洲猪瘟的流行病学特征第26页
        1.4.3 非洲猪瘟的临床症状第26-27页
        1.4.4 非洲猪瘟诊断的研究进展第27-28页
    1.5 GeXP多重基因表达分析系统及其应用第28-32页
        1.5.0 系统的工作原理第28-29页
        1.5.1 系统的优势第29页
        1.5.2 系统在自然科学中的应用第29-32页
        1.5.3 展望第32页
    1.6 本研究的目的意义第32-33页
第二章 CSFV、HP-PRRSV、PEDV及ASFV引物设计及验证第33-56页
    2.1 实验材料第33-34页
        2.1.1 核酸样本第33-34页
        2.1.2 主要试剂及耗材第34页
        2.1.3 试剂配制第34页
        2.1.4 主要仪器第34页
    2.2 实验方法第34-42页
        2.2.1 引物设计与合成第34-35页
        2.2.2 核酸样本RNA和DNA提取第35-37页
        2.2.3 病毒DNA和RNA的PCR/RT-PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳第37-39页
        2.2.4 单病原PCR/RT-PCR的特异性检验第39页
        2.2.5 CSFV、HP-PRRSV和PEDV靶基因RNA标准品的制备第39-42页
        2.2.6 单病原PCR/RT-PCR的敏感度检验第42页
    2.3 结果第42-54页
        2.3.1 单对引物检验实验结果第42-43页
        2.3.2 单病原PCR/RT-PCR的特异性检验第43-47页
        2.3.3 CSFV、HP-PRRSV、PEDV扩增靶基因和pUC57-ASFV质粒的鉴定第47-51页
        2.3.4 单病原PCR/RT-PCR的灵敏度检验第51-54页
    2.4 讨论第54-56页
第三章 CSFV、HP-PRRSV、PEDV及ASFV GeXP多重检测方法的建立第56-70页
    3.1 实验材料第56页
        3.1.1 主要试剂及耗材第56页
        3.1.2 主要仪器第56页
    3.2 实验方法第56-59页
        3.2.1 GeXP引物的设计与合成第56-57页
        3.2.2 GeXP多重检测体系的建立第57-58页
        3.2.3 引物特异性及GeXP单病原灵敏度分析第58-59页
        3.2.4 GeXP多重检测体系多病原灵敏度分析第59页
    3.3 实验结果第59-68页
        3.3.1 GeXP多重检测体系的特异性分析第59-63页
        3.3.2 GeXP单病原的灵敏度分析第63-67页
        3.3.3 GeXP多病原的灵敏度分析第67-68页
    3.4 讨论第68-70页
第四章 GeXP多重检测试剂盒的组装和初步应用第70-83页
    4.1 实验材料第70-71页
        4.1.1 临床样品第70页
        4.1.2 主要试剂及耗材第70页
        4.1.3 主要仪器第70-71页
    4.2 实验方法第71-76页
        4.2.1 GeXP多重检测试剂盒的组装第71页
        4.2.2 临床样品的处理及RNA提取第71页
        4.2.3 临床样品的GeXP多重检测试剂盒检测第71页
        4.2.4 临床样品的RT-PCR/TaqMan RT-PCR诊断标准方法检测第71-75页
        4.2.5 GeXP多重检测试剂盒与RT-PCR/TaqMan RT-PCR诊断标准方法比较第75-76页
    4.3 实验结果第76-82页
        4.3.1 GeXP多重检测试剂盒的组装第76页
        4.3.2 临床样品的GeXP多重检测试剂盒检测结果第76-77页
        4.3.3 临床样品的RT-PCR/TaqMan RT-PCR诊断标准方法检测结果第77-80页
        4.3.4 GeXP多重检测试剂盒与RT-PCR/TaqMan RT-PCR诊断标准检测结果比较第80-82页
    4.4 讨论第82-83页
第五章 全文总结第83-84页
参考文献第84-95页
致谢第95-96页
附录第96-106页
    7.1 CSFV引物设计参考株及序列比对第96-97页
    7.2 HP-PRRSV引物设计参考株及序列比对第97-101页
    7.3 PEDV引物设计参考株及序列比对第101-104页
    7.4 ASFV引物设计参考株及序列比对第104-106页
攻读学位期间发表的学术论文目录第106页

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