中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
符号说明 | 第8-13页 |
第一章 引言 | 第13-33页 |
1.1 猪瘟病毒的研究进展 | 第13-18页 |
1.1.1 猪瘟病毒的病原学特征 | 第14-15页 |
1.1.2 猪瘟的流行病学特征 | 第15-16页 |
1.1.3 猪瘟的临床症状 | 第16-17页 |
1.1.4 猪瘟诊断的研究进展 | 第17-18页 |
1.2 高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的研究进展 | 第18-22页 |
1.2.1 高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的病原学特征 | 第18-20页 |
1.2.2 高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征的流行病学特征 | 第20页 |
1.2.3 高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征的临床症状 | 第20-21页 |
1.2.4 高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征诊断的研究进展 | 第21-22页 |
1.3 猪流行性腹泻病毒的研究进展 | 第22-24页 |
1.3.1 猪流行性腹泻病毒的病原学特征 | 第22-23页 |
1.3.2 猪流行性腹泻的流行病学特征 | 第23页 |
1.3.3 猪流行性腹泻的临床症状 | 第23-24页 |
1.3.4 猪流行性腹泻诊断的研究进展 | 第24页 |
1.4 非洲猪瘟病毒的研究进展 | 第24-28页 |
1.4.1 非洲猪瘟病毒的病原学特征 | 第25-26页 |
1.4.2 非洲猪瘟的流行病学特征 | 第26页 |
1.4.3 非洲猪瘟的临床症状 | 第26-27页 |
1.4.4 非洲猪瘟诊断的研究进展 | 第27-28页 |
1.5 GeXP多重基因表达分析系统及其应用 | 第28-32页 |
1.5.0 系统的工作原理 | 第28-29页 |
1.5.1 系统的优势 | 第29页 |
1.5.2 系统在自然科学中的应用 | 第29-32页 |
1.5.3 展望 | 第32页 |
1.6 本研究的目的意义 | 第32-33页 |
第二章 CSFV、HP-PRRSV、PEDV及ASFV引物设计及验证 | 第33-56页 |
2.1 实验材料 | 第33-34页 |
2.1.1 核酸样本 | 第33-34页 |
2.1.2 主要试剂及耗材 | 第34页 |
2.1.3 试剂配制 | 第34页 |
2.1.4 主要仪器 | 第34页 |
2.2 实验方法 | 第34-42页 |
2.2.1 引物设计与合成 | 第34-35页 |
2.2.2 核酸样本RNA和DNA提取 | 第35-37页 |
2.2.3 病毒DNA和RNA的PCR/RT-PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳 | 第37-39页 |
2.2.4 单病原PCR/RT-PCR的特异性检验 | 第39页 |
2.2.5 CSFV、HP-PRRSV和PEDV靶基因RNA标准品的制备 | 第39-42页 |
2.2.6 单病原PCR/RT-PCR的敏感度检验 | 第42页 |
2.3 结果 | 第42-54页 |
2.3.1 单对引物检验实验结果 | 第42-43页 |
2.3.2 单病原PCR/RT-PCR的特异性检验 | 第43-47页 |
2.3.3 CSFV、HP-PRRSV、PEDV扩增靶基因和pUC57-ASFV质粒的鉴定 | 第47-51页 |
2.3.4 单病原PCR/RT-PCR的灵敏度检验 | 第51-54页 |
2.4 讨论 | 第54-56页 |
第三章 CSFV、HP-PRRSV、PEDV及ASFV GeXP多重检测方法的建立 | 第56-70页 |
3.1 实验材料 | 第56页 |
3.1.1 主要试剂及耗材 | 第56页 |
3.1.2 主要仪器 | 第56页 |
3.2 实验方法 | 第56-59页 |
3.2.1 GeXP引物的设计与合成 | 第56-57页 |
3.2.2 GeXP多重检测体系的建立 | 第57-58页 |
3.2.3 引物特异性及GeXP单病原灵敏度分析 | 第58-59页 |
3.2.4 GeXP多重检测体系多病原灵敏度分析 | 第59页 |
3.3 实验结果 | 第59-68页 |
3.3.1 GeXP多重检测体系的特异性分析 | 第59-63页 |
3.3.2 GeXP单病原的灵敏度分析 | 第63-67页 |
3.3.3 GeXP多病原的灵敏度分析 | 第67-68页 |
3.4 讨论 | 第68-70页 |
第四章 GeXP多重检测试剂盒的组装和初步应用 | 第70-83页 |
4.1 实验材料 | 第70-71页 |
4.1.1 临床样品 | 第70页 |
4.1.2 主要试剂及耗材 | 第70页 |
4.1.3 主要仪器 | 第70-71页 |
4.2 实验方法 | 第71-76页 |
4.2.1 GeXP多重检测试剂盒的组装 | 第71页 |
4.2.2 临床样品的处理及RNA提取 | 第71页 |
4.2.3 临床样品的GeXP多重检测试剂盒检测 | 第71页 |
4.2.4 临床样品的RT-PCR/TaqMan RT-PCR诊断标准方法检测 | 第71-75页 |
4.2.5 GeXP多重检测试剂盒与RT-PCR/TaqMan RT-PCR诊断标准方法比较 | 第75-76页 |
4.3 实验结果 | 第76-82页 |
4.3.1 GeXP多重检测试剂盒的组装 | 第76页 |
4.3.2 临床样品的GeXP多重检测试剂盒检测结果 | 第76-77页 |
4.3.3 临床样品的RT-PCR/TaqMan RT-PCR诊断标准方法检测结果 | 第77-80页 |
4.3.4 GeXP多重检测试剂盒与RT-PCR/TaqMan RT-PCR诊断标准检测结果比较 | 第80-82页 |
4.4 讨论 | 第82-83页 |
第五章 全文总结 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-95页 |
致谢 | 第95-96页 |
附录 | 第96-106页 |
7.1 CSFV引物设计参考株及序列比对 | 第96-97页 |
7.2 HP-PRRSV引物设计参考株及序列比对 | 第97-101页 |
7.3 PEDV引物设计参考株及序列比对 | 第101-104页 |
7.4 ASFV引物设计参考株及序列比对 | 第104-106页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第106页 |