摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-9页 |
第一章 卵子发生与卵泡发育 | 第13-19页 |
1.1 卵母细胞 | 第13-14页 |
1.1.1 卵子发生 | 第13-14页 |
1.2 卵泡发育 | 第14-16页 |
1.2.1 卵泡分类 | 第14-15页 |
1.2.2 卵泡的发育 | 第15-16页 |
1.3 颗粒细胞与卵泡发育 | 第16-19页 |
1.3.1 颗粒细胞凋亡的形态学特征 | 第17页 |
1.3.2 颗粒细胞凋亡与卵泡闭锁的关系 | 第17-19页 |
第二章 RAF-ERK1/2信号通路与类固醇激素分泌 | 第19-27页 |
2.1 RAF-ERK1/2通路 | 第19-21页 |
2.1.1 RAS | 第19页 |
2.1.2 RAF | 第19-20页 |
2.1.3 ERK | 第20-21页 |
2.2 哺乳动物卵泡发育的调控因子 | 第21-26页 |
2.2.1 下丘脑和垂体激素对卵泡发育的调节 | 第21-24页 |
2.2.2 RAF-ERK1/2对类固醇激素合成影响的研究进展 | 第24-26页 |
本研究的目的与意义 | 第26-27页 |
第三章 B-raf与C-raf在卵巢组织中的定位与颗粒细胞的分离鉴定及培养 | 第27-36页 |
3.1 前言 | 第27-28页 |
3.2 试验材料 | 第28-29页 |
3.2.1 牛卵巢的采集 | 第28页 |
3.2.2 主要试剂与仪器设备 | 第28-29页 |
3.3 试验方法 | 第29-31页 |
3.3.1 牛卵巢组织免疫组织化学(IHC) | 第29-30页 |
3.3.2 牛卵巢颗粒细胞分离培养及鉴定 | 第30-31页 |
3.4 结果与分析 | 第31-34页 |
3.4.1 B-raf在牛卵巢组织中的定位 | 第31-32页 |
3.4.2 C-raf在牛卵巢组织中的定位 | 第32-33页 |
3.4.3 牛卵巢颗粒细胞鉴定 | 第33-34页 |
3.5 讨论 | 第34-35页 |
3.6 小结 | 第35-36页 |
第四章 B-raf和C-raf对牛卵巢颗粒细胞类固醇激素分泌的作用 | 第36-47页 |
4.1 前言 | 第36页 |
4.2 试验材料 | 第36-37页 |
4.2.1 牛卵巢的采集 | 第36页 |
4.2.2 主要试剂与仪器设备 | 第36-37页 |
4.3 试验方法 | 第37-41页 |
4.3.1 牛卵巢颗粒细胞分离培养并用GSK2118436抑制剂处理 | 第37页 |
4.3.2 牛卵巢颗粒细胞总RNA的提取 | 第37-38页 |
4.3.3 RNA反转录制备cDNA | 第38页 |
4.3.4 荧光定量PCR检测 | 第38-39页 |
4.3.5 牛卵巢颗粒细胞总蛋白的提取并上样 | 第39-40页 |
4.3.6 Western-Boltting(WB)检测 | 第40-41页 |
4.3.7 ELISA试剂盒检测孕酮、雌二醇和睾酮 | 第41页 |
4.4 统计学分析 | 第41-42页 |
4.5 结果与分析 | 第42-45页 |
4.5.1 抑制剂GSK2118436对通路关键基因表达的影响 | 第42-43页 |
4.5.2 GSK2118436抑制剂对通路关键蛋白表达的影响 | 第43-44页 |
4.5.3 抑制剂GSK2118436对类固醇激素分泌的影响 | 第44-45页 |
4.6 讨论 | 第45-46页 |
4.7 小结 | 第46-47页 |
第五章 ERK1/2对牛卵巢颗粒细胞类固醇激素分泌的作用 | 第47-56页 |
5.1 前言 | 第47页 |
5.2 试验材料 | 第47-48页 |
5.2.1 牛卵巢的采集 | 第47页 |
5.2.2 主要试剂与仪器设备 | 第47-48页 |
5.3 试验方法 | 第48-49页 |
5.3.1 牛卵巢颗粒细胞分离培养并用SCH772984抑制剂处理 | 第48页 |
5.3.2 牛卵巢颗粒细胞总RNA的提取 | 第48页 |
5.3.3 RNA反转录制备cDNA | 第48页 |
5.3.4 荧光定量PCR检测 | 第48页 |
5.3.5 牛卵巢颗粒细胞总蛋白的提取并上样 | 第48页 |
5.3.6 Western-Boltting(WB)检测 | 第48页 |
5.3.7 ELISA试剂盒检测孕酮、雌二醇和睾酮的分泌 | 第48页 |
5.3.8 GSK2118436与SCH772984共同作用对牛卵巢颗粒细胞类固醇激素分泌的影响 | 第48-49页 |
5.4 统计学分析 | 第49页 |
5.5 结果与分析 | 第49-53页 |
5.5.1 抑制剂SCH772984对通路关键基因表达的影响 | 第49-50页 |
5.5.2 SCH772984抑制剂对通路关键蛋白表达的影响 | 第50-51页 |
5.5.3 抑制剂SCH772984对类固醇激素分泌的影响 | 第51-52页 |
5.5.4 GSK2118436与SCH772984共同作用对牛卵巢颗粒细胞类固醇激素分泌的影响 | 第52-53页 |
5.6 讨论 | 第53-54页 |
5.7 小结 | 第54-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简介 | 第64页 |