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RAF-ERK1/2通路对牛卵巢颗粒细胞合成类固醇激素的影响

摘要第5-7页
abstract第7-9页
第一章 卵子发生与卵泡发育第13-19页
    1.1 卵母细胞第13-14页
        1.1.1 卵子发生第13-14页
    1.2 卵泡发育第14-16页
        1.2.1 卵泡分类第14-15页
        1.2.2 卵泡的发育第15-16页
    1.3 颗粒细胞与卵泡发育第16-19页
        1.3.1 颗粒细胞凋亡的形态学特征第17页
        1.3.2 颗粒细胞凋亡与卵泡闭锁的关系第17-19页
第二章 RAF-ERK1/2信号通路与类固醇激素分泌第19-27页
    2.1 RAF-ERK1/2通路第19-21页
        2.1.1 RAS第19页
        2.1.2 RAF第19-20页
        2.1.3 ERK第20-21页
    2.2 哺乳动物卵泡发育的调控因子第21-26页
        2.2.1 下丘脑和垂体激素对卵泡发育的调节第21-24页
        2.2.2 RAF-ERK1/2对类固醇激素合成影响的研究进展第24-26页
    本研究的目的与意义第26-27页
第三章 B-raf与C-raf在卵巢组织中的定位与颗粒细胞的分离鉴定及培养第27-36页
    3.1 前言第27-28页
    3.2 试验材料第28-29页
        3.2.1 牛卵巢的采集第28页
        3.2.2 主要试剂与仪器设备第28-29页
    3.3 试验方法第29-31页
        3.3.1 牛卵巢组织免疫组织化学(IHC)第29-30页
        3.3.2 牛卵巢颗粒细胞分离培养及鉴定第30-31页
    3.4 结果与分析第31-34页
        3.4.1 B-raf在牛卵巢组织中的定位第31-32页
        3.4.2 C-raf在牛卵巢组织中的定位第32-33页
        3.4.3 牛卵巢颗粒细胞鉴定第33-34页
    3.5 讨论第34-35页
    3.6 小结第35-36页
第四章 B-raf和C-raf对牛卵巢颗粒细胞类固醇激素分泌的作用第36-47页
    4.1 前言第36页
    4.2 试验材料第36-37页
        4.2.1 牛卵巢的采集第36页
        4.2.2 主要试剂与仪器设备第36-37页
    4.3 试验方法第37-41页
        4.3.1 牛卵巢颗粒细胞分离培养并用GSK2118436抑制剂处理第37页
        4.3.2 牛卵巢颗粒细胞总RNA的提取第37-38页
        4.3.3 RNA反转录制备cDNA第38页
        4.3.4 荧光定量PCR检测第38-39页
        4.3.5 牛卵巢颗粒细胞总蛋白的提取并上样第39-40页
        4.3.6 Western-Boltting(WB)检测第40-41页
        4.3.7 ELISA试剂盒检测孕酮、雌二醇和睾酮第41页
    4.4 统计学分析第41-42页
    4.5 结果与分析第42-45页
        4.5.1 抑制剂GSK2118436对通路关键基因表达的影响第42-43页
        4.5.2 GSK2118436抑制剂对通路关键蛋白表达的影响第43-44页
        4.5.3 抑制剂GSK2118436对类固醇激素分泌的影响第44-45页
    4.6 讨论第45-46页
    4.7 小结第46-47页
第五章 ERK1/2对牛卵巢颗粒细胞类固醇激素分泌的作用第47-56页
    5.1 前言第47页
    5.2 试验材料第47-48页
        5.2.1 牛卵巢的采集第47页
        5.2.2 主要试剂与仪器设备第47-48页
    5.3 试验方法第48-49页
        5.3.1 牛卵巢颗粒细胞分离培养并用SCH772984抑制剂处理第48页
        5.3.2 牛卵巢颗粒细胞总RNA的提取第48页
        5.3.3 RNA反转录制备cDNA第48页
        5.3.4 荧光定量PCR检测第48页
        5.3.5 牛卵巢颗粒细胞总蛋白的提取并上样第48页
        5.3.6 Western-Boltting(WB)检测第48页
        5.3.7 ELISA试剂盒检测孕酮、雌二醇和睾酮的分泌第48页
        5.3.8 GSK2118436与SCH772984共同作用对牛卵巢颗粒细胞类固醇激素分泌的影响第48-49页
    5.4 统计学分析第49页
    5.5 结果与分析第49-53页
        5.5.1 抑制剂SCH772984对通路关键基因表达的影响第49-50页
        5.5.2 SCH772984抑制剂对通路关键蛋白表达的影响第50-51页
        5.5.3 抑制剂SCH772984对类固醇激素分泌的影响第51-52页
        5.5.4 GSK2118436与SCH772984共同作用对牛卵巢颗粒细胞类固醇激素分泌的影响第52-53页
    5.6 讨论第53-54页
    5.7 小结第54-56页
结论第56-57页
参考文献第57-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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