| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 棉酚的研究进展 | 第10-14页 |
| 1.1.1 棉酚的结构性质 | 第10页 |
| 1.1.2 棉酚的生物学作用 | 第10-11页 |
| 1.1.3 棉酚的毒理学作用 | 第11-14页 |
| 1.2 IL-8的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 IL-8的产生 | 第15页 |
| 1.2.2 IL-8的基因定位及结构 | 第15页 |
| 1.2.3 IL-8的受体结构 | 第15-16页 |
| 1.2.4 IL-8的生物学功能 | 第16-17页 |
| 1.3 基因差异表达方法 | 第17-20页 |
| 第2章 棉酚对多浪羊淋巴细胞IL-8基因表达的影响 | 第20-35页 |
| 2.1 材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第20页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.3 试验仪器 | 第21页 |
| 2.2 方法 | 第21-24页 |
| 2.2.1 多浪羊淋巴细胞的分离 | 第21页 |
| 2.2.2 不同浓度棉酚作用于多浪羊淋巴细胞 | 第21页 |
| 2.2.3 总RNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.4 cDNA的合成 | 第22页 |
| 2.2.5 引物设计 | 第22-23页 |
| 2.2.6 标准曲线的生成 | 第23-24页 |
| 2.2.7 采用2~(－△△~(CT))法分析棉酚对IL-8基因的表达量 | 第24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-32页 |
| 2.3.1 IL-8基因标准曲线结果 | 第24-25页 |
| 2.3.2 GAPDH基因标准曲线结果 | 第25-27页 |
| 2.3.3 2~ (－△△(~CT))法分析棉酚对IL-8基因的表达量结果 | 第27页 |
| 2.3.4 不同时间棉酚作用对IL-8基因表达量的影响 | 第27-30页 |
| 2.3.5 不同浓度棉酚作用对IL-8基因表达量的影响 | 第30-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 2.5 小结 | 第34-35页 |
| 第3章 新疆多浪羊pcDNA3.1-GFP-IL-8真核表达载体的构建与鉴定 | 第35-45页 |
| 3.1 材料 | 第35-36页 |
| 3.1.1 载体、宿主菌及样本 | 第35页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第35页 |
| 3.1.3 试验仪器 | 第35-36页 |
| 3.1.4 引物设计 | 第36页 |
| 3.2 方法 | 第36-40页 |
| 3.2.1 多浪羊淋巴细胞的分离 | 第36页 |
| 3.2.2 总RNA提取、cDNA合成 | 第36页 |
| 3.2.3 IL-8的PCR扩增与纯化 | 第36-37页 |
| 3.2.4 pMD-18T-IL-8重组质粒的转化 | 第37-38页 |
| 3.2.5 重组质粒pMD-18T-IL-8的鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2.6 pcDNA3.1-GFP与IL-8的连接 | 第39页 |
| 3.2.7 pcDNA3.1-GFP-IL-8转化DH5α | 第39页 |
| 3.2.8 PCR法鉴定pcDNA3.1-GFP-IL-8中IL-8片段 | 第39页 |
| 3.2.9 酶切质粒pcDNA3.1-GFP-IL-8鉴定IL-8基因 | 第39-40页 |
| 3.3 结果与分析 | 第40-43页 |
| 3.3.1 总RNA电泳鉴定结果 | 第40页 |
| 3.3.2 IL-8的PCR电泳鉴定结果 | 第40-41页 |
| 3.3.3 重组质粒pMD-18T-IL-8的菌落PCR鉴定结果 | 第41页 |
| 3.3.4 重组质粒pMD-18T-IL-8的酶切鉴定结果 | 第41-42页 |
| 3.3.5 真核表达质粒pcDNA3.1-GFP-IL-8PCR鉴定结果 | 第42页 |
| 3.3.6 真核表达质粒pcDNA3.1-GFP-IL-8酶切鉴定结果 | 第42-43页 |
| 3.3.7 真核表达质粒pcDNA3.1-GFP-IL-8酶切产物DNA序列测定结果 | 第43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-44页 |
| 3.5 小结 | 第44-45页 |
| 第4章 棉酚对多浪羊淋巴细胞IL-8的表达影响研究 | 第45-70页 |
| 4.1 材料 | 第45-46页 |
| 4.1.1 试验试剂 | 第45页 |
| 4.1.2 试验仪器 | 第45-46页 |
| 4.1.3 试验溶液的配制 | 第46页 |
| 4.2 方法 | 第46-50页 |
| 4.2.1 脂质体法转染pcDNA3.1-GFP、pcDNA3.1-GFP-IL-8至淋巴细胞 | 第46页 |
| 4.2.2 实时荧光定量PCR检测六种处理IL-8的基因表达 | 第46-47页 |
| 4.2.3 Westernblotting检测六种处理IL-8的蛋白表达 | 第47-50页 |
| 4.3 结果与分析 | 第50-67页 |
| 4.3.1 脂质体法转染pcDNA3.1-GFP、pcDNA3.1-GFP-IL-8至淋巴细胞的镜检图与分析 | 第50-53页 |
| 4.3.2 实时荧光定量PCR检测六种处理IL-8的基因表达结果分析 | 第53-65页 |
| 4.3.3 Westernblotting检测六种处理IL-8的蛋白电泳结果 | 第65-67页 |
| 4.4 讨论 | 第67-68页 |
| 4.5 小结 | 第68-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79页 |
