摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
1 引言 | 第11-28页 |
1.1 苏云金芽孢杆菌简介 | 第11页 |
1.2 苏云金芽孢杆菌的生物学特性及其分布 | 第11-12页 |
1.3 苏云金芽孢杆菌的分离 | 第12-13页 |
1.4 苏云金芽孢杆菌的杀虫毒素 | 第13-14页 |
1.4.1 苏云金芽孢杆菌杀虫毒素的分类 | 第13页 |
1.4.2 苏云金芽孢杆菌杀虫毒素的结构及其功能 | 第13-14页 |
1.4.3 苏云金芽孢杆菌毒素的杀虫作用机制 | 第14页 |
1.5 苏云金芽孢杆菌的杀虫基因 | 第14-18页 |
1.5.1 苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因的分类及命名 | 第14-16页 |
1.5.2 苏云金芽孢杆菌基因的鉴定方法 | 第16-18页 |
1.6 苏云金芽胞杆菌杀虫基因与生物活性之间的关系 | 第18-26页 |
1.7 苏云金芽孢杆菌在转基因植物中的应用与发展 | 第26-27页 |
1.8 本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
2 材料与方法 | 第28-41页 |
2.1 实验材料 | 第28-32页 |
2.1.1 土壤样品 | 第28页 |
2.1.2 培养基 | 第28-29页 |
2.1.3 引物序列 | 第29-30页 |
2.1.4 主要使用试剂 | 第30-32页 |
2.1.5 所使用仪器设备 | 第32页 |
2.1.6 供试昆虫 | 第32页 |
2.2 研究方法 | 第32-41页 |
2.2.1 采用温度-抗生素法筛选苏云金芽孢杆菌 | 第32页 |
2.2.2 模板制备 | 第32-33页 |
2.2.3 PCR 反应体系及程序 | 第33-34页 |
2.2.4 酶切分析 | 第34页 |
2.2.5 PCR-RFLP 鉴定体系 | 第34-37页 |
2.2.6 DNA 回收 | 第37-38页 |
2.2.7 连接反应 | 第38页 |
2.2.8 转化反应 | 第38页 |
2.2.9 重组质粒的筛选和鉴定 | 第38-39页 |
2.2.10 序列测定及分析 | 第39页 |
2.2.11 SDS-PAGE 蛋白电泳分析 | 第39页 |
2.2.12 苏云金芽孢杆菌生物活性测定 | 第39-41页 |
3 结果与分析 | 第41-72页 |
3.1 菌株分离结果 | 第41-42页 |
3.2 菌株镜检观察结果 | 第42-46页 |
3.3 基因型鉴定 | 第46-55页 |
3.4 新基因的鉴定与克隆 | 第55-64页 |
3.4.1 菌株TDM-19 的鉴定及部分序列的克隆 | 第55-57页 |
3.4.2 菌株FB-32 中全长基因的克隆 | 第57-64页 |
3.5 生物活性测定 | 第64-72页 |
3.5.1 对鳞翅目昆虫的生物活性测定 | 第64-68页 |
3.5.2 对鞘翅目昆虫的生物活性测定 | 第68-72页 |
4 讨论 | 第72-74页 |
5 结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
在读期间发表论文 | 第82页 |