致谢 | 第8-10页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-14页 |
1 文献综述 | 第15-35页 |
1.1 植物对磷的吸收利用以及缺磷胁迫响应 | 第16-18页 |
1.1.1 植物对磷的吸收、转运和储存 | 第16页 |
1.1.2 缺磷胁迫下植物的生理生化响应 | 第16-18页 |
1.1.2.1 植物根构型的缺磷适应性变化 | 第16-17页 |
1.1.2.2 增加对外界环境中磷的吸收 | 第17-18页 |
1.1.2.3 调控体内磷的利用和分配 | 第18页 |
1.2 以PHR1为中心的植物磷信号途径 | 第18-23页 |
1.2.1 关键转录因子——PHR1/PHL1/OsPHR2 | 第19-21页 |
1.2.2 非编码RNA和miRNA | 第21-23页 |
1.2.2.1 miR399与At4/IPS1 | 第21-22页 |
1.2.2.2 miR827 | 第22-23页 |
1.3 植物磷信号调控途径中的泛素化作用 | 第23-31页 |
1.3.1 蛋白的泛素化过程 | 第23-24页 |
1.3.2 植物磷信号途径中的泛素-蛋白酶体系统成员及功能 | 第24-30页 |
类泛素化作用——SIZ1 | 第27页 |
调控植物体内硝酸根依赖的磷稳态——NLA | 第27-28页 |
作为缺磷响应负调控因子的E3泛素连接酶——FBX2 | 第28页 |
磷饥饿信号与生长素信号网络的交叉——TIR1 | 第28-29页 |
去泛素化酶——UBP14 | 第29页 |
其他缺磷响应UPS成员分析 | 第29-30页 |
1.3.3 植物PHO2蛋白 | 第30-31页 |
1.3.3.1 PHO2对植物吸收磷及维持体内磷稳态的调控 | 第30-31页 |
1.3.3.2 PHO2蛋白其他功能的研究 | 第31页 |
1.4 GIGANTEA蛋白功能 | 第31-34页 |
1.4.1 受节律调控表达的GIGANTEA蛋白是控制开花的关键因子 | 第31-33页 |
1.4.2 GI蛋白其他功能的研究 | 第33-34页 |
1.5 本研究的目的意义及主要内容 | 第34-35页 |
2 水稻PHO2和GIGANTEA蛋白互作的功能分析 | 第35-52页 |
2.1 材料与方法 | 第35-42页 |
2.1.1 实验材料 | 第35-36页 |
2.1.2 酵母双杂体系筛选OsPHO2互作蛋白 | 第36页 |
2.1.3 亚细胞定位YFP融合表达载体和双分子荧光互补实验(BiFC)载体的构建 | 第36-38页 |
2.1.4 基因枪轰击洋葱表皮细胞 | 第38-40页 |
2.1.5 水稻(新鲜组织)原生质体的分离和转化 | 第40-41页 |
2.1.6 水稻生长条件 | 第41-42页 |
2.1.7 水稻植株的无机磷含量测定 | 第42页 |
2.2 结果与分析 | 第42-50页 |
2.2.1 水稻PHO2和GIGANTEA蛋白的互作证据 | 第42-46页 |
2.2.2 水稻pho2和gi突变体的生长表型和开花时间 | 第46-48页 |
2.2.3 水稻pho2以和gi突变体的磷积累情况 | 第48-50页 |
2.3 小结和讨论 | 第50-52页 |
3 水稻PHO2与OsCPl和OsCP2蛋白的互作分析 | 第52-73页 |
3.1 材料与方法 | 第52-61页 |
3.1.1 实验材料 | 第52-53页 |
3.1.2 酵母双杂载体的构建 | 第53页 |
3.1.3 酵母感受态的制备和转化,以及酵母双杂试验 | 第53-56页 |
3.1.4 GFP融合表达载体和BiFC载体的构建 | 第56页 |
3.1.5 基因枪轰击洋葱表皮细胞,水稻原生质体的分离和转化 | 第56页 |
3.1.6 OsCP1和OsCP2超表达载体及RNAi干涉载体的构建 | 第56-57页 |
3.1.7 农杆菌介导的水稻成熟胚愈伤组织转基因 | 第57-58页 |
3.1.8 水稻转基因植株的鉴定 | 第58-59页 |
3.1.9 植物总RNA的提取和纯化,cDNA的合成 | 第59-60页 |
3.1.10 半定量RT-PCR和实时定量qRT-PCR | 第60-61页 |
3.2 结果与分析 | 第61-72页 |
3.2.1 OsPHO2与OsCP1和OsCP2蛋白的互作证据 | 第61-66页 |
3.2.2 OsCP1超表达以及RNAi干涉植株表型的初步分析 | 第66-72页 |
3.3 小结和讨论 | 第72-73页 |
4 结论与展望 | 第73-75页 |
5 参考文献 | 第75-83页 |
6 附录— 水稻铁相关转录因子IRO3和bHLH133上游调控分析 | 第83-89页 |
Reference | 第88-89页 |
7 攻读博士期间的科研成果 | 第89页 |