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水稻磷信号重要因子OsPHO2的互作蛋白的鉴定和功能分析

致谢第8-10页
缩略语表第10-11页
摘要第11-13页
Abstract第13-14页
1 文献综述第15-35页
    1.1 植物对磷的吸收利用以及缺磷胁迫响应第16-18页
        1.1.1 植物对磷的吸收、转运和储存第16页
        1.1.2 缺磷胁迫下植物的生理生化响应第16-18页
            1.1.2.1 植物根构型的缺磷适应性变化第16-17页
            1.1.2.2 增加对外界环境中磷的吸收第17-18页
            1.1.2.3 调控体内磷的利用和分配第18页
    1.2 以PHR1为中心的植物磷信号途径第18-23页
        1.2.1 关键转录因子——PHR1/PHL1/OsPHR2第19-21页
        1.2.2 非编码RNA和miRNA第21-23页
            1.2.2.1 miR399与At4/IPS1第21-22页
            1.2.2.2 miR827第22-23页
    1.3 植物磷信号调控途径中的泛素化作用第23-31页
        1.3.1 蛋白的泛素化过程第23-24页
        1.3.2 植物磷信号途径中的泛素-蛋白酶体系统成员及功能第24-30页
            类泛素化作用——SIZ1第27页
            调控植物体内硝酸根依赖的磷稳态——NLA第27-28页
            作为缺磷响应负调控因子的E3泛素连接酶——FBX2第28页
            磷饥饿信号与生长素信号网络的交叉——TIR1第28-29页
            去泛素化酶——UBP14第29页
            其他缺磷响应UPS成员分析第29-30页
        1.3.3 植物PHO2蛋白第30-31页
            1.3.3.1 PHO2对植物吸收磷及维持体内磷稳态的调控第30-31页
            1.3.3.2 PHO2蛋白其他功能的研究第31页
    1.4 GIGANTEA蛋白功能第31-34页
        1.4.1 受节律调控表达的GIGANTEA蛋白是控制开花的关键因子第31-33页
        1.4.2 GI蛋白其他功能的研究第33-34页
    1.5 本研究的目的意义及主要内容第34-35页
2 水稻PHO2和GIGANTEA蛋白互作的功能分析第35-52页
    2.1 材料与方法第35-42页
        2.1.1 实验材料第35-36页
        2.1.2 酵母双杂体系筛选OsPHO2互作蛋白第36页
        2.1.3 亚细胞定位YFP融合表达载体和双分子荧光互补实验(BiFC)载体的构建第36-38页
        2.1.4 基因枪轰击洋葱表皮细胞第38-40页
        2.1.5 水稻(新鲜组织)原生质体的分离和转化第40-41页
        2.1.6 水稻生长条件第41-42页
        2.1.7 水稻植株的无机磷含量测定第42页
    2.2 结果与分析第42-50页
        2.2.1 水稻PHO2和GIGANTEA蛋白的互作证据第42-46页
        2.2.2 水稻pho2和gi突变体的生长表型和开花时间第46-48页
        2.2.3 水稻pho2以和gi突变体的磷积累情况第48-50页
    2.3 小结和讨论第50-52页
3 水稻PHO2与OsCPl和OsCP2蛋白的互作分析第52-73页
    3.1 材料与方法第52-61页
        3.1.1 实验材料第52-53页
        3.1.2 酵母双杂载体的构建第53页
        3.1.3 酵母感受态的制备和转化,以及酵母双杂试验第53-56页
        3.1.4 GFP融合表达载体和BiFC载体的构建第56页
        3.1.5 基因枪轰击洋葱表皮细胞,水稻原生质体的分离和转化第56页
        3.1.6 OsCP1和OsCP2超表达载体及RNAi干涉载体的构建第56-57页
        3.1.7 农杆菌介导的水稻成熟胚愈伤组织转基因第57-58页
        3.1.8 水稻转基因植株的鉴定第58-59页
        3.1.9 植物总RNA的提取和纯化,cDNA的合成第59-60页
        3.1.10 半定量RT-PCR和实时定量qRT-PCR第60-61页
    3.2 结果与分析第61-72页
        3.2.1 OsPHO2与OsCP1和OsCP2蛋白的互作证据第61-66页
        3.2.2 OsCP1超表达以及RNAi干涉植株表型的初步分析第66-72页
    3.3 小结和讨论第72-73页
4 结论与展望第73-75页
5 参考文献第75-83页
6 附录— 水稻铁相关转录因子IRO3和bHLH133上游调控分析第83-89页
    Reference第88-89页
7 攻读博士期间的科研成果第89页

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