| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1.1 铜离子的危害 | 第12页 |
| 1.2 铜污染的来源 | 第12-13页 |
| 1.3 重金属污染的修复 | 第13-16页 |
| 1.3.1 物理化学修复 | 第13页 |
| 1.3.2 植物修复 | 第13-14页 |
| 1.3.3 植物-微生物联合修复 | 第14-15页 |
| 1.3.4 根瘤菌-豆科植物联合修复 | 第15-16页 |
| 1.4 微生物的抗铜机制 | 第16-22页 |
| 1.4.1 cop 系统 | 第16-17页 |
| 1.4.2 Cus 系统 | 第17-19页 |
| 1.4.3 Cue 系统 | 第19-20页 |
| 1.4.4 Pco 系统 | 第20-21页 |
| 1.4.5 抗铜基因调节系统 | 第21-22页 |
| 1.5 cDNA-AFLP 技术 | 第22-23页 |
| 1.5.1 cDNA-AFLP 原理 | 第22页 |
| 1.5.2 cDNA-AFLP 流程及优点 | 第22-23页 |
| 1.6 研究内容及技术路线 | 第23-25页 |
| 1.6.1 研究内容 | 第23-24页 |
| 1.6.2 技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 铜诱导下 CCNWSX0020 差异基因分析 | 第25-60页 |
| 2.1 前言 | 第25页 |
| 2.2 材料与方法 | 第25-38页 |
| 2.2.1 材料 | 第25-29页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第29-38页 |
| 2.3 结果 | 第38-56页 |
| 2.3.1 细菌总 RNA 的提取 | 第38-39页 |
| 2.3.2 总 RNA 质量检测 | 第39-40页 |
| 2.3.3 cDNA 第一链检测 | 第40页 |
| 2.3.4 cDNA 双链合成 | 第40-41页 |
| 2.3.5 选择性扩增 | 第41-42页 |
| 2.3.6 PAGE 凝胶电泳 | 第42页 |
| 2.3.7 差异条带回收测序及分析 | 第42-51页 |
| 2.3.8 不同重金属离子胁迫下 omp 上下游基因表达分析 | 第51-53页 |
| 2.3.9 MerR-like 调控基因的检测 | 第53-54页 |
| 2.3.10 P-type ATPase 序列分析 | 第54-56页 |
| 2.4 讨论 | 第56-60页 |
| 第三章 omp 基因敲除及功能互补 | 第60-77页 |
| 3.1 引言 | 第60页 |
| 3.2 材料与方法 | 第60-71页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第60-63页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第63-71页 |
| 3.3 结果与分析 | 第71-75页 |
| 3.3.1 PK18mobsacB 正确性验证 | 第71页 |
| 3.3.2 omp 及卡那霉素基因插入 pGEM-T easy | 第71-72页 |
| 3.3.3 omp 基因插入失活 | 第72页 |
| 3.3.4 omp 基因敲除载体构建及突变体筛选 | 第72-73页 |
| 3.3.5 突变体对 Cu~(2+)的最大抗性 | 第73-74页 |
| 3.3.6 突变体对其它金属离子的抗性变化 | 第74页 |
| 3.3.7 突变体互补实验 | 第74-75页 |
| 3.4 讨论 | 第75-77页 |
| 第四章 铜诱导下菌体抗氧化酶及代谢物分析 | 第77-86页 |
| 4.1 引言 | 第77页 |
| 4.2 材料与方法 | 第77-80页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第77-78页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第78-80页 |
| 4.3 实验结果 | 第80-84页 |
| 4.3.1 突变体 IAA 含量的测定 | 第80页 |
| 4.3.2 CCNWSX0020 抗氧化酶的测定 | 第80-81页 |
| 4.3.3 CCNWSX0020 代谢物的测定 | 第81-84页 |
| 4.4 讨论 | 第84-86页 |
| 第五章 S. meliloti CCNWSX0020 全基因测序 | 第86-97页 |
| 5.1 引言 | 第86页 |
| 5.2 材料与方法 | 第86-87页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第86页 |
| 5.2.2 实验方法 | 第86-87页 |
| 5.3 实验结果 | 第87-93页 |
| 5.3.1 基因组特性 | 第87页 |
| 5.3.2 重金属抗性 | 第87-91页 |
| 5.3.3 CCNWSX0020 中促进植物生长的基因 | 第91-92页 |
| 5.3.4 抗氧化系统 | 第92-93页 |
| 5.4 讨论 | 第93-97页 |
| 第六章 结论与展望 | 第97-99页 |
| 6.1 结论 | 第97-98页 |
| 6.1.1 S. meliloti CCNWSX0020 细胞 RNA 提取方法建立 | 第97页 |
| 6.1.2 铜诱导下差异 DNA 片段分析 | 第97页 |
| 6.1.3 omp 基因敲除 | 第97页 |
| 6.1.4 功能互补实验 | 第97页 |
| 6.1.5 野生型与突变体代谢物分析 | 第97-98页 |
| 6.1.6 全基因组测序及分析验证 | 第98页 |
| 6.2 创新点 | 第98页 |
| 6.3 展望 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-112页 |
| 附录一 | 第112-113页 |
| 附录二 | 第113-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 作者简介 | 第117页 |
| 博士期间发表的论文及科研情况 | 第117页 |
