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半滑舌鳎性别相关基因DAZL和WT1a的克隆与表达分析

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
第一章 前言第13-28页
    1 鱼类的生殖发育过程第13-18页
        1.1 鱼类生殖细胞的发育第13-15页
        1.2 性腺的分化第15-18页
            1.2.1 雌雄异体性腺的分化第15-17页
            1.2.2 雌雄同体或雌雄间性以及性别稳定性第17-18页
    2 鱼类性别决定系统第18-24页
        2.1 遗传性别的鉴定第18-19页
        2.2 多基因控制的性别决定第19-24页
            2.2.1 鱼类的性别比例第20-22页
            2.2.2 鱼类中的性逆转第22-24页
    3 DAZL基因和WT1a基因的结构及性别相关研究进展第24-26页
        3.1 DAZL基因的结构及性别相关研究进展第24-25页
        3.2 WT1a基因的结构及性别相关研究进展第25-26页
    4 本研究的目的和意义第26-28页
第二章 性别鉴定及性腺分化早期的组织学观察第28-41页
    1 实验材料和试剂第28-31页
        1.1 实验材料及处理方法第28-29页
        1.2 实验所用主要试剂及试剂的配制第29-31页
    2 实验方法第31-34页
        2.1 遗传性别第31-33页
            2.1.1 基因组DNA的提取第31-32页
            2.1.2 PCR反应第32页
            2.1.3 聚丙烯酰胺凝胶的制备及电泳第32-33页
            2.1.4 银染第33页
        2.2 生理性别的鉴定及性腺分化早期的组织学观察第33-34页
    3 实验结果第34-39页
        3.1 遗传性别鉴定结果第34-36页
        3.2 生理性别鉴定结果第36-37页
        3.3 性别分化早期的组织学观察第37-39页
    4 讨论第39-41页
        4.1 遗传性别鉴定第39页
        4.2 生理性别鉴定第39页
        4.3 性别分化早期第39-41页
第三章 半滑舌鳎DAZL基因的克隆及表达分析第41-66页
    1 实验材料和试剂第41-42页
        1.1 实验材料第41-42页
        1.2 耗材和试剂第42页
    2 实验方法第42-53页
        2.1 总RNA的提取、cDNA的合成以及仔鱼性腺部位的获得第42-45页
            2.1.1 总RNA的提取第42-43页
            2.1.2 cDNA的合成第43-44页
            2.1.3 仔鱼性腺部位的获得第44-45页
            2.1.4 仔鱼伪雄鱼的鉴定第45页
        2.2 半滑舌鳎DAZL基因的全长cDNA克隆及序列分析第45-52页
            2.2.1 DAZL基因全长cDNA克隆第45-51页
            2.2.2 巢式PCR验证序列第51-52页
            2.2.3 序列分析第52页
        2.3 荧光实时定量PCR第52-53页
    3 实验结果第53-64页
        3.1 RNA提取和仔鱼性腺部位精确获取结果第53-55页
        3.2 半滑舌鳎DAZL基因序列分析第55-60页
            3.2.1 半滑舌鳎DAZL基因序列特征及其编码的蛋白结构分析第55-57页
            3.2.2 DAZL基因同源性分析第57-60页
        3.3 荧光实时定量PCR第60-64页
            3.3.1 DAZL基因在半滑舌鳎胚胎发育各时期的表达第60-61页
            3.3.2 DAZL基因在半滑舌鳎仔鱼性腺中的表达第61页
            3.3.3 DAZL基因在半滑舌鳎各组织中的表达第61-64页
    4 讨论第64-66页
第四章 半滑舌鳎WT1a基因的克隆及表达分析第66-81页
    1 实验材料和试剂第66-67页
        1.1 实验材料第66页
        1.2 试剂第66-67页
    2 实验方法第67-68页
        2.1 DNA和总RNA的提取、cDNA的合成以及仔鱼性腺部位的获得第67页
        2.2 半滑舌鳎WT1a基因的全长cDNA克隆及序列分析第67-68页
            2.2.1 WT1a基因全长cDNA克隆与验证第67-68页
            2.2.2 序列分析第68页
        2.3 荧光实时定量PCR第68页
    3 实验结果第68-77页
        3.1 半滑舌鳎 WT1a 基因序列特征及其编码的蛋白结构分析第68-71页
        3.2 WT1a 基因同源性分析第71-73页
        3.3 荧光实时定量PCR第73-77页
            3.3.1 WT1a基因在半滑舌鳎胚胎发育各时期的表达第73-74页
            3.3.2 WT1a基因在半滑舌鳎仔鱼性腺中的表达第74-75页
            3.3.3 WT1a基因在半滑舌鳎各组织中的表达第75-77页
    4 跨膜螺旋区域的验证第77-78页
    5 讨论第78-81页
        5.1 WT1 基因的结构分析第78-79页
        5.2 WT1 基因荧光实时定量表达第79-81页
第五章 小结第81-82页
参考文献第82-91页
致谢第91-92页
个人简历第92页
发表的学术论文第92-93页

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