摘要 | 第4页 |
Abstract | 第4页 |
缩略语表 | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第8-17页 |
1.1 猪的卵母细胞和早期胚胎发育过程 | 第8-9页 |
1.1.1 猪的早期胚胎发育 | 第8页 |
1.1.2 猪的卵子发生和卵泡发育 | 第8-9页 |
1.2 microRNA概述 | 第9-15页 |
1.2.1 miRNA的生成过程 | 第10-11页 |
1.2.2 miRNA的发现与鉴定方法 | 第11-13页 |
1.2.3 卵母细胞成熟和早期胚胎发育过程中miRNA的动态变化 | 第13-14页 |
1.2.4 miRNA与重编程 | 第14页 |
1.2.5 猪miRNA的研究进展 | 第14-15页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第15-17页 |
2 材料与方法 | 第17-22页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第17-18页 |
2.1.1 实验材料 | 第17页 |
2.1.2 主要实验试剂的配制 | 第17-18页 |
2.2 实验方法 | 第18-22页 |
2.2.1 GV期卵丘-卵母细胞复合物的采集 | 第18页 |
2.2.2 COCs的体外培养 | 第18页 |
2.2.3 孤雌激活和孤雌胚胎的培养 | 第18页 |
2.2.4 卵母细胞体外受精及IVF胚胎的培养 | 第18-19页 |
2.2.5 猪胎儿成纤维细胞的培养 | 第19页 |
2.2.6 体细胞核移植 | 第19页 |
2.2.7 总RNA的提取 | 第19页 |
2.2.8 样品的Solexa测序 | 第19-20页 |
2.2.9 miRNA的qRT-PCR | 第20-21页 |
2.2.10 miRNA显微注射 | 第21-22页 |
3 结果与分析 | 第22-36页 |
3.1 测序结果总览及Q-PCR验证 | 第22-27页 |
3.2 miRNA在卵母细胞成熟过程中的作用 | 第27-31页 |
3.3 miRNA在4细胞胚胎与MII卵母细胞间的差异表达分析 | 第31-32页 |
3.4 囊胚与4细胞胚胎的miRNA差异表达分析 | 第32-36页 |
4 讨论和结论 | 第36-39页 |
4.1 猪卵母细胞成熟过程中miRNA的表达谱分析 | 第36-37页 |
4.2 猪早期庇胎发育过程中miRNA的表达谱分析 | 第37-38页 |
4.3 猪IVF、PA、NT巧胎中miRNA的表达谱分析 | 第38-39页 |
全文结论 | 第39-40页 |
本研究的创新点 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
附录 | 第47-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51页 |