| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-26页 |
| 1.1 雷公藤甲素及其药理活性 | 第13-17页 |
| 1.1.1 雷公藤甲素的抗肿瘤活性 | 第13-16页 |
| 1.1.2 雷公藤甲素的其它药理活性 | 第16-17页 |
| 1.2 雷公藤甲素衍生物及其构效关系 | 第17-18页 |
| 1.3 雷公藤甲素的抗肿瘤机制 | 第18-23页 |
| 1.3.1 雷公藤甲素能够激活p53通路 | 第18-19页 |
| 1.3.2 雷公藤甲素能够抑制NF-κB的活化 | 第19-20页 |
| 1.3.3 雷公藤甲素作用于RNA聚合酶II及转录起始复合体从而抑制基因转录 | 第20-22页 |
| 1.3.4 雷公藤甲素的其它作用机制 | 第22-23页 |
| 1.4 雷公藤甲素与细胞自噬 | 第23-24页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第24-26页 |
| 第二章 雷公藤甲素诱导HPV阳性肿瘤细胞凋亡的分子机制研究 | 第26-50页 |
| 前言 | 第26-27页 |
| 2.1 仪器 | 第27页 |
| 2.2 材料 | 第27-28页 |
| 2.2.1 细胞系 | 第27页 |
| 2.2.2 试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.3 小干扰RNA和引物 | 第28页 |
| 2.3 研究方法 | 第28-32页 |
| 2.3.1 细胞生长曲线测定 | 第28-29页 |
| 2.3.2 细胞活力实验 | 第29页 |
| 2.3.3 划痕愈合实验 | 第29页 |
| 2.3.4 克隆形成实验 | 第29页 |
| 2.3.5 放疗增敏实验 | 第29页 |
| 2.3.6 凋亡检测 | 第29-30页 |
| 2.3.7 RNA提取 | 第30页 |
| 2.3.8 实时定量PCR | 第30-31页 |
| 2.3.9 免疫印迹实验(Western Blot) | 第31页 |
| 2.3.10免疫沉淀实验 | 第31页 |
| 2.3.11免疫荧光实验 | 第31页 |
| 2.3.12数据处理 | 第31-32页 |
| 2.4 结果分析 | 第32-45页 |
| 2.4.1 雷公藤甲素抑制喉癌细胞的增殖、迁移及细胞存活 | 第32-34页 |
| 2.4.2 雷公藤甲素诱导HPV18阳性肿瘤细胞发生凋亡 | 第34-35页 |
| 2.4.3 雷公藤甲素具有放疗增敏作用 | 第35-36页 |
| 2.4.4 雷公藤甲素导致HEp-2 细胞中p53蛋白的表达上调 | 第36-38页 |
| 2.4.5 雷公藤甲素促进p53的转录并抑制p53的泛素化降解 | 第38-40页 |
| 2.4.6 雷公藤甲素影响多个p53靶基因的表达 | 第40-42页 |
| 2.4.7 雷公藤甲素诱导HEp-2 细胞发生DNA损伤，进而促进p53的转录上调 | 第42-43页 |
| 2.4.8 p53和caspase蛋白在雷公藤甲素抗肿瘤活性中的作用 | 第43-45页 |
| 2.5 讨论 | 第45-50页 |
| 第三章 雷公藤甲素诱导肿瘤细胞自噬的分子机制研究 | 第50-81页 |
| 前言 | 第50页 |
| 3.1 仪器 | 第50-51页 |
| 3.2 实验材料 | 第51-52页 |
| 3.2.1 细胞系 | 第51页 |
| 3.2.2 试剂 | 第51-52页 |
| 3.2.3 小干扰RNA | 第52页 |
| 3.3 研究方法 | 第52-55页 |
| 3.3.1 免疫印迹实验(Western Blot) | 第52-53页 |
| 3.3.2 RNA提取及XBP1切割实验 | 第53页 |
| 3.3.3 自噬小体的荧光显微观察 | 第53页 |
| 3.3.4 用透射电子显微镜观察自噬小体及内质网 | 第53页 |
| 3.3.5 细胞质中钙离子浓度的检测 | 第53-54页 |
| 3.3.6 基因芯片实验 | 第54页 |
| 3.3.7 细胞活力实验 | 第54页 |
| 3.3.8 裸鼠移植瘤实验 | 第54页 |
| 3.3.9 免疫组化染色实验 | 第54-55页 |
| 3.3.10数据处理 | 第55页 |
| 3.4 结果分析 | 第55-76页 |
| 3.4.1 雷公藤甲素能诱导肿瘤细胞自噬 | 第55-59页 |
| 3.4.2 雷公藤甲素通过抑制mTORC1复合体，以及激活ULK1复合体和Class IIIPI3K复合体来诱导肿瘤细胞自噬 | 第59-62页 |
| 3.4.3 AMPK参与雷公藤甲素诱导的肿瘤细胞自噬 | 第62-64页 |
| 3.4.4 雷公藤甲素诱导的AMPK活化和细胞自噬不依赖于LKB1 | 第64-65页 |
| 3.4.5 雷公藤甲素通过上调细胞质中钙离子浓度，进而激活CaMKKβ-AMPK通路诱导肿瘤细胞自噬 | 第65-68页 |
| 3.4.6 雷公藤甲素诱导的胞质钙离子浓度上升及CaMKKβ-AMPK通路活化依赖于内质网应激介导的钙释放 | 第68-71页 |
| 3.4.7 雷公藤甲素可能通过抑制细胞的整体泛素化修饰水平及分子伴侣蛋白的表达来诱导内质网应激反应 | 第71-74页 |
| 3.4.8 抑制自噬能够增强雷公藤甲素的抗肿瘤作用 | 第74-76页 |
| 3.5 讨论 | 第76-81页 |
| 结论 | 第81-82页 |
| 创新点 | 第82-83页 |
| 展望 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-96页 |
| 缩略词及中英文对照 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 个人简介 | 第98页 |
