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猪CyclinA基因的克隆及其功能的初步研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-10页
文献综述第10-23页
 第一章 细胞周期以及病毒感染对细胞周期调控的研究进展第10-23页
   ·细胞周期相关研究进展第11-17页
     ·细胞周期概述第11页
     ·细胞周期调控因子概述第11-14页
     ·细胞周期的级联调控网络第14-16页
     ·细胞周期检验点第16-17页
     ·细胞周期蛋白A第17页
   ·病毒感染对细胞周期调控的研究第17-23页
     ·病毒编码的细胞周期蛋白对宿主细胞周期的影响第17-18页
     ·病毒编码的致瘤蛋白对细胞周期的作用第18-20页
     ·病毒蛋白对细胞周期检验点的调控第20-21页
     ·病毒蛋白调控细胞周期的其他途径第21页
     ·病毒感染对CyclinA 基因的影响第21-23页
试验研究第23-53页
 第二章 猪CyclinA 基因的克隆及其序列分析第23-35页
   ·材料第23-24页
     ·细胞株、菌株及载体第23页
     ·主要工具酶、试剂及耗材第23页
     ·主要仪器设备第23-24页
     ·主要试剂及溶液配制第24页
   ·方法与步骤第24-28页
     ·猪血管内皮细胞的复苏与培养第24页
     ·猪CyclinA 基因的电子克隆第24页
     ·猪CyclinA 基因的分子克隆第24-28页
     ·CyclinA 基因序列测定与结果分析第28页
     ·CyclinA 基因序列结构与生物信息学分析第28页
   ·结果第28-32页
     ·CyclinA 基因电子克隆结果及其序列的初步分析第28页
     ·猪CyclinA 的RT-PCR 扩增和重组质粒pMD-CycA 的酶切鉴定第28-30页
     ·测序结果及序列分析第30页
     ·猪CyclinA 基因的生物信息学分析第30-32页
   ·讨论第32-35页
 第三章 猪CyclinA 蛋白的表达及其亚细胞定位的研究第35-48页
   ·材料第35-37页
     ·质粒、菌株和细胞株第35页
     ·细胞株第35页
     ·主要试剂及工具酶第35页
     ·主要仪器设备第35-36页
     ·主要试剂的配制第36-37页
   ·方法与步骤第37-43页
     ·CyclinA 基因重组真核表达质粒的构建第37-40页
     ·CyclinA 重组真核表达质粒的转染与鉴定第40-41页
     ·重组表达质粒的Western blot 检测第41-43页
   ·结果第43-46页
     ·猪CyclinA 真核表达质粒pEGFP-CycA 和pCycA-GFP 的鉴定第43-44页
     ·阳性细胞的RT-PCR 鉴定第44页
     ·CyclinA 蛋白的Western blot 检测第44-45页
     ·CyclinA 的亚细胞定位第45-46页
   ·讨论第46-48页
 第四章 猪CyclinA 基因功能的初步研究第48-53页
   ·材料第48页
     ·细胞株第48页
     ·主要试剂及耗材第48页
     ·主要仪器设备第48页
   ·方法与步骤第48-50页
     ·新霉素(G418)最佳筛选浓度的确定第48-49页
     ·G418 对转染细胞的筛选及阳性细胞的获得第49页
     ·流式细胞仪对细胞周期的检测第49页
     ·细胞增殖能力分析第49-50页
   ·结果第50-52页
     ·细胞周期分析第50-51页
     ·细胞增殖能力的比较第51-52页
   ·讨论第52-53页
结论第53-54页
参考文献第54-63页
附录第63-64页
致谢第64-65页
作者简介第65页
研究生期间公开发表的论文第65页

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