摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
文献综述 | 第10-23页 |
第一章 细胞周期以及病毒感染对细胞周期调控的研究进展 | 第10-23页 |
·细胞周期相关研究进展 | 第11-17页 |
·细胞周期概述 | 第11页 |
·细胞周期调控因子概述 | 第11-14页 |
·细胞周期的级联调控网络 | 第14-16页 |
·细胞周期检验点 | 第16-17页 |
·细胞周期蛋白A | 第17页 |
·病毒感染对细胞周期调控的研究 | 第17-23页 |
·病毒编码的细胞周期蛋白对宿主细胞周期的影响 | 第17-18页 |
·病毒编码的致瘤蛋白对细胞周期的作用 | 第18-20页 |
·病毒蛋白对细胞周期检验点的调控 | 第20-21页 |
·病毒蛋白调控细胞周期的其他途径 | 第21页 |
·病毒感染对CyclinA 基因的影响 | 第21-23页 |
试验研究 | 第23-53页 |
第二章 猪CyclinA 基因的克隆及其序列分析 | 第23-35页 |
·材料 | 第23-24页 |
·细胞株、菌株及载体 | 第23页 |
·主要工具酶、试剂及耗材 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
·主要试剂及溶液配制 | 第24页 |
·方法与步骤 | 第24-28页 |
·猪血管内皮细胞的复苏与培养 | 第24页 |
·猪CyclinA 基因的电子克隆 | 第24页 |
·猪CyclinA 基因的分子克隆 | 第24-28页 |
·CyclinA 基因序列测定与结果分析 | 第28页 |
·CyclinA 基因序列结构与生物信息学分析 | 第28页 |
·结果 | 第28-32页 |
·CyclinA 基因电子克隆结果及其序列的初步分析 | 第28页 |
·猪CyclinA 的RT-PCR 扩增和重组质粒pMD-CycA 的酶切鉴定 | 第28-30页 |
·测序结果及序列分析 | 第30页 |
·猪CyclinA 基因的生物信息学分析 | 第30-32页 |
·讨论 | 第32-35页 |
第三章 猪CyclinA 蛋白的表达及其亚细胞定位的研究 | 第35-48页 |
·材料 | 第35-37页 |
·质粒、菌株和细胞株 | 第35页 |
·细胞株 | 第35页 |
·主要试剂及工具酶 | 第35页 |
·主要仪器设备 | 第35-36页 |
·主要试剂的配制 | 第36-37页 |
·方法与步骤 | 第37-43页 |
·CyclinA 基因重组真核表达质粒的构建 | 第37-40页 |
·CyclinA 重组真核表达质粒的转染与鉴定 | 第40-41页 |
·重组表达质粒的Western blot 检测 | 第41-43页 |
·结果 | 第43-46页 |
·猪CyclinA 真核表达质粒pEGFP-CycA 和pCycA-GFP 的鉴定 | 第43-44页 |
·阳性细胞的RT-PCR 鉴定 | 第44页 |
·CyclinA 蛋白的Western blot 检测 | 第44-45页 |
·CyclinA 的亚细胞定位 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
第四章 猪CyclinA 基因功能的初步研究 | 第48-53页 |
·材料 | 第48页 |
·细胞株 | 第48页 |
·主要试剂及耗材 | 第48页 |
·主要仪器设备 | 第48页 |
·方法与步骤 | 第48-50页 |
·新霉素(G418)最佳筛选浓度的确定 | 第48-49页 |
·G418 对转染细胞的筛选及阳性细胞的获得 | 第49页 |
·流式细胞仪对细胞周期的检测 | 第49页 |
·细胞增殖能力分析 | 第49-50页 |
·结果 | 第50-52页 |
·细胞周期分析 | 第50-51页 |
·细胞增殖能力的比较 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-63页 |
附录 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
作者简介 | 第65页 |
研究生期间公开发表的论文 | 第65页 |