摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 前言 | 第11-22页 |
1.1 甘薯生产情况 | 第11-12页 |
1.2 甘薯病毒病症状 | 第12页 |
1.3 国外报道的为害甘薯的病毒种类 | 第12-14页 |
1.4 中国报道的为害甘薯的病毒种类 | 第14-15页 |
1.5 甘薯病毒病的检测技术 | 第15-18页 |
1.5.1 目测法 | 第15页 |
1.5.2 指示植物嫁接检测法 | 第15页 |
1.5.3 电镜检测法 | 第15-16页 |
1.5.4 血清学检测法 | 第16-17页 |
1.5.5 分子生物学方法 | 第17-18页 |
1.6 甘薯羽状斑驳病毒 | 第18-20页 |
1.7 甘薯卷叶病毒 | 第20-21页 |
1.8 本研究目的与意义 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-31页 |
2.1 材料 | 第22页 |
2.1.1 广西甘薯病毒病样品的采集和保存 | 第22页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第22页 |
2.1.3 酶及试剂 | 第22页 |
2.1.4 主要仪器设备及厂家 | 第22页 |
2.1.5 培养基 | 第22页 |
2.2 方法 | 第22-31页 |
2.2.1 广西甘薯病毒病田间调查方法 | 第22-23页 |
2.2.2 甘薯总RNA提取 | 第23页 |
2.2.3 cDNA合成 | 第23页 |
2.2.4 甘薯总DNA提取 | 第23-24页 |
2.2.5 引物设计与合成 | 第24-26页 |
2.2.6 PCR反应 | 第26-27页 |
2.2.7 快速扩增cDNA的5’RACE末端 | 第27页 |
2.2.8 快速扩增cDNA的3’-RACE末端 | 第27-28页 |
2.2.9 PCR产物的回收纯化 | 第28页 |
2.2.10 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
2.2.11 连接 | 第29页 |
2.2.12 转化反应 | 第29页 |
2.2.13 菌落PCR签定 | 第29页 |
2.2.14 提取质粒 | 第29-30页 |
2.2.15 序列测定与分析 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-52页 |
3.1 广西甘薯病毒病的田间调查 | 第31-32页 |
3.2 广西甘薯病毒病的病毒检测 | 第32-41页 |
3.2.1 甘薯总RNA和总DNA的提取 | 第32-33页 |
3.2.2 广西甘薯病毒病的病毒种类检测 | 第33-34页 |
3.2.3 不同甘薯病毒的检出率及其分布情况 | 第34-37页 |
3.2.4 广西甘薯病毒复合侵染 | 第37-41页 |
3.3 SPFMV广西分离物全基因组序列测定与分析 | 第41-46页 |
3.3.1 SPFMV广西分离物全基因组序列克隆 | 第41-43页 |
3.3.2 SPFMV不同分离物的一致性比较分析 | 第43-44页 |
3.3.3 构建SPFMV的系统进化树 | 第44-46页 |
3.4 SPLCV广西分离物全基因组序列测定与分析 | 第46-52页 |
3.4.1 SPLCV广西分离物全基因组序列克隆 | 第46-48页 |
3.4.2 SPLCV分离物的一致性比较分析 | 第48-49页 |
3.4.3 构建SPLCV广西分离物的系统进化树 | 第49-52页 |
4 讨论与结论 | 第52-55页 |
4.1 讨论 | 第52-54页 |
4.1.1 广西甘薯病毒病检测 | 第52页 |
4.1.2 SPFMV全基因组序列分析 | 第52-53页 |
4.1.3 SPLCV全基因组序列分析 | 第53-54页 |
4.2 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
附录A: 2种病毒(SPFMV和SPLCV)的基因组序列 | 第63-69页 |
附录B: 攻读学位期间所发表论文目录 | 第69页 |