| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-19页 |
| 1.1 副猪嗜血杆菌研究进展 | 第11-13页 |
| 1.1.1 副猪嗜血杆菌概述及生理生化特征 | 第11页 |
| 1.1.2 副猪嗜血杆菌流行病学及分型 | 第11-13页 |
| 1.1.3 突变株构建方法 | 第13页 |
| 1.2 细菌生物被膜研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2.1 细菌生物被膜的特点 | 第14页 |
| 1.2.2 细菌生物被膜的形成过程 | 第14页 |
| 1.2.3 细菌生物被膜的耐药机制 | 第14页 |
| 1.2.4 细菌生物被膜的致病机制 | 第14-15页 |
| 1.3 密度感应系统研究进展 | 第15-18页 |
| 1.3.1 细菌QS的种类及其信号分子 | 第15-17页 |
| 1.3.2 QS系统信号分子的检测 | 第17页 |
| 1.3.3 QS的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 本实验的研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 副猪嗜血杆菌的分离鉴定及其MLST分型 | 第19-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 实验菌株及培养基 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 培养基的配制 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-25页 |
| 2.2.1 细菌菌株的培养 | 第19页 |
| 2.2.2 革兰氏染色镜检 | 第19页 |
| 2.2.3 细菌基因组的提取 | 第19-23页 |
| 2.2.4 16S rRNA PCR扩增 | 第23页 |
| 2.2.5 MLST分型 | 第23-25页 |
| 2.3 实验结果 | 第25-30页 |
| 2.3.1 革兰氏染色镜检 | 第25页 |
| 2.3.2 16S rRNA PCR扩增 | 第25-26页 |
| 2.3.3 MLST 7 个管家基因PCR扩增 | 第26页 |
| 2.3.4 等位基因序列分析 | 第26-27页 |
| 2.3.5 ST型分析 | 第27页 |
| 2.3.6 多位点序列分型与血清型之间的关系 | 第27页 |
| 2.3.7 BURST分析 | 第27-28页 |
| 2.3.8 UPGMA聚类分析 | 第28-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 副猪嗜血杆菌密度感应系统信号分子的检测与初步鉴定 | 第32-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第32页 |
| 3.1.1 实验菌株 | 第32页 |
| 3.1.2 培养基及液体试剂的制备 | 第32页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-35页 |
| 3.2.1 细菌菌株的培养 | 第32页 |
| 3.2.2 H19（未加血清）生长曲线的测定 | 第32-33页 |
| 3.2.3 H19生物被膜形成能力及周期检测 | 第33-34页 |
| 3.2.4 密度感应信号分子的检测与鉴定 | 第34-35页 |
| 3.2.5 儿茶酸对生物被膜形成的影响 | 第35页 |
| 3.3 实验结果 | 第35-42页 |
| 3.3.1 H19（未加血清）生长曲线 | 第35-36页 |
| 3.3.2 H19细菌生物被膜检测结果 | 第36-37页 |
| 3.3.3 密度感应信号分子的检测与初步鉴定 | 第37-41页 |
| 3.3.4 儿茶酸对生物被膜形成的影响 | 第41-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-43页 |
| 第四章 副猪嗜血杆菌RBSB基因缺失突变株的构建 | 第43-55页 |
| 4.1 实验材料 | 第43页 |
| 4.1.1 实验菌株、质粒、培养基 | 第43页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43-50页 |
| 4.2.1 菌株的培养条件 | 第43页 |
| 4.2.2 细菌基因组的提取 | 第43页 |
| 4.2.3 突变株的构建 | 第43-48页 |
| 4.2.4 回补株的构建 | 第48-49页 |
| 4.2.5 生物被膜形成能力检测 | 第49-50页 |
| 4.3 实验结果 | 第50-53页 |
| 4.3.1 pWLYR-1 质粒的构建及鉴定 | 第50页 |
| 4.3.2 pWLYR-2 质粒的构建及鉴定 | 第50-51页 |
| 4.3.3 ΔRbs B基因缺失株的鉴定 | 第51-52页 |
| 4.3.4 pWLYR-3 质粒的构建及鉴定 | 第52页 |
| 4.3.5 ΔRbs B基因缺失突变回复株的鉴定 | 第52-53页 |
| 4.3.6 生物被膜形成能力检测结果 | 第53页 |
| 4.4 讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 全文结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简历 | 第63页 |