花生再生体系的优化及AhSAD基因启动子的转化
摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩写词表 | 第12-13页 |
引言 | 第13-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-27页 |
1 花生组织培养的研究进展 | 第15-21页 |
1.1 花生器官发生途径的研究进展 | 第15-18页 |
1.1.1 器官直接发生途径 | 第16-17页 |
1.1.2 器官间接发生途径 | 第17-18页 |
1.2 花生体细胞胚发生途径的研究进展 | 第18-20页 |
1.3 花生组织培养存在的主要问题 | 第20-21页 |
2 花生遗传转化的研究进展 | 第21-24页 |
2.1 基因枪介导的遗传转化方法 | 第21-22页 |
2.2 农杆菌介导的遗传转化方法 | 第22-24页 |
2.3 其他转化方法 | 第24页 |
2.4 花生遗传转化存在的主要问题 | 第24页 |
3 花生启动子的研究 | 第24-25页 |
4 研究的内容和意义 | 第25-27页 |
4.1 研究内容 | 第25-26页 |
4.2 研究目的及意义 | 第26-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-35页 |
1 实验材料 | 第27-30页 |
1.1 植物材料 | 第27页 |
1.2 植物激素 | 第27-28页 |
1.3 培养基 | 第28-29页 |
1.4 农杆菌菌株和启动子表达载体 | 第29页 |
1.5 实验试剂和仪器 | 第29-30页 |
2 实验方法 | 第30-35页 |
2.1 愈伤组织诱导和再生 | 第30-31页 |
2.1.1 愈伤组织诱导 | 第30页 |
2.1.2 花生愈伤组织再生成苗 | 第30-31页 |
2.1.3 花生基因型筛选 | 第31页 |
2.1.4 生根培养 | 第31页 |
2.2 花生遗传转化条件优化 | 第31-32页 |
2.2.1 受体材料对遗传转化的影响 | 第31页 |
2.2.2 Km抗生素浓度的确定 | 第31页 |
2.2.3 侵染时间对遗传转化的影响 | 第31页 |
2.2.4 共培养时间对遗传转化的影响 | 第31-32页 |
2.3 花生启动子的转化 | 第32页 |
2.3.1 菌液活化 | 第32页 |
2.3.2 受体材料侵染、共培养及再生 | 第32页 |
2.4 GUS活性检测 | 第32-33页 |
2.5 PCR检测 | 第33-34页 |
2.5.1 DNA提取 | 第33页 |
2.5.2 PCR检测 | 第33-34页 |
2.6 阳性植株进行生根 | 第34-35页 |
第三章 实验结果与分析 | 第35-47页 |
3.1 愈伤组织诱导 | 第35-38页 |
3.1.1 不同预培养时间对外植体诱导愈伤的差异 | 第35-36页 |
3.1.2 不同诱导培养基的愈伤诱导差异 | 第36-38页 |
3.1.3 不同继代培养基的愈伤诱导差异 | 第38页 |
3.2 花生愈伤组织再生成苗 | 第38-41页 |
3.2.1 体细胞胚发生途径 | 第38-40页 |
3.2.2 间接器官发生途径 | 第40-41页 |
3.3 不同花生基因型的筛选 | 第41-42页 |
3.4 遗传转化条件优化 | 第42-44页 |
3.4.1 Km选择剂浓度的确定 | 第42-43页 |
3.4.2 侵染时间对遗传转化的影响 | 第43页 |
3.4.3 共培养时间对遗传转化的影响 | 第43-44页 |
3.5 花生品种农杆菌转化效率 | 第44-46页 |
3.5.1 GUS活性检测 | 第45页 |
3.5.2 PCR检测 | 第45-46页 |
3.6 生根 | 第46-47页 |
第四章 结论与讨论 | 第47-52页 |
4.1 影响花生上胚轴愈伤组织诱导的因素 | 第47-48页 |
4.1.1 外植体及预培养时间的选择 | 第47页 |
4.1.2 不同激素对上胚轴外植体的影响 | 第47-48页 |
4.2 影响花生上胚轴再生的因素 | 第48-49页 |
4.2.1 不同激素对体细胞胚再生途径的影响 | 第48页 |
4.2.2 不同激素对间接再生途径的影响 | 第48-49页 |
4.2.3 不同基因型对花生上胚轴再生的影响 | 第49页 |
4.3 影响AhSAD基因启动子转化的因素 | 第49-52页 |
4.3.1 Km浓度的筛选 | 第50页 |
4.3.2 侵染时间对遗传转化的影响 | 第50页 |
4.3.3 共培养时间对遗传转化的影响 | 第50页 |
4.3.4 基因型对遗传转化的影响 | 第50-51页 |
4.3.5 受体材料对遗传转化的影响 | 第51页 |
4.3.6 转化植株的鉴定 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
附录 | 第58-59页 |
个人简历 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |