| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 本实验所需的器材和试剂 | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 性别决定与性别分化 | 第10-16页 |
| 1.1.1 性别决定的几种方式 | 第10-13页 |
| 1.1.2 性别决定与分化的相关基因 | 第13-15页 |
| 1.1.3 性别决定与分化的研究方法 | 第15-16页 |
| 1.2 贝类性别决定研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3 fem-1 基因的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 池蝶蚌fem-1a基因的克隆及生物信息学分析 | 第20-39页 |
| 2.1 材料 | 第20页 |
| 2.2 相关软件 | 第20-21页 |
| 2.3 方法 | 第21-27页 |
| 2.3.1 池蝶蚌性腺总RNA的提取 | 第21页 |
| 2.3.2 总RNA的DNase处理 | 第21-22页 |
| 2.3.3 SMART cDNA的合成 | 第22-23页 |
| 2.3.4 PCR引物设计 | 第23-24页 |
| 2.3.5 池蝶蚌fem-1a基因cDNA序列的克隆 | 第24页 |
| 2.3.6 目的片段的回收、连接、转化与测序 | 第24-26页 |
| 2.3.6.1 目的片段回收 | 第25页 |
| 2.3.6.2 目的产物与pMD19-T载体连接 | 第25-26页 |
| 2.3.6.3 连接产物的转化 | 第26页 |
| 2.3.6.4 菌液PCR挑选重组质粒及测序 | 第26页 |
| 2.3.7 序列拼接及分析 | 第26-27页 |
| 2.4 结果 | 第27-36页 |
| 2.4.1 总RNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.4.2 池蝶蚌fem-1a基因cDNA序列扩增结果及鉴定 | 第28页 |
| 2.4.3 池蝶蚌fem-1a基因cDNA序列的基本分析 | 第28-29页 |
| 2.4.4 池蝶蚌fem-1a基因的生物信息学分析 | 第29-36页 |
| 2.4.4.1 氨基酸组成及理化性质分析 | 第29-30页 |
| 2.4.4.2 蛋白质亲疏水性及信号肽 | 第30-32页 |
| 2.4.4.3 亚细胞定位预测分析 | 第32页 |
| 2.4.4.4 蛋白结构域分析 | 第32-33页 |
| 2.4.4.5 蛋白质二、三级结构预测分析 | 第33-35页 |
| 2.4.4.6 系统进化分析 | 第35-36页 |
| 2.5 讨论 | 第36-39页 |
| 第三章 池蝶蚌fem-1a基因在不同组织中的表达分析 | 第39-48页 |
| 3.1 材料 | 第39页 |
| 3.2 方法 | 第39-43页 |
| 3.2.1 池蝶蚌fem-1a基因的组织表达谱分析 | 第39-42页 |
| 3.2.1.1 池蝶蚌各组织总RNA提取 | 第39-40页 |
| 3.2.1.2 总RNA的DNase处理 | 第40页 |
| 3.2.1.3 各个组织cDNA的合成 | 第40页 |
| 3.2.1.4 荧光定量PCR引物设计 | 第40-41页 |
| 3.2.1.5 荧光定量PCR | 第41-42页 |
| 3.2.2 池蝶蚌fem-1a基因的不同发育时期精巢表达谱分析 | 第42-43页 |
| 3.3 结果 | 第43-45页 |
| 3.3.1 池蝶蚌fem-1a基因的组织表达谱分析 | 第43-44页 |
| 3.3.2 池蝶蚌fem-1a基因的不同发育时期精巢表达谱分析 | 第44-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-48页 |
| 第四章 结论与展望 | 第48-50页 |
| 4.1 结论 | 第48-49页 |
| 4.2 展望 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第56页 |
