农杆菌介导高亲和NH4+转运因子融合基因转化甜菜
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-18页 |
| ·植物氮素利用研究概述 | 第9-12页 |
| ·氮素生理功能及氮素施用状况 | 第9-10页 |
| ·提高氮素利用效率的技术途径 | 第10页 |
| ·氮素基因工程研究概况 | 第10-11页 |
| ·氮素与甜菜产质量的关系 | 第11-12页 |
| ·植物种属中的铵转运蛋白家族 | 第12-15页 |
| ·铵态氮的吸收及其基因 | 第12-13页 |
| ·铵转运蛋白基因的功能性表达 | 第13-14页 |
| ·铵转运蛋白基因的转录调节 | 第14-15页 |
| ·甜菜基因工程研究进展 | 第15-18页 |
| ·甜菜组织培养研究概况 | 第15-16页 |
| ·甜菜转基因研究进展 | 第16-18页 |
| ·研究目的和意义 | 第18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-29页 |
| ·实验材料 | 第18-21页 |
| ·供试材料 | 第18-19页 |
| ·菌株和质粒 | 第19页 |
| ·遗传转化主要试剂和仪器设备 | 第19页 |
| ·培养基的准备 | 第19-21页 |
| ·实验方法 | 第21-24页 |
| ·农杆菌的活化与培养 | 第21-22页 |
| ·甜菜遗传转化体系的建立 | 第22-23页 |
| ·抗性植株的获得 | 第23-24页 |
| ·数据统计 | 第24页 |
| ·转基因植株的分子检测方法 | 第24-28页 |
| ·实验药品和仪器设备 | 第24-25页 |
| ·抗性苗PCR 检测试验方法 | 第25-26页 |
| ·转基因甜菜RT-PCR 检测试验方法 | 第26-28页 |
| ·转基因甜菜功能鉴定 | 第28-29页 |
| ·转基因植株无土栽培的低氮处理 | 第28-29页 |
| ·叶绿素含量和全氮含量的测定 | 第29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-44页 |
| ·质粒目的基因鉴定 | 第29页 |
| ·遗传转化体系的建立 | 第29-40页 |
| ·预培养时间对抗性芽分化的影响 | 第29-30页 |
| ·菌液浓度对抗性芽分化和转化率的影响 | 第30-31页 |
| ·侵染时间对抗性芽分化和转化率的影响 | 第31-32页 |
| ·共培养基pH 值对子叶节分化的影响 | 第32-33页 |
| ·共培养时间对子叶节遗传转化的影响 | 第33-34页 |
| ·潮霉素对抗性芽筛选浓度的确定 | 第34-36页 |
| ·潮霉素浓度对抗性苗生根的影响 | 第36-37页 |
| ·不同抑菌剂浓度对农杆菌生长和外植体的影响 | 第37-38页 |
| ·抗性植株的获得 | 第38-40页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第40-42页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第40-41页 |
| ·转基因甜菜RT-PCR 检测 | 第41-42页 |
| ·转基因植株的功能鉴定 | 第42-44页 |
| ·转基因植株叶绿素含量 | 第42-43页 |
| ·转基因植株全氮含量 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-49页 |
| ·外植体的选择 | 第45页 |
| ·子叶节预培养对抗性芽分化的影响 | 第45页 |
| ·菌体重悬后侵染液浓度和侵染时间对遗传转化的影响 | 第45-46页 |
| ·共培养环境对遗传转化的影响 | 第46-47页 |
| ·抗生素的使用对遗传转化的影响 | 第47-48页 |
| ·延迟筛选 | 第48页 |
| ·甜菜遗传转化率相对低的原因 | 第48-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |
