| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 缩略词表 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-32页 |
| 1.1 植物中的活性氧 | 第16-20页 |
| 1.1.1 植物中活性氧的产生机制 | 第16-17页 |
| 1.1.2 植物活性氧的功能 | 第17-18页 |
| 1.1.3 活性氧的消除途径 | 第18-19页 |
| 1.1.4 现存的问题 | 第19-20页 |
| 1.2 NADPH氧化酶的研究进展 | 第20-29页 |
| 1.2.1 NADPH氧化酶的组分定位 | 第20-22页 |
| 1.2.2 NADPH氧化酶组装活化过程及调节 | 第22-24页 |
| 1.2.2.1 钙信号与NADPH氧化酶活化 | 第22-23页 |
| 1.2.2.2 碱化作用与NADPH氧化酶活化 | 第23页 |
| 1.2.2.3 臭氧刺激与NADPH氧化酶活化 | 第23页 |
| 1.2.2.4 磷酸化与NADPH氧化酶活化 | 第23-24页 |
| 1.2.2.5 病毒浸染与NADPH氧化酶活化 | 第24页 |
| 1.2.2.6 不同诱导剂与NADPH氧化酶活化 | 第24页 |
| 1.2.3 胁迫条件下NADPH氧化酶生理特性变化 | 第24-26页 |
| 1.2.3.1 缺氧条件下NADPH氧化酶生理特性变化 | 第25页 |
| 1.2.3.2 盐胁迫处理下NADPH氧化酶生理特性变化 | 第25页 |
| 1.2.3.3 外源H_2O_2诱导的NADPH氧化酶生理特性变化 | 第25-26页 |
| 1.2.4 由NADPH氧化酶诱导的ROS爆发 | 第26-29页 |
| 1.2.4.1 活性氧在细胞内承担的第二信使 | 第26-27页 |
| 1.2.4.2 ROS的增加与细胞氧化还原状态的改变相关 | 第27页 |
| 1.2.4.3 ROS诱导的表皮细胞死亡 | 第27页 |
| 1.2.4.4 参与细胞周期调控 | 第27页 |
| 1.2.4.5 参与防御病原体 | 第27-28页 |
| 1.2.4.6 ROS信号与其它信号交叉 | 第28-29页 |
| 1.3 MAPK级联途径与NADPH氧化酶 | 第29-30页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第30-32页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第32-52页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-34页 |
| 2.1.1 植物材料与培养 | 第32页 |
| 2.1.2 材料处理 | 第32页 |
| 2.1.3 菌株与载体 | 第32页 |
| 2.1.4 PCR引物 | 第32-33页 |
| 2.1.5 试剂 | 第33页 |
| 2.1.6 仪器 | 第33-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-52页 |
| 2.2.1 油菜RBOHB基因编码区的克隆与测序 | 第34-39页 |
| 2.2.1.1 油菜叶片总RNA的提取 | 第34-35页 |
| 2.2.1.2 反转录cDNA第一链的合成 | 第35-36页 |
| 2.2.1.3 简并引物的设计 | 第36-37页 |
| 2.2.1.4 PCR扩增 | 第37页 |
| 2.2.1.5 目的基因片段的回收 | 第37页 |
| 2.2.1.6 连接反应 | 第37-38页 |
| 2.2.1.7 大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第38页 |
| 2.2.1.8 平板筛选 | 第38页 |
| 2.2.1.9 阳性菌的PCR鉴定及克隆基因的测序 | 第38-39页 |
| 2.2.2 RACE方法克隆RBOHB基因全长 | 第39-45页 |
| 2.2.2.1 3’RACE扩增油菜RBOHB基因的 3’末端 | 第39-42页 |
| 2.2.2.2 5’RACE扩增RBOHB基因的 5’末端 | 第42-45页 |
| 2.2.3 油菜RBOHB基因的生物信息学分析 | 第45页 |
| 2.2.4 油菜RBOHB基因组织特异性表达检测 | 第45页 |
| 2.2.5 逆境胁迫对油菜RBOHB基因转录水平的影响 | 第45-46页 |
| 2.2.6 外源H_2O_2胁迫对两种油菜生理指标的影响 | 第46-51页 |
| 2.2.6.1 实验材料与H_2O_2胁迫处理 | 第46-47页 |
| 2.2.6.2 各项生理指标的测定方法 | 第47-51页 |
| 2.2.7 H_2O_2胁迫及MAPKK抑制剂预处理对两种油菜NADPH氧化酶活性的影响 | 第51页 |
| 2.2.7.1 实验材料与处理 | 第51页 |
| 2.2.7.2 测定方法 | 第51页 |
| 2.2.8 数据分析 | 第51-52页 |
| 第三章 结果与分析 | 第52-81页 |
| 3.1 油菜RBOHB基因的克隆 | 第52-56页 |
| 3.1.1 油菜总RNA提取 | 第52页 |
| 3.1.2 油菜RBOHB基因编码区的克隆 | 第52-54页 |
| 3.1.3 RACE方法克隆油菜RBOHB基因全长 | 第54-56页 |
| 3.1.3.1 3’RACE扩增油菜RBOHB基因的 3’末端 | 第54-55页 |
| 3.1.3.2 5’RACE扩增油菜RBOHB基因的 5’末端 | 第55-56页 |
| 3.1.3.3 油菜RBOHB基因全长的获得 | 第56页 |
| 3.2 油菜RBOHB基因序列的生物信息学分析 | 第56-66页 |
| 3.2.1 油菜RBOHB的序列分析 | 第56-58页 |
| 3.2.2 油菜RBOHB与部分植物的氨基酸序列比对及系统进化树分析 | 第58-60页 |
| 3.2.3 油菜RBOHB预测蛋白基本特征分析及氨基酸组成 | 第60-62页 |
| 3.2.4 油菜RBOHB预测蛋白质疏水性/亲水性与跨膜结构域分析 | 第62-64页 |
| 3.2.5 油菜RBOHB蛋白二级结构的预测 | 第64-65页 |
| 3.2.6 油菜RBOHB蛋白质三级结构的预测 | 第65-66页 |
| 3.3 油菜RBOHB基因组织特异性表达检测 | 第66-67页 |
| 3.4 逆境胁迫下油菜RBOHB基因在转录水平上的表达分析 | 第67-73页 |
| 3.4.1 不同逆境胁迫处理对RBOHB基因转录水平的影响 | 第67-70页 |
| 3.4.2 逆境胁迫及MAPKK抑制剂预处理对油菜RBOHB基因转录水平的影响 | 第70-73页 |
| 3.5 外源H_2O_2胁迫对两种油菜相关生理指标的影响 | 第73-79页 |
| 3.5.1 H_2O_2胁迫对两种油菜抗氧化酶活性影响的分析 | 第73-75页 |
| 3.5.2 H_2O_2胁迫下两种油菜叶片叶绿素含量的变化 | 第75-76页 |
| 3.5.3 H_2O_2胁迫下两种油菜叶片MDA含量的变化 | 第76-77页 |
| 3.5.4 H_2O_2胁迫下两种油菜叶片游离脯氨酸含量的变化 | 第77-78页 |
| 3.5.5 H_2O_2胁迫下两种油菜叶片中NADPH氧化酶活性的变化 | 第78-79页 |
| 3.6 H_2O_2胁迫及MAPKK抑制剂预处理对两种油菜NADPH氧化酶活性的影响 | 第79-81页 |
| 第四章 讨论 | 第81-85页 |
| 4.1 油菜RBOHB基因的克隆 | 第81页 |
| 4.2 油菜RBOHB基因的生物信息学分析 | 第81-82页 |
| 4.3 逆境胁迫对油菜RBOHB基因转录水平的影响 | 第82页 |
| 4.4 外源H_2O_2胁迫对两种油菜相关生理指标的影响 | 第82-83页 |
| 4.5 MAPK级联途径与油菜RBOHB基因 | 第83-85页 |
| 第五章 结论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
