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神经嵴源肌腱干细胞与外周神经共同参与肌腱损伤修复的研究

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-7页
部分英文缩写表第11-12页
1 绪论第12-26页
    1.1 问题的提出与研究意义第12-14页
        1.1.1 问题的提出第12-13页
        1.1.2 研究意义第13-14页
    1.2 国内外研究现状第14-23页
        1.2.1 肌腱组织生物学特征第14-15页
        1.2.2 PRP的作用及其运用于肌腱损伤修复第15-17页
        1.2.3 肌腱组织中血管参与微环境调控第17-19页
        1.2.4 肌腱组织中寄居的干/祖细胞第19-20页
        1.2.5 肌腱中的神经分布及其在肌腱损伤中的作用第20-23页
    1.3 研究目的与内容第23-24页
        1.3.1 研究目的第23页
        1.3.2 研究内容及技术路线第23-24页
    1.4 创新点第24-26页
2 PRP激活肌腱干细胞参与跟腱断裂再生第26-61页
    2.1 引言第26-27页
    2.2 试药与材料第27-31页
        2.2.1 实验动物第27页
        2.2.2 实验仪器及耗材第27-28页
        2.2.3 实验试剂第28-29页
        2.2.4 实验试药的配制第29-31页
    2.3 实验路线及实验方法第31-41页
        2.3.1 实验路线第31页
        2.3.2 大鼠肌腱组织分离及细胞提取第31-32页
        2.3.3 流式细胞术检测第32页
        2.3.4 干细胞多向分化潜能检测第32页
        2.3.5 免疫荧光染色鉴定第32-33页
        2.3.6 鼠尾胶原的制备第33-34页
        2.3.7 PRP的制备第34页
        2.3.8 细胞活力、周期、增殖能力检测第34-35页
        2.3.9 细胞迁移能力检测第35页
        2.3.10 蛋白免疫印迹第35-36页
        2.3.11 PRP-胶原/NCO-TDSCs移植复合物的制备及特征分析第36-37页
        2.3.12 实时定量PCR第37-39页
        2.3.13 大鼠跟腱断裂模型的建立及修复移植第39页
        2.3.14 修复移植后损伤肌腱外观、组织学评价分析及力学强度测定第39-41页
    2.4 实验结果第41-57页
        2.4.1 肌腱干细胞克隆形成及细胞形态第41-42页
        2.4.2 细胞流式细胞术及免疫荧光染色鉴定第42-44页
        2.4.3 PRP体外激活NCO-TDSCs细胞功能第44-50页
        2.4.4 PRP/胶原-NCO-TDSCs复合移植物促进跟腱断裂再生第50-57页
    2.5 分析与讨论第57-59页
    2.6 小结第59-61页
3 外周神经组织辅助肌腱损伤后血管新生第61-77页
    3.1 引言第61-62页
    3.2 试药与材料第62-63页
        3.2.1 实验动物第62页
        3.2.2 实验仪器及耗材第62页
        3.2.3 实验试剂第62-63页
        3.2.4 实验试药的配制第63页
    3.3 实验路线及实验方法第63-66页
        3.3.1 实验路线第63-64页
        3.3.2 Sox10-Cre/ROSA26-Flox-RFP转基因小鼠的建立第64-65页
        3.3.3 转基因小鼠Sox10-Cre/ROSA26-Flox-RFP/Tie2-GFP的Skinfold模型第65页
        3.3.4 转基因小鼠Sox10-Cre/ROSA26-Flox-RFP/Tie2-GFP髌腱窗口损伤第65页
        3.3.5 转基因小鼠Sox10-Cre/ROSA26-Flox-RFP跟腱断裂损伤第65-66页
        3.3.6 冰冻切片免疫荧光染色第66页
    3.4 实验结果第66-73页
        3.4.1 Sox10-Cre/ROSA26-Flox-RFP基因表型检测分析结果第66-67页
        3.4.2 外周神经组织包绕着新生的血管周边第67-68页
        3.4.3 外周神经组织参与髌腱损伤后新生血管形成第68-70页
        3.4.4 跟腱损伤后外周神经组织辅助血管新生第70-73页
    3.5 分析与讨论第73-74页
    3.6 小结第74-77页
4 神经嵴源细胞迁出神经组织参与肌腱损伤修复第77-91页
    4.1 引言第77页
    4.2 试药与材料第77-79页
        4.2.1 实验动物第77页
        4.2.2 实验仪器及耗材第77-78页
        4.2.3 实验试剂第78-79页
        4.2.4 实验试药的配制第79页
    4.3 技术路线及实验方法第79-81页
        4.3.1 实验路线第79页
        4.3.2 跟腱断裂损伤第79页
        4.3.3 组织冰冻切片免疫荧光染色第79-80页
        4.3.4 RFP(+)细胞分离培养第80页
        4.3.5 RFP(+)细胞的免疫荧光染色第80-81页
        4.3.6 RFP(+)/Sox10(+)细胞分化鉴定第81页
    4.4 实验结果第81-86页
        4.4.1 损伤跟腱免疫荧光染色分析第81-82页
        4.4.2 组织块培养分离RFP(+)细胞第82-84页
        4.4.3 分离的RFP(+)细胞免疫荧光染色鉴定第84-85页
        4.4.4 RFP(+)细胞Sox10免疫荧光染色及干细胞分化特性第85-86页
    4.5 分析与讨论第86-88页
    4.6 小结第88-91页
5 结论与展望第91-94页
    5.1 结论第91-92页
    5.2 后续研究展望第92-94页
致谢第94-96页
参考文献第96-106页
附录第106-107页
    A. 博士期间参与科研项目第106页
    B. 博士期间发表期刊论文第106-107页

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