中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-7页 |
部分英文缩写表 | 第11-12页 |
1 绪论 | 第12-26页 |
1.1 问题的提出与研究意义 | 第12-14页 |
1.1.1 问题的提出 | 第12-13页 |
1.1.2 研究意义 | 第13-14页 |
1.2 国内外研究现状 | 第14-23页 |
1.2.1 肌腱组织生物学特征 | 第14-15页 |
1.2.2 PRP的作用及其运用于肌腱损伤修复 | 第15-17页 |
1.2.3 肌腱组织中血管参与微环境调控 | 第17-19页 |
1.2.4 肌腱组织中寄居的干/祖细胞 | 第19-20页 |
1.2.5 肌腱中的神经分布及其在肌腱损伤中的作用 | 第20-23页 |
1.3 研究目的与内容 | 第23-24页 |
1.3.1 研究目的 | 第23页 |
1.3.2 研究内容及技术路线 | 第23-24页 |
1.4 创新点 | 第24-26页 |
2 PRP激活肌腱干细胞参与跟腱断裂再生 | 第26-61页 |
2.1 引言 | 第26-27页 |
2.2 试药与材料 | 第27-31页 |
2.2.1 实验动物 | 第27页 |
2.2.2 实验仪器及耗材 | 第27-28页 |
2.2.3 实验试剂 | 第28-29页 |
2.2.4 实验试药的配制 | 第29-31页 |
2.3 实验路线及实验方法 | 第31-41页 |
2.3.1 实验路线 | 第31页 |
2.3.2 大鼠肌腱组织分离及细胞提取 | 第31-32页 |
2.3.3 流式细胞术检测 | 第32页 |
2.3.4 干细胞多向分化潜能检测 | 第32页 |
2.3.5 免疫荧光染色鉴定 | 第32-33页 |
2.3.6 鼠尾胶原的制备 | 第33-34页 |
2.3.7 PRP的制备 | 第34页 |
2.3.8 细胞活力、周期、增殖能力检测 | 第34-35页 |
2.3.9 细胞迁移能力检测 | 第35页 |
2.3.10 蛋白免疫印迹 | 第35-36页 |
2.3.11 PRP-胶原/NCO-TDSCs移植复合物的制备及特征分析 | 第36-37页 |
2.3.12 实时定量PCR | 第37-39页 |
2.3.13 大鼠跟腱断裂模型的建立及修复移植 | 第39页 |
2.3.14 修复移植后损伤肌腱外观、组织学评价分析及力学强度测定 | 第39-41页 |
2.4 实验结果 | 第41-57页 |
2.4.1 肌腱干细胞克隆形成及细胞形态 | 第41-42页 |
2.4.2 细胞流式细胞术及免疫荧光染色鉴定 | 第42-44页 |
2.4.3 PRP体外激活NCO-TDSCs细胞功能 | 第44-50页 |
2.4.4 PRP/胶原-NCO-TDSCs复合移植物促进跟腱断裂再生 | 第50-57页 |
2.5 分析与讨论 | 第57-59页 |
2.6 小结 | 第59-61页 |
3 外周神经组织辅助肌腱损伤后血管新生 | 第61-77页 |
3.1 引言 | 第61-62页 |
3.2 试药与材料 | 第62-63页 |
3.2.1 实验动物 | 第62页 |
3.2.2 实验仪器及耗材 | 第62页 |
3.2.3 实验试剂 | 第62-63页 |
3.2.4 实验试药的配制 | 第63页 |
3.3 实验路线及实验方法 | 第63-66页 |
3.3.1 实验路线 | 第63-64页 |
3.3.2 Sox10-Cre/ROSA26-Flox-RFP转基因小鼠的建立 | 第64-65页 |
3.3.3 转基因小鼠Sox10-Cre/ROSA26-Flox-RFP/Tie2-GFP的Skinfold模型 | 第65页 |
3.3.4 转基因小鼠Sox10-Cre/ROSA26-Flox-RFP/Tie2-GFP髌腱窗口损伤 | 第65页 |
3.3.5 转基因小鼠Sox10-Cre/ROSA26-Flox-RFP跟腱断裂损伤 | 第65-66页 |
3.3.6 冰冻切片免疫荧光染色 | 第66页 |
3.4 实验结果 | 第66-73页 |
3.4.1 Sox10-Cre/ROSA26-Flox-RFP基因表型检测分析结果 | 第66-67页 |
3.4.2 外周神经组织包绕着新生的血管周边 | 第67-68页 |
3.4.3 外周神经组织参与髌腱损伤后新生血管形成 | 第68-70页 |
3.4.4 跟腱损伤后外周神经组织辅助血管新生 | 第70-73页 |
3.5 分析与讨论 | 第73-74页 |
3.6 小结 | 第74-77页 |
4 神经嵴源细胞迁出神经组织参与肌腱损伤修复 | 第77-91页 |
4.1 引言 | 第77页 |
4.2 试药与材料 | 第77-79页 |
4.2.1 实验动物 | 第77页 |
4.2.2 实验仪器及耗材 | 第77-78页 |
4.2.3 实验试剂 | 第78-79页 |
4.2.4 实验试药的配制 | 第79页 |
4.3 技术路线及实验方法 | 第79-81页 |
4.3.1 实验路线 | 第79页 |
4.3.2 跟腱断裂损伤 | 第79页 |
4.3.3 组织冰冻切片免疫荧光染色 | 第79-80页 |
4.3.4 RFP(+)细胞分离培养 | 第80页 |
4.3.5 RFP(+)细胞的免疫荧光染色 | 第80-81页 |
4.3.6 RFP(+)/Sox10(+)细胞分化鉴定 | 第81页 |
4.4 实验结果 | 第81-86页 |
4.4.1 损伤跟腱免疫荧光染色分析 | 第81-82页 |
4.4.2 组织块培养分离RFP(+)细胞 | 第82-84页 |
4.4.3 分离的RFP(+)细胞免疫荧光染色鉴定 | 第84-85页 |
4.4.4 RFP(+)细胞Sox10免疫荧光染色及干细胞分化特性 | 第85-86页 |
4.5 分析与讨论 | 第86-88页 |
4.6 小结 | 第88-91页 |
5 结论与展望 | 第91-94页 |
5.1 结论 | 第91-92页 |
5.2 后续研究展望 | 第92-94页 |
致谢 | 第94-96页 |
参考文献 | 第96-106页 |
附录 | 第106-107页 |
A. 博士期间参与科研项目 | 第106页 |
B. 博士期间发表期刊论文 | 第106-107页 |