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疏叶骆驼刺杆状DNA病毒及其ORF4编码蛋白与启动子的功能研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
英文缩略表第10-14页
第一章 绪论第14-25页
    1.1 杆状DNA病毒属隶属于花椰菜花叶病毒科,危害广泛第14页
    1.2 杆状DNA病毒的病毒粒子、宿主范围、症状及传播方式第14-16页
    1.3 杆状DNA病毒的基因组特征及复制过程第16-18页
    1.4 杆状DNA病毒基因组与寄主基因组DNA的整合第18-19页
    1.5 内源DNA病毒对寄主的生物学影响第19-20页
    1.6 疏叶骆驼刺第20-21页
    1.7 本研究目的及意义第21-22页
    1.8 研究内容和技术路线第22-25页
        1.8.1 研究内容第22-24页
        1.8.2 技术路线第24-25页
第二章 疏叶骆驼刺杆状DNA病毒基因组克隆与序列分析第25-51页
    2.1 实验材料第25-27页
        2.1.1 植物材料第25-26页
        2.1.2 菌种与载体第26页
        2.1.3 试剂第26页
        2.1.4 仪器设备第26页
        2.1.5 引物第26-27页
    2.2 实验方法第27-38页
        2.2.1 疏叶骆驼刺种子的处理第27-28页
        2.2.2 培养基配制第28页
        2.2.3 疏叶骆驼刺总DNA的提取第28-29页
        2.2.4 病毒基因组的克隆第29-32页
        2.2.5 序列装配和分析第32-33页
        2.2.6 系统进化树构建第33页
        2.2.7 Southern杂交第33-36页
        2.2.8 反向PCR第36-38页
    2.3 结果与分析第38-49页
        2.3.1 疏叶骆驼刺杆状DNA病毒基因组序列克隆与分析第38-42页
        2.3.2 ABV保守结构区域的同源蛋白序列对比及进化分析第42-46页
        2.3.3 ABV序列整合进入疏叶骆驼刺基因组第46-48页
        2.3.4 ABV在疏叶骆驼刺中广泛存在第48-49页
    2.4 讨论与小结第49-51页
第三章 ABV ORF4启动子以及编码蛋白的功能分析第51-76页
    3.1 实验材料第51-53页
        3.1.1 植物材料第51-52页
        3.1.2 菌种与载体第52页
        3.1.3 实验试剂第52页
        3.1.4 实验中所用仪器及设备第52页
        3.1.5 引物第52-53页
    3.2 实验方法第53-66页
        3.2.1 PEG处理疏叶骆驼刺幼苗第53-54页
        3.2.2 培养基配制方法第54页
        3.2.3 疏叶骆驼刺总RNA的提取第54-55页
        3.2.4 反转录制备cDNA第55页
        3.2.5 qPCR第55-56页
        3.2.6 ABV ORF4启动子、基因的克隆及植物表达载体的构建第56-58页
        3.2.7 根癌农杆菌EHA105感受态制备和转化第58-60页
        3.2.8 农杆菌侵润法第60页
        3.2.9 GUS染色第60-61页
        3.2.10 gus基因表达的定量分析第61-63页
        3.2.11 拟南芥培养第63-64页
        3.2.12 根癌农杆菌蘸花法转化拟南芥第64-65页
        3.2.13 转基因植株的筛选与表型分析第65-66页
    3.3 结果与分析第66-74页
        3.3.1 干旱胁迫显著提高疏叶骆驼刺中ABV ORF4的mRNA表达第66-67页
        3.3.2 ABV ORF4启动子的克隆与功能分析第67-71页
        3.3.3 ABV ORF4编码基因的克隆与功能分析第71-74页
    3.4 讨论与小结第74-76页
第四章 总结与展望第76-78页
    4.1 主要工作总结第76-77页
    4.2 工作展望第77-78页
参考文献第78-86页
致谢第86-88页
硕士在读期间发表的文章第88页
参与研究项目第88页

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