| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 酯酶 | 第12-14页 |
| 1.1.1 酯酶的简介 | 第12-13页 |
| 1.1.2 酯酶的来源 | 第13页 |
| 1.1.3 酯酶和脂肪酶的区别 | 第13-14页 |
| 1.2 细菌来源酯酶/脂肪酶的分类 | 第14-19页 |
| 1.3 细菌来源酯酶的筛选方法 | 第19-22页 |
| 1.3.1 平板检测筛选酯酶 | 第19页 |
| 1.3.2 宏基因组文库筛选酯酶 | 第19-21页 |
| 1.3.3 基因预测分析法筛选酯酶 | 第21-22页 |
| 1.4 立题依据和意义 | 第22页 |
| 1.5 主要研究内容 | 第22-23页 |
| 第二章 酯酶的分离纯化和酶学性质研究 | 第23-39页 |
| 2.1 材料和方法 | 第23-30页 |
| 2.1.1 质粒和菌株来源 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂和溶液 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要的仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.1.4 酯酶氨基酸序列分析 | 第25页 |
| 2.1.5 酯酶诱导表达 | 第25页 |
| 2.1.6 酯酶蛋白的分离纯化 | 第25-27页 |
| 2.1.7 酯酶酶学性质研究 | 第27-30页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第30-38页 |
| 2.2.1 酯酶氨基酸序列分析 | 第30-32页 |
| 2.2.2 酯酶蛋白的分离纯化 | 第32-33页 |
| 2.2.3 酯酶E53的酶学性质研究 | 第33-38页 |
| 2.3 本章小结 | 第38-39页 |
| 第三章 酯酶晶体结构解析 | 第39-60页 |
| 3.1 材料和方法 | 第39-47页 |
| 3.1.1 主要试剂和溶液 | 第39-40页 |
| 3.1.2 主要仪器和设备 | 第40页 |
| 3.1.3 酯酶E53异源表达 | 第40-41页 |
| 3.1.4 酯酶蛋白的分离纯化 | 第41-45页 |
| 3.1.5 酯酶晶体初筛 | 第45-46页 |
| 3.1.6 蛋白晶体优化 | 第46-47页 |
| 3.1.7 蛋白晶体X-射线衍射数据收集 | 第47页 |
| 3.1.8 蛋白晶体结构解析 | 第47页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第47-59页 |
| 3.2.1 酯酶E53的分离纯化 | 第47-50页 |
| 3.2.2 酯酶E53结晶条件筛选与优化 | 第50-53页 |
| 3.2.3 酯酶E53晶体衍射数据的收集 | 第53页 |
| 3.2.4 酯酶E53晶体结构解析 | 第53-56页 |
| 3.2.5 酯酶E53晶体结构模型质量分析 | 第56-59页 |
| 3.3 本章小结 | 第59-60页 |
| 第四章 酯酶突变体构建及其酶学性质研究 | 第60-74页 |
| 4.1 材料与方法 | 第60-62页 |
| 4.1.1 质粒和菌株 | 第60-61页 |
| 4.1.2 主要试剂和溶液 | 第61页 |
| 4.1.3 主要仪器和设备 | 第61页 |
| 4.1.4 酯酶突变体构建 | 第61-62页 |
| 4.1.5 酯酶突变体蛋白的表达纯化和酶学性质研究 | 第62页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第62-72页 |
| 4.2.1 酯酶E53的突变体构建 | 第62-63页 |
| 4.2.2 酯酶E53突变体的表达纯化 | 第63-65页 |
| 4.2.3 酯酶E53及其突变体的酶学性质 | 第65-72页 |
| 4.3 本章小结 | 第72-74页 |
| 第五章 结论与展望 | 第74-76页 |
| 5.1 结论 | 第74-75页 |
| 5.2 展望 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 硕士期间发表的学术论文 | 第82页 |