摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 文献综述 | 第8-22页 |
1.1 烯醇酶背景介绍 | 第8-17页 |
1.1.1 简介 | 第8-9页 |
1.1.2 烯醇酶的结构特点 | 第9-10页 |
1.1.3 烯醇酶的催化机理 | 第10-11页 |
1.1.4 烯醇酶的生理功能 | 第11-17页 |
1.2 蛋白分子三维结构研究 | 第17-19页 |
1.2.1 结构生物学概论 | 第17页 |
1.2.2 测定蛋白分子三维结构的实验技术方法 | 第17页 |
1.2.3 X-射线晶体衍射技术 | 第17-19页 |
1.3 蛋白质晶体学 | 第19-22页 |
1.3.1 蛋白质结晶的理论基础 | 第19-20页 |
1.3.2 蛋白质结晶的方法 | 第20页 |
1.3.3 影响蛋白质晶体生长的因素 | 第20-22页 |
第二章 果蝇烯醇酶的基因克隆 | 第22-32页 |
2.1 实验原料及实验仪器 | 第22-23页 |
2.1.1 实验材料 | 第22页 |
2.1.2 试剂 | 第22页 |
2.1.3 实验仪器 | 第22页 |
2.1.4 试剂配制 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-29页 |
2.2.1 果蝇烯醇酶(69-500)蛋白序列信息 | 第23-24页 |
2.2.2 目的基因的克隆 | 第24-27页 |
2.2.3 目的基因的提取和鉴定 | 第27-29页 |
2.3 实验结果与讨论 | 第29-32页 |
2.3.1 阳性克隆的鉴定 | 第29-31页 |
2.3.2 重组质粒的测序 | 第31-32页 |
第三章 果蝇烯醇酶的表达及纯化 | 第32-46页 |
3.1 实验试剂及实验仪器 | 第32-34页 |
3.1.1 实验仪器 | 第32页 |
3.1.2 实验所用试剂 | 第32-34页 |
3.2 实验方法 | 第34-40页 |
3.2.1 目的蛋白的表达 | 第34-36页 |
3.2.2 目的蛋白的纯化 | 第36-40页 |
3.3 实验结果与讨论 | 第40-46页 |
3.3.1 果蝇烯醇酶(69-500)的诱导表达 | 第40-41页 |
3.3.2 果蝇烯醇酶(69-500)的纯化 | 第41-46页 |
第四章 果蝇烯醇酶的结晶与晶体结构解析 | 第46-56页 |
4.1 实验试剂 | 第46页 |
4.2 实验方法 | 第46-48页 |
4.2.1 结晶前测试Pre-Crystallization Test | 第46-47页 |
4.2.2 晶体的大量筛选、优化 | 第47页 |
4.2.3 结构的解析与完善 | 第47-48页 |
4.3 实验结果与讨论 | 第48-56页 |
4.3.1 果蝇烯醇酶蛋白晶体的筛选与优化 | 第48-49页 |
4.3.2 果蝇烯醇酶(59-600)蛋白晶体数据的收集与处理 | 第49-51页 |
4.3.3 果蝇烯醇酶(59-600)蛋白的结构 | 第51-56页 |
结论与展望 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
致谢 | 第66-68页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第68-69页 |