| 摘要 | 第3-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 常用缩略语 | 第15-17页 |
| 前言 | 第17-23页 |
| 第一部分 不同的重组病毒载体在大鼠骨髓间充质干细胞中的转导效率及基因表达水平 | 第23-43页 |
| 1. 引言 | 第23-26页 |
| 2. 材料和方法 | 第26-35页 |
| 2.1 SD 大鼠骨髓间充质干细胞（RMSCS）的分离、纯化和培养 | 第26-27页 |
| 2.1.1 材料 | 第26页 |
| 2.1.2 骨髓单个核细胞分离方法 | 第26-27页 |
| 2.1.3 骨髓单个核细胞纯化和培养方法 | 第27页 |
| 2.2 SD 大鼠RMSCS 的流式细胞仪鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.1 材料 | 第27-28页 |
| 2.2.2 流式鉴定步骤 | 第28页 |
| 2.3 细胞免疫组织化学染色 | 第28-29页 |
| 2.3.1 材料 | 第28-29页 |
| 2.3.2 方法 | 第29页 |
| 2.4 腺病毒、腺相关病毒以及慢病毒 | 第29-33页 |
| 2.5 显微镜观察以及流式细胞仪检测AD、AAV 及LV 对体外培养的RMSCS转导效率 | 第33-34页 |
| 2.5.1 病毒材料 | 第33页 |
| 2.5.2 显微镜观察及流式细胞仪检测病毒的转导效率 | 第33-34页 |
| 2.6 计算机分析软件 | 第34-35页 |
| 3. 结果 | 第35-41页 |
| 3.1 SD 大鼠RMSCS 的培养情况 | 第35页 |
| 3.2 SD 大鼠RMSCS 的鉴定 | 第35-36页 |
| 3.3 第五代RMSCS 免疫细胞化学染色结果 | 第36-38页 |
| 3.4 AD、RAAV 及LV 对体外培养的RMSCS 的转导效率 | 第38-41页 |
| 4. 讨论 | 第41-43页 |
| 第二部分 骨髓间充质干细胞视网膜下移植后存活状态及对视网膜变性治疗作用的观察 | 第43-64页 |
| 1. 引言 | 第43-46页 |
| 2. 材料和方法 | 第46-58页 |
| 2.1 RMSCS的分离、纯化和培养 | 第46-47页 |
| 2.1.1 材料 | 第46页 |
| 2.1.2 骨髓单个核细胞分离方法 | 第46-47页 |
| 2.1.3 骨髓单个核细胞纯化和培养方法 | 第47页 |
| 2.2 SD 大鼠RMSCS 的流式细胞仪鉴定 | 第47-48页 |
| 2.2.1 材料 | 第47-48页 |
| 2.2.2 流式鉴定步骤 | 第48页 |
| 2.3 稳定表达GFP 的RMSCS 细胞株的建立 | 第48-49页 |
| 2.3.1 材料 | 第48-49页 |
| 2.3.2 有限稀释法步骤 | 第49页 |
| 2.3.3 挑克隆环实验步骤 | 第49页 |
| 2.4 实验动物 | 第49-50页 |
| 2.5 大鼠视网膜下间隙注射 | 第50-52页 |
| 2.5.1 移植前细胞的准备 | 第50页 |
| 2.5.2 视网膜下移植（前路法） | 第50-51页 |
| 2.5.3 玻璃体腔移植 | 第51-52页 |
| 2.5.4 rMSCs 大鼠视网膜下注射 | 第52页 |
| 2.6 SD 大鼠视网膜下间隙注射后眼底荧光体视镜观察 | 第52页 |
| 2.7 SD 大鼠移植细胞共聚焦显微镜的观察 | 第52-55页 |
| 2.7.1 灌流材料和步骤 | 第52-53页 |
| 2.7.2 取材 | 第53页 |
| 2.7.3 冰冻切片步骤 | 第53页 |
| 2.7.4 染色 | 第53-54页 |
| 2.7.5 共聚焦显微镜( Leica TCS SP2 )观察 | 第54-55页 |
| 2.8 RCS 大鼠移植与对照眼视网膜结构及光感受器存活状态的光镜观察 | 第55-58页 |
| 2.8.1 取材 | 第55页 |
| 2.8.2 石蜡切片步骤 | 第55-56页 |
| 2.8.3 HE 染色 | 第56-57页 |
| 2.8.4 光镜观察 | 第57-58页 |
| 3. 结果 | 第58-63页 |
| 3.1 稳定表达GFP 的RMSCS 细胞株的建立 | 第58-59页 |
| 3.2 移植的MSC-GFP 在SD 大鼠视网膜下间隙内的存活情况 | 第59-60页 |
| 3.3 移植的MSC-GFP 在SD 大鼠视网膜下间隙内的分布情况 | 第60-62页 |
| 3.4 经过RMSCS 视网膜下间隙移植减少RCS 大鼠光感受器变性 | 第62-63页 |
| 4. 讨论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第71-73页 |
