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核糖体蛋白Urb1作用于mTORC1信号通路下游调控斑马鱼消化器官发育

摘要第7-10页
Abstract第10-14页
第1章 综述第15-33页
    1.1 ENU诱导正向遗传筛选第15-18页
    1.2 肝脏发育第18-21页
    1.3 胰腺发育第21-23页
    1.4 肠道发育第23-27页
    1.5 核糖体合成第27-30页
    1.6 mTORC1信号通路第30-33页
第2章 材料与方法第33-53页
    2.1 实验动物及饲养第33页
    2.2 试剂、耗材和仪器第33-34页
    2.3 培养基和主要试剂的配制第34-37页
        2.3.1 培养基的配制第34页
        2.3.2 各种缓冲液的配制第34-35页
        2.3.3 原位杂交相关溶液的配制第35-36页
        2.3.4 抗体显色相关溶液的配制第36页
        2.3.5 Western Blot 相关溶液的配制第36页
        2.3.6 Northern Blot第36-37页
        2.3.7 其他溶液的配制第37页
    2.4 质粒和菌种第37页
    2.5 实验方法第37-53页
        2.5.1 ENU诱变第37-38页
        2.5.2 定位克隆第38页
        2.5.3 斑马鱼总RNA提取第38-39页
        2.5.4 基因组提取第39页
        2.5.5 反转录 cDNA 制备第39页
        2.5.6 重组质粒的构建第39-42页
        2.5.7 反义探针的制备第42页
        2.5.8 亚克隆连接第42-43页
        2.5.9 DNA纯化第43页
        2.5.10 胚胎注射第43-44页
        2.5.11 全胚胎原位杂交第44-45页
        2.5.12 荧光全胚原位杂交第45-47页
        2.5.13 抗体显色第47页
        2.5.14 细胞流式筛选第47-48页
        2.5.15 细胞凋亡实验第48页
        2.5.16 胚胎热激实验第48-49页
        2.5.17 药物处理实验第49页
        2.5.18 Western Blot第49-50页
        2.5.19 蔗糖密度梯度离心第50页
        2.5.20 Northern Blot第50-51页
        2.5.21 Luciferase assay第51页
        2.5.22 O-propargyl-puromycin (OPP) assay第51-53页
第3章 实验结果第53-67页
    3.1 斑马鱼cq31突变体胚胎早期消化器官发育缺陷第53-54页
    3.2 urb1是cq31突变体的突变基因第54-57页
    3.3 斑马鱼Urb1蛋白对于早期消化器官的细胞增殖具有重要作用第57-60页
    3.4 Urb1作用于mTOR信号通路下游调控胚胎早期消化器官发育第60-63页
    3.5 Urb1作用于mTORC1信号通路下游调控核糖体亚基的组装以及蛋白质的合成第63-67页
第4章 实验讨论第67-71页
参考文献第71-85页
致谢第85-87页
博士在读期间发表论文及科研工作第87页

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