| Abstract | 第4页 |
| Table of Contents | 第5-7页 |
| 1. Introduction | 第7-20页 |
| 1.1 What is MicroRNA | 第7-9页 |
| 1.2 MiR-145 | 第9-11页 |
| 1.3 MicroRNARole in hematopoiesis | 第11-12页 |
| 1.4 MicroRNA Role inErythropoiesis | 第12-13页 |
| 1.5 MicroRNA Role inLymphocytes | 第13-14页 |
| 1.6 MicroRNA Role inMyelopoiesis | 第14-16页 |
| 1.7 The role of meis1 in primitive and definitive hematopoiesis | 第16-17页 |
| 1.8 Zebra fish as a model | 第17-19页 |
| 1.9 Research objectives | 第19-20页 |
| 2. Materials and Methods | 第20-41页 |
| 2.1 Experimental Animals and embryos collection | 第20页 |
| 2.2 Total RNA isolation | 第20-21页 |
| 2.3 Preparation of cDNA | 第21页 |
| 2.4 RT-PCR (reverse-transcription PCR) analysis of meis1 | 第21-22页 |
| 2.5 Real-time quantitative PCR analysis of U6 transcript and targetgenes analysis of Mir-145 | 第22-24页 |
| 2.6 Purification of PCR products | 第24页 |
| 2.7 Double digestion of pcs2+-egfp vector | 第24-25页 |
| 2.8 Double digestion of meis1-3UTR with pcs2+-egfp | 第25-26页 |
| 2.9 Ligation of meis1-3UTR-pcs2+-egfp | 第26页 |
| 2.10 competent cells preparation | 第26-27页 |
| 2.11 Transformation | 第27-28页 |
| 2.12 Meis1-egfp-pcs2+ plasmid Purification | 第28-29页 |
| 2.13 Single digestion | 第29-30页 |
| 2.14 Constructs design and mRNA synthesis of meis | 第30页 |
| 2.15 mRNA synthesis of meis1-egfp:Capped Transcription Reaction Assembly | 第30-31页 |
| 2.16 Microinjection | 第31-34页 |
| 2.16.1 Micinjectionconfirmationmeis1-egfp | 第32-33页 |
| 2.16.2 Microinjectionof meis1-pcs2+-egfp mRNA | 第33-34页 |
| 2.16.3 Microinjection of miR-14528 | 第34页 |
| 2.17 Preparation of DNA and synthesis of antisense RNA probe | 第34-36页 |
| 2.18 O-dianisidine staining | 第36页 |
| 2.19 Preparation of embryos for in situ hybridization | 第36-37页 |
| 2.20 In situ Hybridization | 第37-39页 |
| 2.21 Imaging | 第39-41页 |
| 3. Results and Discussion | 第41-56页 |
| 3.1 miR-145 is expressed during Zebra fish early developmental stages | 第41-42页 |
| 3.2 miR-145 is required for erythropoiesis limitation and myeloid expansion in Zebra fish | 第42-48页 |
| 3.3 miR-145 is required for HSC formation and definitive hematopoisis | 第48-51页 |
| 3.4 MiR-145 represses erythroid cell cycle progression by targeting meis1 | 第51-56页 |
| Acknowledgements | 第56-57页 |
| References | 第57-66页 |
