| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 玉米胚乳蛋白质组平衡 | 第11-13页 |
| 1.1.1 玉米胚乳蛋白质组成 | 第11页 |
| 1.1.2 玉米胚乳蛋白质与高赖氨酸育种 | 第11-12页 |
| 1.1.3 玉米胚乳蛋白质组平衡与高赖氨酸育种 | 第12-13页 |
| 1.2 植物蛋白翻译延伸因子的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2.1 植物蛋白延伸因子的分类 | 第13页 |
| 1.2.2 植物蛋白延伸因子的功能 | 第13-15页 |
| 1.3 植物蛋白延伸因子与玉米醇溶蛋白的关系 | 第15-16页 |
| 1.4 玉米遗传转化的研究现状 | 第16-18页 |
| 1.4.1 原生质体 | 第16-17页 |
| 1.4.2 胚性愈伤组织 | 第17页 |
| 1.4.3 幼胚 | 第17-18页 |
| 1.4.4 茎尖分生组织 | 第18页 |
| 1.4.5 子房、花粉 | 第18页 |
| 1.5 目的意义 | 第18-20页 |
| 1.6 技术路线 | 第20-21页 |
| 2 实验材料与方法 | 第21-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株、质粒和引物 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 培养基 | 第21-22页 |
| 2.1.5 抗生素与激素 | 第22-23页 |
| 2.1.6 主要仪器设备 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-31页 |
| 2.2.1 实验中所用的引物 | 第23-24页 |
| 2.2.2 启动子克隆 | 第24-25页 |
| 2.2.3 目的基因的克隆 | 第25-26页 |
| 2.2.4 终止子T35S的克隆 | 第26页 |
| 2.2.5 RNA干涉载体构建 | 第26-29页 |
| 2.2.6 干涉载体转化农杆菌 | 第29页 |
| 2.2.7 农杆菌介导的玉米胚性愈伤组织的遗传转化 | 第29-31页 |
| 2.3 T0代转基因植株的检测 | 第31页 |
| 2.3.1 T0代转基因植株的PCR检测 | 第31页 |
| 2.3.2 T0代转基因株系的测序检测 | 第31页 |
| 2.4 T1代转基因植株的PCR检测 | 第31页 |
| 2.5 T0代与αRNAi自交系杂交F1代检测 | 第31-35页 |
| 2.5.1 F1代PCR检测 | 第31页 |
| 2.5.2 F1代转基因株系的qRT-PCR检测 | 第31-32页 |
| 2.5.3 F1代籽粒蛋白含量SDS-PAGE分析 | 第32-33页 |
| 2.5.4 F1代籽粒总蛋白含量测定 | 第33-34页 |
| 2.5.5 F1代籽粒淀粉含量测定 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-49页 |
| 3.1 干涉载体的构建 | 第35-39页 |
| 3.1.1 启动子克隆 | 第35页 |
| 3.1.2 目的基因EF1α及EF2正向及反向片段的克隆 | 第35-36页 |
| 3.1.3 茎环结构环部片段克隆 | 第36页 |
| 3.1.4 终止子T35S克隆 | 第36-37页 |
| 3.1.5 酶切法构建干涉载体 | 第37-39页 |
| 3.2 干涉载体转化农杆菌 | 第39-40页 |
| 3.3 农杆菌介导的玉米胚性愈伤组织的遗传转化 | 第40-41页 |
| 3.4 T0代转基因植株的检测 | 第41-42页 |
| 3.5 T1代转基因植株的PCR检测 | 第42页 |
| 3.6 T0代与αRNAi自交系杂交F1代检测 | 第42-49页 |
| 3.6.1 F1代的PCR检测 | 第42-43页 |
| 3.6.2 F1代的qRT-PCR检测 | 第43-45页 |
| 3.6.3 F1代籽粒蛋白含量SDS-PAGE分析 | 第45-47页 |
| 3.6.4 F1代籽粒总蛋白含量测定 | 第47-48页 |
| 3.6.5 F1代籽粒淀粉含量测定 | 第48-49页 |
| 3.6.6 总蛋白含量与总淀粉含量相关分析 | 第49页 |
| 4 讨论与结论 | 第49-53页 |
| 4.1 讨论 | 第49-51页 |
| 4.1.1 蛋白翻译延伸因子与玉米蛋白质组平衡的关系 | 第49-50页 |
| 4.1.2 蛋白翻译延伸因子维持玉米蛋白质组平衡的机理推测 | 第50页 |
| 4.1.3 玉米籽粒中蛋白质含量与淀粉含量的关系 | 第50-51页 |
| 4.1.4 RNA干涉效率 | 第51页 |
| 4.2 小结 | 第51-52页 |
| 4.3 展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57-59页 |
| 附录1 干涉载体PCR检测测序结果 | 第59页 |
