摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
一、引言 | 第10-20页 |
1. 水稻齿矮病毒(Rice ragged stunt virus,RRSV)的研究概况 | 第10-14页 |
1.1 水稻锯齿叶矮缩病的发生和危害 | 第10页 |
1.2 水稻锯齿叶矮缩病的病害特征 | 第10页 |
1.3 RRSV的寄主与传播介体 | 第10-11页 |
1.4 RRSV的病原性质 | 第11页 |
1.5 RRSV的分类地位 | 第11-12页 |
1.6 RRSV的基因组结构与功能 | 第12-14页 |
2. 昆虫细胞培养的研究概况 | 第14-16页 |
3. 呼肠孤病毒在其宿主细胞内复制的研究 | 第16-17页 |
4. 免疫荧光和免疫电镜技术 | 第17-18页 |
4.1 免疫荧光技术 | 第17-18页 |
4.2 免疫电镜技术 | 第18页 |
5.本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
二、材料与方法 | 第20-25页 |
1. 材料 | 第20页 |
1.1 材料来源 | 第20页 |
1.2 试剂与抗体 | 第20页 |
1.3 抗体与褐飞虱培养细胞 | 第20页 |
1.4 实验仪器 | 第20页 |
2. 实验方法 | 第20-25页 |
2.1 RT-PCR方法扩增RRSV S10基因 | 第20-22页 |
2.2 Western blot方法检测病株中的RRSV | 第22页 |
2.3 RRSV粗提液的制备 | 第22-23页 |
2.4 电镜负染技术检测粗提液中的RRSV病毒粒体 | 第23页 |
2.5 RRSV侵染褐飞虱培养细胞 | 第23页 |
2.6 免疫荧光方法观测RRSV侵染褐飞虱培养细胞 | 第23-24页 |
2.7 免疫电镜技术观测RRSV侵染褐飞虱培养细胞 | 第24-25页 |
三、结果与分析 | 第25-35页 |
1. 褐飞虱培养细胞的培养与维持 | 第25页 |
2. 水稻病株中RRSV的检测 | 第25-27页 |
2.1 RT-PCR方法检测水稻病株中的RRSV | 第25-26页 |
2.2 Western blot检测水稻病株中的RRSV | 第26-27页 |
2.3 电镜负染技术检测RRSV粗提液中的病毒粒体 | 第27页 |
3. RRSV侵染褐飞虱培养细胞及其在细胞内的定位和复制机制 | 第27-35页 |
3.1 RT-PCR方法检测水褐飞虱细胞中的RRSV | 第27-28页 |
3.2 RRSV在褐飞虱培养细胞中的持久性侵染 | 第28-35页 |
四、讨论 | 第35-38页 |
1. 利用褐飞虱培养细胞研究RRSV的优势 | 第35页 |
2. RRSV非结构蛋白Pns6为viroplasm的组成成分 | 第35页 |
3. RRSV的装配模型 | 第35-37页 |
4. RRSV在褐飞虱培养细胞中的扩散 | 第37页 |
5. 本研究的创新点 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-45页 |
附录 | 第45-52页 |
致谢 | 第52页 |